血液生物学 血液是由血浆、血细胞组成的红色液体，流动于血管，循环于全身， 直接或间接与机体所有组织发生联系。机体的很多疾病都可以引起血液成 分的变化，血液中各成分质量和数量的改变，均可由血液检验反映出来。 如细菌或病毒感染、各种贫血等。所以，血液检查不仅帮助诊断各种血液 病，对其他系统的疾病诊断都有帮助。同时血液检验对疾病治疗、预防和 预后观察也有重要意义。 林
血液生物学 血液是由血浆、血细胞组成的红色液体，流动于血管，循环于全身， 直接或间接与机体所有组织发生联系。机体的很多疾病都可以引起血液成 分的变化，血液中各成分质量和数量的改变，均可由血液检验反映出来。 如细菌或病毒感染、各种贫血等。所以，血液检查不仅帮助诊断各种血液 病，对其他系统的疾病诊断都有帮助。同时血液检验对疾病治疗、预防和 预后观察也有重要意义
多能（向）造血干细胞 髓系千细胞 淋巴系干细胞 红系相细胞 粒·单系相细胞 甘核系粗镯胞 精酸粒系祖细图 T-淋但系祖镯胞 B-淋巴系祖细酸 原菜细胞 原巨核细胞 原粒镯胞 原粒细胞 原红铜形 原单细胞 版淋巴细测 早幼粒细胞 早幼红钢测 晴酸性 嗜碱性 幼甘核细胸 早幼粒细胸 :早幼粒细胞 幼单核细 中幼虹细胞 中性中幼 较细的 幼浆棚测 颜良型 晴酸性 晴碱性 巨枝翔船 中幼和细胞 中幼粒拥据 幼淋巴绸邂 晚幼虹细胞 中性晚幼 粒铜胞 维核细胞 树织红铜胞 嗜酸性 晴碱性 中性杆状 晚幼杖绸胞 骨髓 核粒细胞 晚动良细胞 产血小板型 外周血 巨核胞 晴酸性 嗜碱性 淋巴细胞 聚拥胞 树织红觸胞 中性杆状 杆状核貌细游 杆状核粒细胞 核权细胞 骨葡 外周血 嗜酸性 晴碱性 红领胞 中性分引 细图 杆软核段细胞 「杆状核粒细胞 淋巴细胞 转粒網爬 慢核型 巨核铜测 嗜酸性 晴碱性 淋巴细胞 分叶核款细胞 分叶枝粒细图 血小板 骨杨血细腿分化，发育.成熟演变规律示危图
第一节血涂片制作 一、目的和要求 熟练掌握血涂片制作和染色方法(Wrgt染色和煌焦油蓝染色)。 二、内容 (一)原理 l.Wright氏染色的原理 Wright's染料是由美兰和伊红的化合物溶于甲醇而制成，伊红是带负电 荷的酸性染料，美兰是带正电荷的硷性染料，两种染料结合在一起溶解在 甲醇中后，美兰和伊红又重新分离开来，成为带负电荷的伊红离子与带正 电荷的美兰离子，以使带不同电荷的蛋白质加以吸附。血细胞内含有不同 等电点的蛋白质，在相同的酸度下带有不同的电荷，因而能选择性的吸附 相应的染料而受染。Wrgt's染料对氢离子浓度极为敏感，因此用缓冲液稀 释染液，可使染色作用稳定，便于识别和比较细胞的变化
第一节 血涂片制作 一、目的和要求 熟练掌握血涂片制作和染色方法（Wright染色和煌焦油蓝染色）。 二、内容 （一）原理 1．Wright氏染色的原理 Wright’s染料是由美兰和伊红的化合物溶于甲醇而制成，伊红是带负电 荷的酸性染料，美兰是带正电荷的硷性染料，两种染料结合在一起溶解在 甲醇中后，美兰和伊红又重新分离开来，成为带负电荷的伊红离子与带正 电荷的美兰离子，以使带不同电荷的蛋白质加以吸附。血细胞内含有不同 等电点的蛋白质，在相同的酸度下带有不同的电荷，因而能选择性的吸附 相应的染料而受染。Wright’s染料对氢离子浓度极为敏感，因此用缓冲液稀 释染液，可使染色作用稳定，便于识别和比较细胞的变化
