高脂血症对小鼠 睾丸超微结构的影响
高脂血症对小鼠 睾丸超微结构的影响
前言 随着环境及生活习惯的改变，男性不育症的发病率正逐 年上升，而且病因复杂。 ■迄今，60%~75%的患者原因不明
前 言 ◼ 随着环境及生活习惯的改变，男性不育症的发病率正逐 年上升，而且病因复杂。 ◼ 迄今，60%～75%的患者原因不明
高胆固醇血症会影响睾丸功能，睾丸内精子细胞数量减 少； 用高脂高胆固醇喂养的雄性小鼠，使雌性小鼠受孕的能 力下降，胚胎植入和生育率也有降低。 高脂血症很可能是男性不育症的病因之一
◼ 高胆固醇血症会影响睾丸功能，睾丸内精子细胞数量减 少； 高脂血症很可能是男性不育症的病因之一 。 ◼ 用高脂高胆固醇喂养的雄性小鼠，使雌性小鼠受孕的能 力下降，胚胎植入和生育率也有降低
目的 ■本实验通过高脂饲料喂养apol ipoprotein E (ApoE)基因敲除小鼠，观察其睾丸超微结构 的变化特点，为探讨高脂血症对男性生殖功能的 影响提供形态学依据
◼ 本实验通过高脂饲料喂养apolipoprotein E （Apo E） 基因敲除小鼠，观察其睾丸超微结构 的变化特点，为探讨高脂血症对男性生殖功能的 影响提供形态学依据。 目 的
材料与方法 1.动物分组（12只C57BL/6J雄性小鼠) 对照组：6只野生型小鼠 实验组：6只ApoE基因敲除小鼠
材料与方法 1.动物分组（12只C57BL/6J雄性小鼠 ） •对照组：6只野生型小鼠 •实验组：6只Apo E基因敲除小鼠
2.高脂血症模型的建立 •实验组小鼠喂饲高胆固醇饲料（胆固醇0.5%，猪油 10%,蛋黄粉10%，维持料59.5%，蔗糖20%)，共12 周； 对照组小鼠喂饲普通饲料，喂养12周
2.高脂血症模型的建立 •实验组小鼠喂饲高胆固醇饲料(胆固醇0.5%，猪油 10%，蛋黄粉10%，维持料59.5%，蔗糖20%)，共12 周； •对照组小鼠喂饲普通饲料，喂养12周
3.透射电镜标本制备 饲养12周后，将小鼠腹腔打开，取出睾丸组 织，用双面刀片把样品切割成1mm3小块，置于4℃ 的2.5%戊二醛溶液中固定过夜，常规冲洗后以1%锇 酸后固定。在冲洗后用50%、70%、 90%和100%乙醇 依次脱水，环氧树脂包埋，超薄切片，最后用醋酸 铀及柠檬酸铅双重染色，在日产JEM-1230型透射电 镜下，观察小鼠睾丸组织的超微结构变化特点，并 摄片
3.透射电镜标本制备 饲养12周后，将小鼠腹腔打开，取出睾丸组 织，用双面刀片把样品切割成1mm3小块，置于4℃ 的2.5%戊二醛溶液中固定过夜，常规冲洗后以l%锇 酸后固定。在冲洗后用50%、70%、90%和100%乙醇 依次脱水，环氧树脂包埋，超薄切片，最后用醋酸 铀及柠檬酸铅双重染色，在日产JEM-1230型透射电 镜下，观察小鼠睾丸组织的超微结构变化特点，并 摄片
结果 1.血脂： 与正常组比较，高脂血症组血脂明显升高。 表157BL/6J小鼠血清中胆固醇和低密度脂蛋白浓度（X士s,mmo1/L) 组别 CHO LDD-C 对照组 2.39±0.15 0.54±0.03 实验组 34.86±1.30* 12.28±3.59* 与正常组比较：*p<0.05
1.血脂： 与正常组比较，高脂血症组血脂明显升高。 结 果 组 别 CHO LDD-C 对照组 实验组 2.39±0.15 34.86±1.30* 0.54±0.03 12.28±3.59* 表1 57BL/6J小鼠血清中胆固醇和低密度脂蛋白浓度 (±s, mmol/L) 与正常组比较：*p＜0.05
2.电镜：实验组小鼠睾丸内生精细胞、支持细胞、睾丸间质 细胞、内皮细胞等超微结构呈现一系列病理变化。 2.1生精细胞 图1对照组生精细胞核（★）、线粒体 图2实验组生精细胞线粒体空泡变性 (△)及粗面内质网（↑)结构正常 (△)、粗面内质网轻度扩张（↑）及 ×15000 异常结构（▲）×15000
2.1生精细胞 图1 对照组生精细胞核（★）、线粒体 （△）及粗面内质网（↑）结构正常 ×15 000 图2 实验组生精细胞线粒体空泡变性 （△）、粗面内质网轻度扩张（↑）及 异常结构（▲）×15 000 ★ △ △ ▲ 2.电镜：实验组小鼠睾丸内生精细胞、支持细胞、睾丸间质 细胞、内皮细胞等超微结构呈现一系列病理变化
2.2支持细胞 图3对照组支持细胞核（★）、线粒 图4实验组支持细胞核（★）、线粒体空 体（△)及粗面内质网（↑)结构正 泡变性（△）、粗面内质网扩张（↑)、 常×15000 核膜外侧致密沉淀物（▲）及大空泡（☆） X15000
2.2支持细胞 图3 对照组支持细胞核（★）、线粒 体（△）及粗面内质网（↑）结构正 常 ×15 000 图4 实验组支持细胞核（★）、线粒体空 泡变性（△）、粗面内质网扩张（↑）、 核膜外侧致密沉淀物（▲）及大空泡（☆） ×15 000 ★ ★ △ △ ☆ ▲