吸烟对胎鼠神经发育的影响 设计性、开放性实验
吸烟对胎鼠神经发育的影响 -----------设计性、开放性实验
实验动物 ■SD大鼠 ■共15只 ■12只雌鼠 3只雄鼠
实验动物 ◼ SD大鼠 ◼ 共15只 ◼ 12只雌鼠 3只雄鼠
实验器材 ·自制烟熏箱 55cm×40cm×40cm ·自制烟灰缸 ·红三环香烟共五条 ·手套四副 ·打火机若干 ■饲料、垫料等饲养用具
实验器材 ◼ 自制烟熏箱 55cm×40cm×40cm ◼ 自制烟灰缸 ◼ 红三环香烟共五条 ◼ 手套四副 ◼ 打火机若干 ◼ 饲料、垫料等饲养用具
第一阶段:熏烟 实验组 对照组 6只雌鼠 6只雌鼠 每天两次,每次10支 不处理 以3+3+4方式熏 共10天
第一阶段:熏烟 实验组 对照组 6只雌鼠 每天两次,每次10支 以3+3+4方式熏 共10天 6只雌鼠 不处理
第二阶段:合笼 合笼:实验组雌鼠2只+雄鼠1只放于同一笼 共三笼共三天晚上 对照组同上 注:白天须将雌雄鼠分开
第二阶段:合笼 合笼:实验组雌鼠2只+雄鼠1只放于同一笼 共三笼 共三天晚上 对照组同上 注:白天须将雌雄鼠分开
检查精子 分别于第二天清晨检查阴道栓和阴道涂片 ★阴道栓在托盘里找,为半透明黄白色胶体 ★阴道涂片:在低倍镜下可见满视野的线状 精子,高倍镜下可见精子头部有钩 (但理论上,只要见到一个精子可认为怀孕) 注:熏烟可能对大鼠受孕率有影响 怀孕之后的雌鼠与未怀孕的须分开养
检查精子 分别于第二天清晨检查阴道栓和阴道涂片 ★阴道栓在托盘里找,为半透明黄白色胶体 ★阴道涂片:在低倍镜下可见满视野的线状 精子,高倍镜下可见精子头部有钩 (但理论上,只要见到一个精子可认为怀孕) 注:熏烟可能对大鼠受孕率有影响 怀孕之后的雌鼠与未怀孕的须分开养
第三阶段:剖腹产并取材 ·于雌鼠怀孕的第21天早上剖腹产 ■每只约怀有8-12只子鼠 ■取出子鼠后,放入甲醛固定
第三阶段:剖腹产并取材 ◼ 于雌鼠怀孕的第21天早上剖腹产 ◼ 每只约怀有8-12只子鼠 ◼ 取出子鼠后,放入甲醛固定
待母鼠全部剖腹完,取子鼠脑组织,编号并 固定 择日包埋、切片 http://go.to/funpie
待母鼠全部剖腹完,取子鼠脑组织,编号并 固定 择日包埋、切片
注意事项 ●要将剖腹产日期计算准确, 否则其他雌鼠 会将顺产出生的子鼠吃掉 ●检查雌鼠怀孕可以每3天称其体重 ●子鼠可以称其体重,辨其性别
注意事项 ●要将剖腹产日期计算准确,否则其他雌鼠 会将顺产出生的子鼠吃掉 ●检查雌鼠怀孕可以每3天称其体重 ●子鼠可以称其体重,辨其性别