实验二十七大白鼠胃液分泌的调节 、目的和原理 胃液的主要成分之一是胃酸,即盐酸。它是由胃腺的壁细胞分泌的。通常以全部胃腺在单位时间内 分泌的盐酸量来表示胃酸分泌的多寡,这一指标称为胃酸排出量。胃酸的分泌受神经和体液的双重 调节,当壁细胞受到神经递质(乙酰胆碱)、胃肠激素(胃泌素)和旁分泌激素(组织胺)的刺激 时,其分泌作用大大加强。 本实验的目的是:(1)以每10分钟的胃酸排出量为指标,观察这三种促泌物质对胃酸分泌的促进 作用;(2)观察应用组织胺和乙酰胆碱的颉颃剂甲氰咪胍和阿托品后对前二者泌酸作用的影响,从而 验证胃酸分泌的理论;(3)学习用曲线图来处理实验结果 二、实验对象大白鼠 三、器材和用品 00ˆ~5000毫升的下口瓶、输液滴管、橡皮管、何氏夹、恒温水浴锅、温度计、蛇形管、玻璃接 管、头皮针、直径1.5毫米长约30厘米的细塑料管(作胃管用)、直径4毫米长约3厘米的粗塑料管 (作口管用)、直径4毫米长约6厘米的粗塑料管(作胃插管用)、直径3毫米长约2.5厘米的塑料管 (作气管插管用)、1毫升和5毫升的注射器及针头、100毫升的锥形瓶、碱式滴定管和支架等、小动 物手术器械、纱布、棉球、缝针、丝钱、乙醚、5%戊巴比妥钠溶液、生理盐水、0. oin NaOH溶液、 1%酚酞、磷酸组织胺、甲氰咪胍注射液、五肽胃泌素、氨甲酰胆碱( carbachol、阿托品。 四、方法与步骤 1.仪器装置按图27-1装置实验仪器。将生理盐水盛于下口瓶内,置于高处,并按图所示作一恒 压装置(即瓶口用橡皮塞密封,橡皮塞中间插一玻璃管,玻璃管插入生理盐水内离瓶底约4厘米,另 端与大气相通,这种装置可使灌入胃的液体压恒定)。下口瓶下端依次连接橡皮管、输液滴管、蛇 形管,蛇形管的另一端接橡皮管和玻璃接管。在下口瓶下端的橡皮管与输液管之间加一何氏夹,蛇 形管浸浴λ40℃的水浴锅内,蛇形管另端通过橡皮管、玻璃接管、头皮针与细塑料管相连,细塑料 管的另一端通过食管和贲门而进入胃内,细塑料管通过口腔处,其外套一大管(粗塑料管)(参见图 27-1)
实验二十七 大白鼠胃液分泌的调节 一、目的和原理 胃液的主要成分之一是胃酸，即盐酸。它是由胃腺的壁细胞分泌的。通常以全部胃腺在单位时间内 分泌的盐酸量来表示胃酸分泌的多寡，这一指标称为胃酸排出量。胃酸的分泌受神经和体液的双重 调节，当壁细胞受到神经递质（乙酰胆碱）、胃肠激素（胃泌素）和旁分泌激素（组织胺）的刺激 时，其分泌作用大大加强。 本实验的目的是：(1)以每10分钟的胃酸排出量为指标，观察这三种促泌物质对胃酸分泌的促进 作用；(2)观察应用组织胺和乙酰胆碱的颉颃剂甲氰咪胍和阿托品后对前二者泌酸作用的影响，从而 验证胃酸分泌的理论；(3)学习用曲线图来处理实验结果。 二、实验对象大白鼠 三、器材和用品 000~5000毫升的下口瓶、输液滴管、橡皮管、何氏夹、恒温水浴锅、温度计、蛇形管、玻璃接 管、头皮针、直径1.5毫米长约30厘米的细塑料管（作胃管用）、直径4毫米长约3厘米的粗塑料管 （作口管用）、直径4毫米长约6厘米的粗塑料管（作胃插管用）、直径3毫米长约2.5厘米的塑料管 （作气管插管用）、1毫升和5毫升的注射器及针头、100毫升的锥形瓶、碱式滴定管和支架等、小动 物手术器械、纱布、棉球、缝针、丝钱、乙醚、5%戊巴比妥钠溶液、生理盐水、0.01N NaOH溶液、 1%酚酞、磷酸组织胺、甲氰咪胍注射液、五肽胃泌素、氨甲酰胆碱（carbachol）、阿托品。 