第一章 浮游植物的采 集、计数与定 量方法
第一章 浮游植物的采 集、计数与定 量方法
浮游植物( Phytoplankon)又称浮游藻类,是水中悬浮生活的若 干种藻类的总称 浮游植物及其生产力是水生态系统的重要成员与重要功能之 是鱼类天然饵料的重要组成部分。由于浮游植物对环境的变化十分 敏感,故在环境监测中,也有重要作用。 我国淡水养殖的主要对象是鲢、鳙鱼类,它们的天然饵料常以浮 游植物为主。我们知道,不同类型的水体或同一水体的不同季节, 藻类的组成是不相同的,各种藻类的相对量在不断地变化。这种变 化是有一定的趋势的,这以后要专题介绍。就鲢鳙而言,藻类又有 易消化种类和不易消化种类之分,一般说来,硅藻门、金藻门、甲 藻门中种类易于消化,而蓝藻门、绿藻门、裸藻门中的多数种类难 于消化。因此,在鱼类生长季节,研究水中藻类组成和现存量 Standing crop),可为养殖鱼类的合理投放提供重要的科学依据 同时为水生态研究及利用提供了有用的资料。 浮游植物的现存量,指的是某一瞬间单位水体中所存在的浮游植 物的量。这个量有两种表示方法,用数目单位表示成为密度,一般 用万个/升为单位,五、六十年代用之;用重量单位(mg/L)表示 的现存量称为生物量( Biomass。70年代以来被广泛使用
浮游植物（Phytoplankon）又称浮游藻类，是水中悬浮生活的若 干种藻类的总称。 浮游植物及其生产力是水生态系统的重要成员与重要功能之一， 是鱼类天然饵料的重要组成部分。由于浮游植物对环境的变化十分 敏感，故在环境监测中，也有重要作用。 我国淡水养殖的主要对象是鲢、鳙鱼类，它们的天然饵料常以浮 游植物为主。我们知道，不同类型的水体或同一水体的不同季节， 藻类的组成是不相同的，各种藻类的相对量在不断地变化。这种变 化是有一定的趋势的，这以后要专题介绍。就鲢鳙而言，藻类又有 易消化种类和不易消化种类之分，一般说来，硅藻门、金藻门、甲 藻门中种类易于消化，而蓝藻门、绿藻门、裸藻门中的多数种类难 于消化。因此，在鱼类生长季节，研究水中藻类组成和现存量（ Standing crop），可为养殖鱼类的合理投放提供重要的科学依据。 同时为水生态研究及利用提供了有用的资料。 浮游植物的现存量，指的是某一瞬间单位水体中所存在的浮游植 物的量。这个量有两种表示方法，用数目单位表示成为密度，一般 用万个／升为单位，五、六十年代用之；用重量单位（mg/L）表示 的现存量称为生物量（Biomass）。70年代以来被广泛使用
在以往的调查中,人们往往只注重浮游植物的种类 或数量,对其生物量则重视不够。其原因在于:1、浮游 植物生物量测算繁琐;2、对生物量与数量之间的本质差 别认识不足。由于不同水体,不同种类的藻类在个体上 有很大差异,仅仅用数量就很难评价不同水体饵料生物 的丰欠。这就要求,浮游植物的定量工作,必须以测算 生物量为目标 不同的调查方法,有时会得出不同的结果。关于浮 游生物的采集、计数与定量方法采用下列方法
在以往的调查中，人们往往只注重浮游植物的种类 或数量，对其生物量则重视不够。其原因在于：1、浮游 植物生物量测算繁琐；2、对生物量与数量之间的本质差 别认识不足。由于不同水体，不同种类的藻类在个体上 有很大差异，仅仅用数量就很难评价不同水体饵料生物 的丰欠。这就要求，浮游植物的定量工作，必须以测算 生物量为目标。 不同的调查方法，有时会得出不同的结果。关于浮 游生物的采集、计数与定量方法采用下列方法
采样 1.采水器:各种采水器均可,一般浅水(<10m)湖泊 可用玻璃瓶采水器,深水 湖泊或水库必须用颠倒采水 器。北原式采水器或有机玻璃采水器。 2.采样点的选择及采样层次的确定 选择采样点的原则是,采样点在平面上的分布要有代表性 般要求湖心、库心、江心必须采样,有条件时采样点可 适当多设一些,如大的湖湾、库湾、河流的上、中、下游水 体的沿岸带、浅水区等也要设点采集 凡水深不超过2米者,可于采样点水下0.5m处采水,水深2 10米以内,应距底05米处另采一个样,水深超过10米时 应于中层增采一个水样。一般来说池塘、水库、湖泊、河 流的样点及采水层次可总结如下:
