+动物细胞培养技术 (一)概念:是指从动物体内取出相关的组织,将他分散成单个细胞, 然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖培养获得目的细 胞或细胞产物的技术。 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第一代细胞与传代以 内的细胞称为原代细胞培养 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配置成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶 中继续培养,称为传代培养 二)原理 细胞分裂增殖
动物细胞培养技术 (一) 概念:是指从动物体内取出相关的组织,将他分散成单个细胞, 然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖培养获得目的细 胞或细胞产物的技术。 (二) 原理 细胞分裂增殖 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第一代细胞与传代以 内的细胞称为原代细胞培养 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配置成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶 中继续培养,称为传代培养
动物细胞特点 •进化度高 ·结构,形态,成分复杂 •细胞间连接形式多样 ·生长相对缓慢 ·功能全面
动物细胞特点 • 进化度高 • 结构,形态,成分复杂 • 细胞间连接形式多样 • 生长相对缓慢 • 功能全面
动物细胞生长特点 1细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 2.细胞的接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象 就称为细胞的接触抑制
动物细胞生长特点 1.细胞贴壁: 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁。 2.细胞的接触抑制 当贴壁细胞分裂生长到表面互相接触时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象 就称为细胞的接触抑制
(三)动物细胞培养过程 动物组织细胞间隙中含有 一定量的弹性纤维等蛋白 质 取动物器官 和组织 胰蛋白酶处理 单个细胞 幼龄动物 剪碎组织 的例线融的性惠月装置白期处清 计领成中个理L制文延后北看 胰蛋白酶处理 酸蛋白 单个细胞 原代细胞培养 细胞悬浮液 传代细胞培养
(三)动物细胞培养过程 动物组织细胞间隙中含有 一定量的弹性纤维等蛋白 质
归纳 取 动物胚胎或幼龄动物 的组织、器官 过程 胰蛋白酶 单个细胞 加入培养 液 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞 分裂,数量不断增加,最后形成一 个单层,此时,细胞间相互接触, 细胞分裂和增长停止。 细胞悬浮液 接触抑制 原代 贴满瓶壁的细胞 培养(分装前) 10代以内细胞生长保 持正常 1-10代细胞
细胞在贴壁生长过程中,随着细胞 分裂,数量不断增加,最后形成一 个单层,此时,细胞间相互接触, 细胞分裂和增长停止。 10代以内细胞生长保 持正常
遗传物质 原代细胞 未改变 胰蛋白酶 传代培养 细胞失去接触抑制,细 加 培养液 胞增殖缓慢,核型已经 发生变化 40一50代细胞(细胞株) 遗传物质 已 改变 无限传代(细胞系)
细胞失去接触抑制,细 胞增殖缓慢,核型已经 发生变化
有关概念 细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞后生长停滞,大部分细胞衰老死亡, 少数细胞存活到40-50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗 传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。 细胞株与细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞 的特点,失去接触抑制,容易传代培养
有关概念 细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞后生长停滞,大部分细胞衰老死亡, 少数细胞存活到40-50代,这种传代细胞为细胞株。 细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗 传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。 细胞株与细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞 的特点,失去接触抑制,容易传代培养
四,动物细胞培养的条件 1无菌,无毒的环境 添加一定量的抗生素,定期更换培养液 保证细胞的 顺利生长增 2.营养 殖 添加:糖(葡萄糖),氨基酸,促生长因子,无机盐,微量元素,动物血清等。 3.温度和PH 培养室中控制温度和PH,使之达到 36.5+-0.5C,7.27.4 4.气体环境: 培养箱中提供02和C02(95%空气和5%二氧化碳)
四,动物细胞培养的条件 1.无菌,无毒的环境 添加一定量的抗生素,定期更换培养液 2.营养 添加:糖(葡萄糖),氨基酸,促生长因子,无机盐,微量元素,动物血清等。 保证细胞的 顺利生长增 殖 3.温度和PH 培养室中控制温度和PH,使之达到 36.5+-0.5℃,7.2~7.4 4.气体环境: 培养箱中提供O2和CO2(95%空气和5%二氧化碳)