染色液在PH6.4或PH6.98的溶液中进行，有的蛋白质吸附酸性染料 伊红，被染成红色，这种物质叫嗜酸性物质（如嗜酸性粒细胞的颗粒）， 有的物质吸附性染料美兰，被染成兰色，称为嗜硷性物质，如胞核、嗜硷 性粒细胞颗粒。有的蛋白质在PH6.4时恰为等电点，既吸附酸性染料，又 吸附硷性染料，称为嗜中性物质。 2:煌焦油蓝染色的原理 煌焦油蓝为碱性染料，胞质内核糖体能与碱性染料中有染色作用的阳 离子结合，故煌焦油蓝能将其显色。 (二)材料 1.甲醛、乙醇、二甲苯、石蜡、HO2、Wright's染料、煌焦油蓝染料、 中性树胶等。 2载玻片、盖玻片、染色架等。 +
染色液在PH 6.4或PH 6.98的溶液中进行，有的蛋白质吸附酸性染料 伊红，被染成红色，这种物质叫嗜酸性物质（如嗜酸性粒细胞的颗粒）， 有的物质吸附性染料美兰，被染成兰色，称为嗜硷性物质，如胞核、嗜硷 性粒细胞颗粒。有的蛋白质在PH6.4时恰为等电点，既吸附酸性染料，又 吸附硷性染料，称为嗜中性物质。 2. 煌焦油蓝染色的原理 煌焦油蓝为碱性染料，胞质内核糖体能与碱性染料中有染色作用的阳 离子结合，故煌焦油蓝能将其显色。 （二）材料 1．甲醛、乙醇、二甲苯、石蜡、H2O2、Wright’s染料、煌焦油蓝染料、 中性树胶等。 2．载玻片、盖玻片、染色架等
(三)操作步骤 1.Wright氏染色方法 (1)清洗：将载玻片放入清洁液浸泡→流水冲洗→95%乙醇浸泡→拭 净待用。 (2)取血：用75%乙醇消毒耳垂或手尖皮肤，刺破，取血，置于载玻 片一端。 (3)涂片：取边缘平整载玻片一张，使其一边与载有血滴的载玻片呈 35~45°角相交于血滴，血滴沿载玻片的边缘展开，将斜置的载玻片向前推 动，血滴即在载玻片上被铺成血膜。 (4)晾干：血涂片或骨髓涂片必须完全干燥后，才能染色，染色前先 在涂片上用特种铅笔：画出染色区域，然后滴加染液，使染液完全淹没在 画定的区域内
（三）操作步骤 1．Wright氏染色方法 （1）清洗：将载玻片放入清洁液浸泡→流水冲洗→95％乙醇浸泡→拭 净待用。 （2）取血：用75%乙醇消毒耳垂或手尖皮肤，刺破，取血，置于载玻 片一端。 （3）涂片：取边缘平整载玻片一张，使其一边与载有血滴的载玻片呈 35~45o角相交于血滴，血滴沿载玻片的边缘展开，将斜置的载玻片向前推 动，血滴即在载玻片上被铺成血膜。 （4）晾干：血涂片或骨髓涂片必须完全干燥后，才能染色，染色前先 在涂片上用特种铅笔：画出染色区域，然后滴加染液，使染液完全淹没在 画定的区域内
(5)染色：滴加Wright's染料静止1~2分钟后（此步主要起固定作用）， 加等量的双蒸水或磷酸盐缓冲液于染液中，染色5~10分钟。染液上若出现 金属薄膜，这说明染料有效。染色时间视染料的成熟程度及室温条件而定 。染色时不要摇动，否则易于产生沉淀。 (6)冲洗：用滴管吸蒸馏水洗去染液，或用普通水洗，便可观察。 (7)封片：晾干后树胶封片。 骨髓涂片方法与血涂片相同，直接取骨采取骨髓，因骨髓较浓，故需 根据浓度大小，加入血清稀释5~19倍，充分摇匀后方能涂片，如抽取的人 骨髓一般不需要稀释
（5）染色：滴加Wright’ s染料静止1~2分钟后（此步主要起固定作用）， 加等量的双蒸水或磷酸盐缓冲液于染液中，染色5~10分钟。染液上若出现 金属薄膜，这说明染料有效。染色时间视染料的成熟程度及室温条件而定 。染色时不要摇动，否则易于产生沉淀。 （6）冲洗：用滴管吸蒸馏水洗去染液，或用普通水洗，便可观察。 （7）封片：晾干后树胶封片。 骨髓涂片方法与血涂片相同，直接取骨采取骨髓，因骨髓较浓，故需 根据浓度大小，加入血清稀释5~19倍，充分摇匀后方能涂片，如抽取的人 骨髓一般不需要稀释