一、采样： 1． 采水器：各种采水器均可，一般浅水（<10m）湖泊 可用玻璃瓶采水器，深水 湖泊或水库必须用颠倒采水 器。北原式采水器或有机玻璃采水器。 2．采样点的选择及采样层次的确定 选择采样点的原则是，采样点在平面上的分布要有代表性 。一般要求湖心、库心、江心必须采样，有条件时采样点可 适当多设一些，如大的湖湾、库湾、河流的上、中、下游水 体的沿岸带、浅水区等也要设点采集。 凡水深不超过2米者，可于采样点水下0.5m处采水，水深2 ～10米以内，应距底0.5米处另采一个样，水深超过10米时 。应于中层增采一个水样。一般来说池塘、水库、湖泊、河 流的样点及采水层次可总结如下：
(1)池塘:样点可设在距岸边1m处。水深小于2m时采一中 层水样。若水深大于2m时,最好采上、中、下层水样。 亚表层:水下20cm左右 中层:水体中间部分 下层:离底20cm左右 (2)水库及河流:样点可设在上、中、下游 上游:设十个点(亚表层或中层) 中游:水在2-3米深时设一个点,采2个样(上中层和中 下层) 下游:设2-3个样点。中心点3个样(上、中、下层), 两测点各一个样(中层) (3)湖泊:中心区设一点。进水口和出水口也应设点
⑴池塘：样点可设在距岸边1m处。水深小于2m时采一中 层水样。若水深大于2m时，最好采上、中、下层水样。 亚表层：水下20cm左右。 中 层：水体中间部分。 下 层：离底20cm左右。 ⑵水库及河流：样点可设在上、中、下游。 上游：设十个点（亚表层或中层） 中游：水在2－3米深时设一个点，采2个样（上中层和中 下层） 下游：设2－3个样点。中心点3个样（上、中、下层）， 两测点各一个样（中层） ⑶湖泊：中心区设一点。进水口和出水口也应设点
3.采样量及采样次数 每一个采样点应采水1000ml。若系一般性调查,可将各 层采的水等量混合,取1000m混合水样固定;或者分层采 水,分别计数后取平均值。分层采水可以了解每一采样点 各层水中浮游植物的数量和种类。 采得水样后立即加入10-15ml鲁哥氏液( Lugol's solution)固定,鲁哥氏液即将6克碘化钾溶于20ml水中, 待其完全溶解后,加入4克碘充分摇动,待碘全部溶解后定 容到100m即配成鲁哥氏液。泥沙多时沉淀后再取水样 采样次数可多可少。有条件时还可逐月采样一次,一般 情况可下及采样一次,最低限度应在春季、夏季末、秋初 各采样一次
3．采样量及采样次数 每一个采样点应采水1000ml。若系一般性调查，可将各 层采的水等量混合，取1000ml混合水样固定；或者分层采 水，分别计数后取平均值。分层采水可以了解每一采样点 各层水中浮游植物的数量和种类。 采得水 样后 立即 加入 1 0 －1 5 ml鲁 哥氏液 （Lugol’s solution）固定，鲁哥氏液即将6克碘化钾溶于20ml水中， 待其完全溶解后，加入4克碘充分摇动，待碘全部溶解后定 容到100ml即配成鲁哥氏液。泥沙多时沉淀后再取水样。 采样次数可多可少。有条件时还可逐月采样一次，一般 情况可下及采样一次，最低限度应在春季、夏季末、秋初 各采样一次
沉淀浓缩: 上述水样,摇匀后倒入1000ml圆柱形沉淀器中沉淀24小时,沉淀器可 用1000ml的瓶子代替。用虹吸管小心抽出上面不含藻类的“清液”。剩 下30-50m沉淀物转入50ml的定量瓶中;再用上述虹吸出来的“清液” 少许冲洗三次沉淀器,冲洗液转入定量瓶中。凡以碘液固定的水样固定 的水样,瓶塞要拧紧。还要加入2-4%的甲醛固定液(福尔马林),即 每100m样品需另加4m福尔马林,以利于长期保存。浓缩时切不可搅动 底部,万一动了应重新静止沉淀,为不是漂浮水面的某些微小生物等进 入虹吸管内,管口应始终低于水面,虹吸时流速流量不可过大,吸至澄 清液1/3时,应控制流速,使其成滴缓慢留下为宜 釆水时,每瓶样品必须贴上标签,标签上药剂在采集的时间、地点、 采水体积等,其他详细内容应另行做好记录,以备査对,避免错误 υoκ缩蚋体积枧淨游植物的多少而定。也可根据水的肥瘦确定浓缩体积 如下面的浓缩体积虧水透明度(体现水的肥瘦)之间关系大致如下 仅供参考。 瘦中肥 透明度>1m 50 . 30cm 老水特老水 30cm 20cm 浓缩的标准是以每个视野里有十几个藻类为宜