四、方法与步骤 1.仪器装置按图27-1装置实验仪器。将生理盐水盛于下口瓶内，置于高处，并按图所示作一恒 压装置（即瓶口用橡皮塞密封，橡皮塞中间插一玻璃管，玻璃管插入生理盐水内离瓶底约4厘米，另 端与大气相通，这种装置可使灌入胃的液体压恒定）。下口瓶下端依次连接橡皮管、输液滴管、蛇 形管，蛇形管的另一端接橡皮管和玻璃接管。在下口瓶下端的橡皮管与输液管之间加一何氏夹，蛇 形管浸浴入40℃的水浴锅内，蛇形管另端通过橡皮管、玻璃接管、头皮针与细塑料管相连，细塑料 管的另一端通过食管和贲门而进入胃内，细塑料管通过口腔处，其外套一大管(粗塑料管) (参见图 27-1)
何氏夹 铺管在胃内的位置 输液滴管 温度计 蛇形管 头皮针头 气管插管 恒温水 胃插管 有刻度离心管 图27-1收集大鼠胃酸分泌的实验装置 2.动物手术 实验手术前,动物应禁食12ˆ24小时,任其自由饮水。实验时,先用乙醚将动物轻度麻醉,立即 称体重,然后用0.5%戊巴比妥钠溶液按30-50πg/kg体重作腹腔麻醉。待动物麻醉后,将其背位圊定 于手术台上。 剪去颈部的毛,沿颈部正中线作一约1.5~2.0厘米的皮肤切口,钝性分开皮下组织和肌肉,暴 露和分离气管。在气管下穿一丝线并提起气管,用剪刀或手术刀在环状软骨下作一倒“T”形切 口,将气管插管自切口处向肺脏方向插入,然后用丝线扎紧,气管插管的另一端露在皮肤外面,并 在颈部皮肤缝合2~4针,以防气管插管滑出。应随时注意动物呼吸情况,保持呼吸道通畅,如有血液 或分泌物堵塞气管插管,可用注射器抽干。 剪去动物上腹部的毛,用温水润湿和清洁剪毛后的皮肤,盖上用纱布制成的泂巾。于剑突下作 腹部正中切口,长约3厘米,并沿腹白线剖开腹腔。在左上腹内找到食管、胃和十二指肠。将胃移至 腹腔外纱布上,于贲门处分离食管表面的迷走神经,在迷走神经与贲门浆膜层之间,用丝线穿绕贲 门一周。这样当用此丝线结扎时,可避免将迷走神经结扎在内。在大鼠口腔内插入塑料套管,套管 端达咽部,另一端在口腔外。将细塑料管通过此套管,经食管、贲门插入胃内约2厘米左右,用手 指在胃表面触到胃内的细塑料管后,将贲门处的丝线结扎,以防胃管滑出。 在胃和十二指肠交界处穿绕两根丝线,二线相距约1厘米(注意:此处血管丰富,穿线时应谨防 出血)。先将十二指肠远端的丝线结扎,然后在靠近幽门端的十二指肠壁剪一小孔,把粗塑料管由 幽门方向插入胃内,深约1厘米,用事先准备好的丝线结扎,以固定此塑料管。(参见图27-1的右上 图)。开启下口瓶下端橡皮管的何氏夹,温热生理盐水即由贲门端经胃管入胃,再由幽门端经胃插 管流出体外。先用大量生理盐水冲洗胃,使残留食物由胃插管流出体外,直至流出的盐水澄清,即 表示胃内残留食物被洗净时,再调节何氏夹,减少盐水的灌入量,使其为每分钟0.5~1.0毫升。然后 将胃送入腹腔,并作间断缝合,关闭腹腔,避免体温丧失。再将动物转向右侧卧位,用电灯泡照射 来维持动物体温 3.胃液样品的收集和胃酸的测定 手术完毕后,使动物稳定半小时,然后调节何氏夹,使输入盐水的速度为每分钟20滴左右。用 锥形瓶收集由胃插管流出的液体,每10分钟收集1个胃液样品
