实验3植物组织水势测定 (小液流法) 温银元
【原理】 当植物组织和外界蔗糖溶液接触时,若组织水势小于外液 渗透势,水分进入植物组织,外液浓度增高;相反,组织水分 进入外液,使外液浓度降低;若二者水势相等,组织不吸水也 不失水,外液浓度不变。溶液浓度不同,比重不同。取浸过组 织的蔗糖溶液一小滴(为便于观察加入少许甲烯蓝),放入未浸 植物组织的原浓度溶液中,观察有色溶液的浮沉:液滴上浮, 表示浸过样品后溶液浓度变小;液滴下沉,表示溶液浓度变大; 若液滴不动,表示浓度未变,该溶液水势即等于植物组织水势。 实际测定时,常常不易找到有色液滴不动的溶液,而是取接近 植物组织水势的相邻两种溶液浓度的平均值
【仪器设备】 1.水势测定取样箱(大小根据需要确定,其中放湿润滤纸, 保持高相对湿度); 2.小试管(12×100mm)3648个,洗净烘千; 3.大试管:15×150mm,18~24个,洗净烘千; 4.毛细移液管:36~48个,洗净烘千; 5.剪刀、刀片、打孔器、1个镊子各1把 6.千净硬纸片:20×20cm,2张; 7.试管架:2个。 【试剂】 1.1mol/L蔗糖溶液;2.0.1%中性红。 【材料】 马铃薯块茎
【方法步骤】 1.取5~6个千净的小试管和相同数量的大试管(15×150mm)」 贴不同水势(或浓度)标签。向大试管中加入1mole蔗糖溶 液分别为1、2、3、4、5、6ml,依次再加入蒸馏水为9、 8、7、6、5、4ml使各试管总体积为10mL,摇匀,即为 不同浓度0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mol/L蔗糖溶液。 2.剪取欲测叶片,用刀片切成0.5×0.5cm2小片,混匀,分别 装入小试管底部,每瓶装8片左右。向各小试管分别加入 不同水势蔗糖溶液4~5滴,摇匀,放一小滴中性红溶液, 加盖保持20~30min。 3.用千净的毛细移液管,吸挤小试管底部蓝色溶液,使其充 分混合均匀,并吸取1~2滴,小心地插入装着相对应同浓 度蔗糖溶液大试管中部,轻轻地挤出一小滴红色溶液,慢 慢转动毛细管头部,抽出毛细移液管,观察红色液滴流动 方向
【实验结果】 红色溶液不动的试管或蓝色液滴上浮、下沉的两个相邻试 管蔗糖浓度的平均值,即为等势点。 按下式计算植物组织水势: 平w=-iRTC 平w:由蔗糖溶液换算为植物组织水势,单位为MPa C:溶液的质量摩尔浓度(mol·kg1); R:气体常数,0.008314MPa·L·mo1·K1; T:绝对温度K,即273+t(t为当时温度); i:解离常数(蔗糖=1) 【注意事项】 1.小液流法中用的毛细移液管尖端需弯成直角,以保证从滴管 出来的液滴不受向下力的影响。 2.毛细管移液管延试管壁慢慢抽出,以防溶液振动,影响蓝色 液滴的运动