二、沉淀浓缩： 上述水样，摇匀后倒入1000ml圆柱形沉淀器中沉淀24小时，沉淀器可 用1000ml的瓶子代替。用虹吸管小心抽出上面不含藻类的“清液” 。剩 下30－50ml沉淀物转入50ml的定量瓶中；再用上述虹吸出来的“清液” 少许冲洗三次沉淀器，冲洗液转入定量瓶中。凡以碘液固定的水样固定 的水样，瓶塞要拧紧。还要加入2－4％的甲醛固定液（福尔马林），即 每100ml样品需另加4ml福尔马林，以利于长期保存。浓缩时切不可搅动 底部，万一动了应重新静止沉淀，为不是漂浮水面的某些微小生物等进 入虹吸管内，管口应始终低于水面，虹吸时流速流量不可过大，吸至澄 清液1／3时，应控制流速，使其成滴缓慢留下为宜。 采水时，每瓶样品必须贴上标签，标签上药剂在采集的时间、地点、 采水体积等，其他详细内容应另行做好记录，以备查对，避免错误。 浓缩的体积视浮游植物的多少而定。也可根据水的肥瘦确定浓缩体积 。如下面的浓缩体积与水透明度（体现水的肥瘦）之间关系大致如下， 仅供参考。 瘦 中 肥 透明度 >1m >50cm >30cm 老水 特老水 <30cm <20cm 浓缩的标准是以每个视野里有十几个藻类为宜。 1000ml 30 ml 50 ml 100 ml 不浓缩 稀释
三、计数方法 将浓缩沉淀后水样充分摇匀后,立即用0.lm吸量管吸出0.1m样品,注入 0.1ml计数框内(计数框的表面积最好是20×20m2),小心盖上盖玻片( 22×22m2),在盖盖玻片时,要求计数框内没有气泡,样品不溢出计数框。 然后在14×40或16×40倍显微镜下计数。即在400-600倍显微镜下计数。每 瓶标本计数两片取其平均值,每片大约计算50~100个视野,但视野数可按浮 游植物的多少而酌情增减,如平均每个视野不超过1~2个时,要数200个视野 以上,如果平均每个视野有5~6个时要数100个视野,如果平均每个视野有十 几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算结果和平均数之差如不大 于其均数的±15%,其均数视为有效结果,否则还必须测第三篇,直至三片 平均数与相近两数之差不超过均数的15%为止,这两个相近值的平均数,即 可视为计算结果。 在计数过程中,常碰到某些个体一部分在视野中,另一部分在视野外,这 时可规定出在视野上半圈者计数,出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞 表示,对不宜用细胞数表示的群体或丝状体,可求出其平均细胞数 计算时优势种类尽可能鉴别到属,注意不要把浮游植物当作杂质而漏计 计数时可按下列格式记录,然后再进行整理计算 视野数种类第一片第二片 正小球藻正正 正正 正衣藻 正正小环藻 公公 公公
三、计数方法 将浓缩沉淀后水样充分摇匀后，立即用0.1ml吸量管吸出0.1ml样品，注入 0.1ml计数框内（计数框的表面积最好是20×20㎜2），小心盖上盖玻片（ 22×22㎜2），在盖盖玻片时，要求计数框内没有气泡，样品不溢出计数框。 然后在14×40或16×40倍显微镜下计数。即在400－600倍显微镜下计数。每 瓶标本计数两片取其平均值，每片大约计算50～100个视野，但视野数可按浮 游植物的多少而酌情增减，如平均每个视野不超过1～2个时，要数200个视野 以上，如果平均每个视野有5～6个时要数100个视野，如果平均每个视野有十 几个时数50个视野就可以了。同一样品的两片计算结果和平均数之差如不大 于其均数的±15％，其均数视为有效结果，否则还必须测第三篇，直至三片 平均数与相近两数之差不超过均数的15％为止，这两个相近值的平均数，即 可视为计算结果。 在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中，另一部分在视野外，这 时可规定出在视野上半圈者计数，出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞 表示，对不宜用细胞数表示的群体或丝状体，可求出其平均细胞数。 计算时优势种类尽可能鉴别到属，注意不要把浮游植物当作杂质而漏计。 计数时可按下列格式记录，然后再进行整理计算。 视野数 种 类 第一片 第二片 正 小球藻 正正 正正 正 衣 藻 正 正 正正 小环藻 正 正