图27-1 收集大鼠胃酸分泌的实验装置 2.动物手术 实验手术前，动物应禁食12~24小时，任其自由饮水。实验时，先用乙醚将动物轻度麻醉，立即 称体重，然后用0.5%戊巴比妥钠溶液按30-50mg/kg体重作腹腔麻醉。待动物麻醉后，将其背位固定 于手术台上。 剪去颈部的毛，沿颈部正中线作一约1.5～2.0厘米的皮肤切口，钝性分开皮下组织和肌肉，暴 露和分离气管。在气管下穿一丝线并提起气管，用剪刀或手术刀在环状软骨下作一倒“Ｔ”形切 口，将气管插管自切口处向肺脏方向插入，然后用丝线扎紧，气管插管的另一端露在皮肤外面，并 在颈部皮肤缝合2~4针，以防气管插管滑出。应随时注意动物呼吸情况，保持呼吸道通畅，如有血液 或分泌物堵塞气管插管，可用注射器抽干。 剪去动物上腹部的毛，用温水润湿和清洁剪毛后的皮肤，盖上用纱布制成的洞巾。于剑突下作 腹部正中切口，长约3厘米，并沿腹白线剖开腹腔。在左上腹内找到食管、胃和十二指肠。将胃移至 腹腔外纱布上，于贲门处分离食管表面的迷走神经，在迷走神经与贲门浆膜层之间，用丝线穿绕贲 门一周。这样当用此丝线结扎时，可避免将迷走神经结扎在内。在大鼠口腔内插入塑料套管，套管 一端达咽部，另一端在口腔外。将细塑料管通过此套管，经食管、贲门插入胃内约2厘米左右，用手 指在胃表面触到胃内的细塑料管后，将贲门处的丝线结扎，以防胃管滑出。 在胃和十二指肠交界处穿绕两根丝线，二线相距约1厘米（注意：此处血管丰富，穿线时应谨防 出血）。先将十二指肠远端的丝线结扎，然后在靠近幽门端的十二指肠壁剪一小孔，把粗塑料管由 幽门方向插入胃内，深约1厘米，用事先准备好的丝线结扎，以固定此塑料管。（参见图27-1的右上 图）。开启下口瓶下端橡皮管的何氏夹，温热生理盐水即由贲门端经胃管入胃，再由幽门端经胃插 管流出体外。先用大量生理盐水冲洗胃，使残留食物由胃插管流出体外，直至流出的盐水澄清，即 表示胃内残留食物被洗净时，再调节何氏夹，减少盐水的灌入量，使其为每分钟0.5~1.0毫升。然后 将胃送入腹腔，并作间断缝合，关闭腹腔，避免体温丧失。再将动物转向右侧卧位，用电灯泡照射 来维持动物体温。 3.胃液样品的收集和胃酸的测定 手术完毕后，使动物稳定半小时，然后调节何氏夹，使输入盐水的速度为每分钟20滴左右。用 锥形瓶收集由胃插管流出的液体，每10分钟收集1个胃液样品
以酚酞为批示剂,用0.0 n NaOH溶液滴定每10分钟所收集的胃液样品。将中和胃酸所用去的 NaOH量(升)×NaOH克当量,即为每10分钟胃酸排出量,换算成微克当量(μEp)/10分钟来表示。 4观察项目 (1)胃酸的基础分泌:每10分钟收集1个胃液样品,共收集34个(或者68个)。测定每个样品中 的胃酸排出量,以此作为胃酸的基础排出量,或作为正常对照。 (2)组织胺的泌酸作用:在收集对照样品后,立即皮下注射磷酸组织胺(1mg/kg),连续收集6^8个 样品,测定每个样品中的胃酸排出量 (3)甲氰咪胍对组织胺泌酸作用的影响:肌肉注射甲氰咪胍(250mg/kg),收集3个样品后,再皮 下注射磷酸组织胺(lmg/kg),连续收集6~8个样品,测定每个样品中的胃酸排出量。 (4)五肽胃泌素的泌酸作用:在收集对照样品后,立即皮下注射五肽胃泌素(100μg/kg),连续收 集68个样品,测定每个样品中的胃酸排出量。 (5)氨甲酰胆碱的泌酸作用:收集对照样品后,肌肉注射氨甲酰胆碱(10μg/kg),连续收集68 个样品,测定每个样品中的胃酸排出量 (6)阿托品对氨甲酰胆碱泌酸作用的影响:皮下注射阿托品(lmg),收集3个样品后,再皮下注 射氨甲酰胆碱(10μg/kg),连续收集6~8个样品,测每个样品的胃酸排出量。 五、要求 1.上述6项实验,每一小组只做一项。 2.记录每个样品的液体量和测定所得的每10分钟的胃酸排出量,将这些数据列表表示。然后按 表的数据,以胃酸排出量为纵座标,时间为横座标,绘制曲线图。用箭头表示注射药物的时间,并 加以说明。各组同学可互相交流实验结果及所绘制的曲线图。然后进行全面总结 六、思考题 1.为了实验成功,你认为动物手术应注意哪此问题? 2.如果胃酸分泌过多,有哪些方法可减少胃酸分泌,其理论根据是什么?
以酚酞为批示剂，用0.01N NaOH溶液滴定每10分钟所收集的胃液样品。将中和胃酸所用去的 NaOH量(升)×NaOH克当量，即为每10分钟胃酸排出量，换算成微克当量(μEp)/10分钟来表示。 4.观察项目 ⑴胃酸的基础分泌：每10分钟收集1个胃液样品，共收集3~4个（或者6~8个）。测定每个样品中 的胃酸排出量，以此作为胃酸的基础排出量，或作为正常对照。 ⑵组织胺的泌酸作用：在收集对照样品后，立即皮下注射磷酸组织胺(1mg/kg)，连续收集6~8个 样品，测定每个样品中的胃酸排出量。 ⑶甲氰咪胍对组织胺泌酸作用的影响：肌肉注射甲氰咪胍（250mg/kg），收集3个样品后，再皮 下注射磷酸组织胺（1mg/kg），连续收集6~8个样品，测定每个样品中的胃酸排出量。 ⑷五肽胃泌素的泌酸作用：在收集对照样品后，立即皮下注射五肽胃泌素(100μg/kg)，连续收 集6~8个样品，测定每个样品中的胃酸排出量。 ⑸氨甲酰胆碱的泌酸作用：收集对照样品后，肌肉注射氨甲酰胆碱(10μg/kg），连续收集6~8 个样品，测定每个样品中的胃酸排出量。 ⑹阿托品对氨甲酰胆碱泌酸作用的影响：皮下注射阿托品（1mg），收集3个样品后，再皮下注 射氨甲酰胆碱（10μg/kg），连续收集6~8个样品，测每个样品的胃酸排出量。 五、要求 1.上述6项实验，每一小组只做一项。 2.记录每个样品的液体量和测定所得的每10分钟的胃酸排出量，将这些数据列表表示。然后按 表的数据，以胃酸排出量为纵座标，时间为横座标，绘制曲线图。用箭头表示注射药物的时间，并 加以说明。各组同学可互相交流实验结果及所绘制的曲线图。然后进行全面总结。 六、思考题 1.为了实验成功，你认为动物手术应注意哪此问题？ 2.如果胃酸分泌过多，有哪些方法可减少胃酸分泌，其理论根据是什么？
