先天性巨结肠 (Congenital megacolon) 重庆医科大学儿科学院外科教研室 李晓庆 主要参考教材:佘亚雄主编小儿外科学(第四版)人民卫生出版社 王果主编小儿肛肠外科学中原农民出版社
先天性巨结肠 (Congenital megacolon) 重庆医科大学儿科学院外科教研室 李晓庆 主要参考教材：佘亚雄主编小儿外科学（第四版）人民卫生出版社 王果主编 小儿肛肠外科学 中原农民出版社
骨髓间充质干细胞移 植治疗实验性巨结肠的 实验研究
骨髓间充质干细胞移 植治疗实验性巨结肠的 实验研究
技术路线 01%苯扎氯铵处理结肠40分钟 MSCs分离、扩增培养 实验性巨结肠动物 MSCs体外向神经 模型的建立和鉴定 细胞诱导分化 实验组 对照组 大体观察:钡灌肠:组织学检查:免疫组化检查结肠循环 大鼠排便、观察结肠观察处理段检查N和 水浴药理学 腹胀、处狭窄与扩结肠肌间神 nestin的表达检测平滑肌 理段及近张的情况经节细胞的情况 的收缩变化 端结肠的 情况 变化
技术路线 0.1%苯扎氯铵处理结肠40分钟 MSCs分离、扩增培养 实验性巨结肠动物 模型的建立和鉴定 MSCs体外向神经 细胞诱导分化 实验组 对照组 大体观察： 大鼠排便、 腹胀、处 理段及近 端结肠的 变化 钡灌肠： 观察结肠 狭窄与扩 张的情况 组织学检查： 观察处理段 结肠肌间神 经节细胞的 情况 免疫组化检查： 检查NF和 nestin的表达 情况 结肠循环 水浴药理学： 检测平滑肌 的收缩变化
实验方法 成年 Sprague dawley大鼠90只,89周龄 分组:随机分为2组。 实验组(BAC组,n=45),0.1%苯扎氯铵(BAC)处 理结肠40分钟; 对照组(NS组,n=45),生理盐水处理结肠40分钟
成年Sprague Dawley 大鼠90只，8-9周龄。 分组：随机分为2组。 实验组（BAC组，n=45），0.1%苯扎氯铵（ BAC）处 理结肠40分钟； 对照组（NS组，n=45），生理盐水处理结肠40分钟。 实验方法
观察指标 分别于术后1、2、3、4、8周进行观察: 1.大体观察:大鼠排便、腹胀、处理段及近端结肠的变化 2.X线片:观察结肠狭窄与扩张情况; 3.组织学检查(、 Nissle染色):观察处理段结肠肌间神经节 细胞 4.免疫组织化学:检测处理段结肠神经丝蛋白(N)、巢蛋白 ( nestin)的表达 5.结肠测压:检测处理段结肠反射性收缩情况; 6.结肠循环水浴药理学:检测平滑肌的收缩变化
观 察 指 标 分别于术后1、2、3、4、8周进行观察： 1.大体观察：大鼠排便、腹胀、处理段及近端结肠的变化 ； 2.X线片: 观察结肠狭窄与扩张情况； 3.组织学检查(HE、Nissle染色)：观察处理段结肠肌间神经节 细胞； 4.免疫组织化学：检测处理段结肠神经丝蛋白（NF）、巢蛋白 （nestin)的表达； 5.结肠测压：检测处理段结肠反射性收缩情况； 6.结肠循环水浴药理学：检测平滑肌的收缩变化；
结果 天鼠实验性巨结肠动物模型建立 Establisment of aganglionosis model in rat
结 果 大鼠实验性巨结肠动物模型建立 Establisment of aganglionosis model in rat
1大体观察 正常大鼠远端结肠(左)生理盐水对照组远端结肠(中),实验组狭窄段结肠(右) Distal colon in normal rat(left), distal colon in control group( middle), distal colon in treatment group(right)
正常大鼠远端结肠(左),生理盐水对照组远端结肠(中)，实验组狭窄段结肠（右） Distal colon in normal rat(left), distal colon in control group(middle) , distal colon in treatment group(right) 1.大体观察
2钡灌肠X线检查 正常大鼠(左)、生理盐水对照组大鼠(中)、实验组结肠狭窄段(右) Barium enema showed no narrow segment in normal group (left)or in control group(middle)and the narrow segment in treatment group (right)
2.钡灌肠X线检查 正常大鼠（左）、生理盐水对照组大鼠（中）、实验组结肠狭窄段(右) Barium enema showed no narrow segment in normal group (left) or in control group (middle) and the narrow segment in treatment group (right)
3组织学检查 结肠神经节细胞正常对照组(4w)H×200结肠神经节细胞消失实验组(4w)HE×100 Normal ganglion cells of rat colon Disappearance of the ganglion cells of rat colon in control group(4w) HEX200 in treatment group(4w) HEX 100
3.组织学检查 结肠神经节细胞正常,对照组(4w) HE×200 Normal ganglion cells of rat colon in control group(4w) HE×200 结肠神经节细胞消失,实验组(4w)HE×100 Disappearance of the ganglion cells of rat colon in treatment group(4w) HE×100
结肠神经节细胞正常对照组(4w 结肠神经节细胞完全消失实验组(4w) Normal ganglion cells of rat colon Disappearance of all of the ganglion cells in control group(4w) Nissle x 100 of rat colon in treatment group(4w) Nissle×100
结肠神经节细胞正常,对照组(4w) Normal ganglion cells of rat colon in control group(4w) Nissle×100 结肠神经节细胞完全消失,实验组(4w) Disappearance of all of the ganglion cells of rat colon in treatment group(4w) Nissle×100