2.煌焦油蓝染色方法 (1)在洁净载玻片上加1%煌焦油兰酒精液一滴；待干。 1%煌焦油兰染液配制：煌焦油兰1克 95%酒精100m1 (2)取新鲜血液一滴，滴于载玻片的染液上，用一小玻捧横置于载玻片 上轻轻搅拌，然后将载玻片移入培养皿内，玻璃器皿底部置湿纱布一块， 载玻片置于湿布上，保持湿度使载玻片上血液不致干涸，染色5~10分钟或 更长。 钟
2．煌焦油蓝染色方法 （1）在洁净载玻片上加1％煌焦油兰酒精液一滴；待干。 1％煌焦油兰染液配制：煌焦油兰 1克 95％酒精 100m1 （2）取新鲜血液一滴，滴于载玻片的染液上，用一小玻捧横置于载玻片 上轻轻搅拌，然后将载玻片移入培养皿内，玻璃器皿底部置湿纱布一块， 载玻片置于湿布上，保持湿度使载玻片上血液不致干涸，染色5~10分钟或 更长
(3)取出载玻片，常规涂片方法，推成薄而均匀的血膜片。自然干燥。 (4)用特种铅笔划定染色区，然后按照Wright氏方法染色。 (5)干燥后，树胶封片。 (6)如需作网织红细胞计数则不封片。以便用油镜检查，计数方法一般 是计算1000个红细胞的百分率。 (7)染色结果：网织红细胞胞质内可见兰色网状或线状物，此即为核糖 体。 三、作业 制作一张血涂片，并进行Wright's染色。 四、思考题 简述Wright氏染色的原理和方法
（3）取出载玻片，常规涂片方法，推成薄而均匀的血膜片。自然干燥。 （4）用特种铅笔划定染色区，然后按照Wright氏方法染色。 （5）干燥后，树胶封片。 （6）如需作网织红细胞计数则不封片。以便用油镜检查，计数方法一般 是计算1000个红细胞的百分率。 （7）染色结果：网织红细胞胞质内可见兰色网状或线状物，此即为核糖 体。 三、作业 制作一张血涂片，并进行Wright’s染色。 四、思考题 简述Wright氏染色的原理和方法
第二节血涂片观察和计数 一、目的和要求 1.掌握显微镜油镜的操作程序。 2.掌握各种血细胞的镜下形态特征和计数方法。 二、内容 (一)油镜使用方法先在低倍镜下找到白细胞最多的部位，在该部 位加一滴香柏油，将油镜头接触油滴，再用细调节调至清楚为止， 即可观察。使用完毕，用二甲苯清洗油镜头和血片
第二节 血涂片观察和计数 一、目的和要求 1．掌握显微镜油镜的操作程序。 2．掌握各种血细胞的镜下形态特征和计数方法。 二、内容 （一）油镜使用方法先在低倍镜下找到白细胞最多的部位，在该部 位加一滴香柏油，将油镜头接触油滴，再用细调节调至清楚为止， 即可观察。使用完毕，用二甲苯清洗油镜头和血片
(二)观察血液有形成分 1.红细胞 红细胞为圆形无核的桔红色细胞，数目最多，细胞中央着色浅，周缘着 色较深。有时可见几个红细胞连在一起，似串钱状。 2.中性粒细胞 白细胞中数目最多的细胞，易于找到。体积较红细胞大，呈圆形。细胞 质内有分布均匀的细小的染成浅红色或浅紫色颗粒。细胞核呈杆状或分叶状 ，分叶核之间有染色质丝相连，分2~5叶不等，细胞核着色较深，染色质呈 团块状。 3.嗜酸性粒细胞 数目较少，胞体较中性粒细胞稍大，呈圆形。细胞质中充满粗大而均匀 的染成亮红色的嗜酸性颗粒，细胞核多为2叶，染色质较致密
（二）观察血液有形成分 1．红细胞 红细胞为圆形无核的桔红色细胞，数目最多，细胞中央着色浅，周缘着 色较深。有时可见几个红细胞连在一起，似串钱状。 2．中性粒细胞 白细胞中数目最多的细胞，易于找到。体积较红细胞大，呈圆形。细胞 质内有分布均匀的细小的染成浅红色或浅紫色颗粒。细胞核呈杆状或分叶状 ，分叶核之间有染色质丝相连，分2~5叶不等，细胞核着色较深，染色质呈 团块状。 3．嗜酸性粒细胞 数目较少，胞体较中性粒细胞稍大，呈圆形。细胞质中充满粗大而均匀 的染成亮红色的嗜酸性颗粒，细胞核多为2叶，染色质较致密
