第十六章纤维素酶 制作:第六小组 王琦高雷王璐白岩青
第十六章 纤维素酶 制作:第六小组 王琦 高雷 王璐 白岩青
目 、概况 )二、特性 三、影响酶活因素; 四、测定酶活方法 五、筛选、分离及纯化; 六、研究近况及应用; 七、参考文献
目录: • 一、概况； • 二、特性； • 三、影响酶活因素； • 四、测定酶活方法； • 五、筛选、分离及纯化； • 六、研究近况及应用； • 七、参考文献
概况 ★ 、概念:纤维素酶(EC3.2.1.4)指降解纤维素生 成葡萄糖的一组酶的总称,组成很复杂。 92、历史:1906年首先在蜗牛的消化液中发现有 纤维素酶;1933年开始研究一种真菌的纤维素酶 系,从中分辨出两个组分;70年代以来,随着生 化技术的发展,推动了微生物纤维素商品酶的工 业生产
一、概况 • 1、概念：纤维素酶（EC3.2.1.4)指降解纤维素生 成葡萄糖的一组酶的总称，组成很复杂。 • 2、历史：1906年首先在蜗牛的消化液中发现有 纤维素酶；1933年开始研究一种真菌的纤维素酶 系，从中分辨出两个组分；70年代以来，随着生 化技术的发展，推动了微生物纤维素商品酶的工 业生产
3 种分类法 够分解天然纤维素的酶为C1; 能分解羧甲基纤维素等可溶性纤维 素的酶为C2; 能分解纤维二糖水解为葡萄糖的酶为葡萄 苷酶
• 3、分类: • 第一种分类法 能够分解天然纤维素的酶为C1; 能分解羧甲基纤维素等可溶性纤维 素的酶为C2; 能分解纤维二糖水解为葡萄糖的酶为葡萄 苷酶
(补充) 第二种分类法 由于纤维素酶的CBD序列较为保守,因此 科学家根据CBD的序列将纤维素酶分为5族
(补充) 第二种分类法: 由于纤维素酶的CBD序列较为保守,因此 科学家根据CBD的序列将纤维素酶分为5族
4、产生的菌株及分布 ①、产生的菌株:自然界中能产生纤维素酶的微 生物包括真菌、细菌、放线菌。特别是各种霉菌 ②分布:由于纤维素是植物体细胞壁的主要成 分,因此纤维素酶在自然界中分布极广,特别在 主壤中有大量分布
4、产生的菌株及分布： • ①、产生的菌株：自然界中能产生纤维素酶的微 生物包括真菌、细菌、放线菌。特别是各种霉菌。 • ②、分布：由于纤维素是植物体细胞壁的主要成 分，因此纤维素酶在自然界中分布极广，特别在 土壤中有大量分布
@:聪 与其他的酶一样,其特性也表现在三个方 ①、高效性 ②、特异性 ③、可调控性
二、特性 • 与其他的酶一样，其特性也表现在三个方 面： • ①、高效性 • ②、特异性 • ③、可调控性
影响酶活因素 p值:最适为4060 温度:最适为45-65°C 抑制剂:纤维二糖、葡萄糖、重金属离 子、去垢剂、染料。 清化剂:中性盐、镁离子、NaF等试剂 其他:由于天然纤维素的毛细结构,结晶性, 木质化程度会影响纤维素酶在纤维素分 子中的扩散,所以也是影响酶活因素
三、影响酶活因素： pH 值：最适为4.0-6.0 温 度：最适为45-65℃ 抑制剂：纤维二糖、葡萄糖、重金属离 子、去垢剂、染料。 活化剂：中性盐、镁离子、NaF等试剂。 其 他：由于天然纤维素的毛细结构，结晶性， 木质化程度会影响纤维素酶在纤维素分 子中的扩散，所以也是影响酶活因素
四、测定酶活方法: ①3,5二硝基水杨酸比色法 ②2、S0mogy法 ③、铜试剂硫代硫酸钠滴定法 下充:美国全国饲料协会(FNIA)介绍了以 下两种方法: ④、羟甲基纤维素酶酶活测定法 、滤纸纤维素酶活性分析法
四、测定酶活方法： ①、3，5-二硝基水杨酸比色法 ②、Somogyi法 ③、铜试剂-硫代硫酸钠滴定法 补充：美国全国饲料协会（FNIA）介绍了以 下两种方法： ④、羟甲基纤维素酶酶活测定法 ⑤、滤纸纤维素酶活性分析法
五、筛选、分离及纯化 ①筛选、分离原理与其他菌种相同 ②、纯化:交联葡聚糖凝胶过滤色法 琼脂糖凝胶过滤色谱 DEAE琼脂糖凝胶阴离子交换色谱
五、筛选、分离及纯化 ①、筛选、分离原理与其他菌种相同。 ②、纯化：交联葡聚糖凝胶过滤色法、 琼脂 糖凝胶过滤色谱、 DEAE琼脂糖凝胶阴离子交换色谱