根系活力的测定[TTC法] 制作人：刘新 单 位：生命科学学院 植物生理学教研室
根系活力的测定[TTC法] 制作人：刘新 单 位：生命科学学院 植物生理学教研室
一、实验目的 H2O 无机盐 合成氨基酸和植物激素 （ABA、CTK、GA等） 根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量 测定根系活力，为植物营养研究提供依据。 ◼ 理解植物根系活力的内涵 ◼ 掌握根系活力测定的原理与方法
一、实验目的 H2O 无机盐 合成氨基酸和植物激素 （ABA、CTK、GA等） 根的生长情况和活力水平直接影响地上部的生长和营养状况及产量 测定根系活力，为植物营养研究提供依据。 ◼ 理解植物根系活力的内涵 ◼ 掌握根系活力测定的原理与方法
二、实验原理 氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化电位为80mV的氧化还 原物质，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不 溶于水的三苯基甲腙（TTF）。 生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化
二、实验原理 氯化三苯基四氮唑（TTC）是标准氧化电位为80mV的氧化还 原物质，溶于水中成为无色溶液，但还原后即生成红色而不 溶于水的三苯基甲腙（TTF）。 生成的TTF比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化
TTC TTF 根系活力 脱氢酶 丙二酸 碘乙酸 琥珀酸 延胡索酸 苹果酸 促进 抑制 （无色，溶于水） （红色，不溶于水）
TTC TTF 根系活力 脱氢酶 丙二酸 碘乙酸 琥珀酸 延胡索酸 苹果酸 促进 抑制 （无色，溶于水） （红色，不溶于水）
三、实验材料 ◼ 水培或砂培小麦、玉米等植物根系
三、实验材料 ◼ 水培或砂培小麦、玉米等植物根系
四、实验步骤—制作TTC标准曲线 吸取0.25mL TTC 加入10mL容量瓶 Na2S2O4 加少许 Na2S2O4 乙酸乙酯 乙酸乙 酯定容 0.25mL 0.50mL 1.00mL 1.50mL 2.00mL TTC含量（μg） 25 50 100 150 200 乙酸乙酯作 参比，测定 485nm下光 密度值，绘 制标准曲线
四、实验步骤—制作TTC标准曲线 吸取0.25mL TTC 加入10mL容量瓶 Na2S2O4 加少许 Na2S2O4 乙酸乙酯 乙酸乙 酯定容 0.25mL 0.50mL 1.00mL 1.50mL 2.00mL TTC含量（μg） 25 50 100 150 200 乙酸乙酯作 参比，测定 485nm下光 密度值，绘 制标准曲线
四、实验步骤—测定根系活力 0.5g根尖样品 0.4％TTC和磷酸缓冲液的等量混合液10ml 根充分浸没于溶液中 37℃下暗保温1～3h 加入1mol/L硫酸2ml 取出根吸 干水分 与3～4ml乙酸乙酯和少量 石英砂在研钵内磨碎 红色提取液移入试管且 用乙酸乙酯定容到10ml 空白试验作参比测 485nm下吸光度 与此同时 做一空白 实验，先 加硫酸， 再加根样 品，其他 操作同上 查标准曲线，求 四氮唑还原量
四、实验步骤—测定根系活力 0.5g根尖样品 0.4％TTC和磷酸缓冲液的等量混合液10ml 根充分浸没于溶液中 37℃下暗保温1～3h 加入1mol/L硫酸2ml 取出根吸 干水分 与3～4ml乙酸乙酯和少量 石英砂在研钵内磨碎 红色提取液移入试管且 用乙酸乙酯定容到10ml 空白试验作参比测 485nm下吸光度 与此同时 做一空白 实验，先 加硫酸， 再加根样 品，其他 操作同上 查标准曲线，求 四氮唑还原量
五、实验结果 四氮唑还原强度 ＝ （mg/g(根鲜重)/h） 四氮唑还原量（mg） [根重（g）×时间(h)]
五、实验结果 四氮唑还原强度 ＝ （mg/g(根鲜重)/h） 四氮唑还原量（mg） [根重（g）×时间(h)]
六、思考题 ◼ 1.植物的根与地上部分有何关系? ◼ 2.反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、苹 果酸各起何作用？ ◼ 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？ 为什么？ ◼ 4.为什么要以杀死根系作为空白对照？
六、思考题 ◼ 1.植物的根与地上部分有何关系? ◼ 2.反应中加入硫酸、琥珀酸或延胡羧酸、苹 果酸各起何作用？ ◼ 3.测定根系活力时最好选择根的哪个部位？ 为什么？ ◼ 4.为什么要以杀死根系作为空白对照？