四、数量与生物量的计算: 1.一升水中的浮游植物的数量(N)可用下列公式计算: 一×Pn U 式中:Cs一计数框体积(m2),一般为400m Fs—每个视野的面积(mm2),nR2,视野半径r可用台微尺测出 (一定倍数下)。 Fn计数过的视野数。 升水样经沉淀浓缩后的体积(ml) 计数框的体积(m1)为0.1m1 Pn—计数出的浮游植物个数。 如果计数框、显微镜固定不变,Fn、V、U也固定不变,公式中的 b)可视为常数,此常数用K表示,则上述公式可 简化为:N=K×Pn Pn代表某种藻类的个数,计算结果N只表示一升水中这种藻类的 数量;Pn若代表各种藻类的总数,计算结果N则表示一升水中浮游 植物的总数。前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可
四、数量与生物量的计算： 1．一升水中的浮游植物的数量（N）可用下列公式计算： 式中：Cs — 计数框体积（㎜2），一般为400㎜2 。 Fs — 每个视野的面积（㎜2），лR2 ，视野半径r可用台微尺测出 （一定倍数下）。 Fn — 计数过的视野数。 V — 一升水样经沉淀浓缩后的体积（ml） U — 计数框的体积（ml）为0.1ml。 Pn — 计数出的浮游植物个数。 如果计数框、显微镜固定不变，Fn、V、U也固定不变，公式中的 （ ）可视为常数，此常数用K表示，则上述公式可 简化为：N=K×Pn。 Pn代表某种藻类的个数，计算结果N只表示一升水中这种藻类的 数量；Pn若代表各种藻类的总数，计算结果N则表示一升水中浮游 植物的总数。前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可。 Pn U V Fs Fn Cs N = U V Fs Fn Cs
2.生物量一般按体积来换算。这是因为浮游植物个体积小,直 接称重较困难,且其细胞比重多接近于1。可用形态相近似的几何 体积公式计算细胞体积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数 这样体积值(μm3)可直接换算为重量值(109μm3)可直接换算 为重量值(109μm3≈1毫克鲜藻重)。 下列体积公式,可供计算生物量时参考: 圆锥体:V=1/3mR2h 圆柱体:V=ⅡR2h 球体:V=4/3R3 椭圆体:V=4/3ab2π(a为长轴半径,b为短轴半径) 圆台体:V=1/3mH(R2+R2+R1+R2) 长方体与正方体ab×h或a 硅藻细胞的计算通式:Ⅴ=壳面面积×带面平均高度 不规则性藻类可分可为几个部分计算
2．生物量一般按体积来换算。这是因为浮游植物个体积小，直 接称重较困难，且其细胞比重多接近于1。可用形态相近似的几何 体积公式计算细胞体积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数。 这样体积值（μm-3）可直接换算为重量值（109μm-3）可直接换算 为重量值（109μm-3≈1毫克鲜藻重）。 下列体积公式，可供计算生物量时参考： 圆锥体：V=1/3лR2h 圆柱体：V=лR2h 球 体：V=4/3лR3 椭圆体：V＝4/3ab2л（a为长轴半径，b为短轴半径） 圆台体：V＝1/3лH（ + ） 长方体与正方体ab×h或a 3 硅藻细胞的计算通式：V＝壳面面积×带面平均高度 不规则性藻类可分可为几个部分计算。 2 R1 1 2 2 R2 + R + R