第十七章补体参与的反应及补体测定 Chapter 17 Complement Mediated Reactions and Assays of Complement 第一部分教学内容和要求 一、目的要求 ·掌握：免疫溶血试验及CH50测定的原理及意义：熟悉：补体参与的反应试验类型、 补体依赖的细胞毒试验的原理、旁路途径溶血活性测定：了解：补体结合试验和免疫粘附试 验的原理、C4和B因子活性测定的原理。 二、教学内容 1。补体参与的反应：免疫溶血试验，补体结合试验，补体依赖的细胞毒试验，免疫粘 附试验。 2。补体的测定：补体活性的测定，补体含量的测定，补体测定的临床意义。 第二部分测试题 一、选择题 (一)单项选择题(A型题) 1.溶血素效价滴定判定的温度和时间 A.37℃、30min B.4℃、30min C.37℃、15min D.40℃、30min E.56℃、 30min 2.在补体连锁反应中最终形成的攻膜复合体是 A.C5b6789 B.C4b2a3b C.C4b2b D.C3bBb E.C3b4b 3.下列哪项试验没有补体参加 A.CHo试验 B.CDC试验 C.溶血空斑试验 D.ADCC试验 E.Raji 细胞试验 4.补体结合试验中所用补体是哪种动物血清 A.马血清 B.绵羊新鲜血清 C.豚鼠新鲜血清 D.大白鼠新鲜血清 E.山羊新鲜血清 5.下列哪项试验不能用于补体缺陷的过筛诊断 A.CDC试验 B.CHso试验 C.血清C3含量测定 D.血清C1含量测定 E.C4溶血活性试验
第十七章 补体参与的反应及补体测定 Chapter 17 Complement Mediated Reactions and Assays of Complement 第一部分 教学内容和要求 一、目的要求 ·掌握：免疫溶血试验及 CH50 测定的原理及意义；熟悉：补体参与的反应试验类型、 补体依赖的细胞毒试验的原理、旁路途径溶血活性测定；了解：补体结合试验和免疫粘附试 验的原理、C4 和 B 因子活性测定的原理。 二、教学内容 1。补体参与的反应：免疫溶血试验，补体结合试验，补体依赖的细胞毒试验，免疫粘 附试验。 2。补体的测定：补体活性的测定，补体含量的测定，补体测定的临床意义。 第二部分 测试题 一、选择题 （一） 单项选择题（A 型题） 1．溶血素效价滴定判定的温度和时间 A．37℃、30min B．4℃、30min C．37℃、15min D．40℃、30min E．56℃、 30min 2.在补体连锁反应中最终形成的攻膜复合体是 A．C5b6789 B.C4b2a3b C．C4b2b D．C3bBb E．C3b4b 3.下列哪项试验没有补体参加 A. CH50 试验 B. CDC 试验 C.溶血空斑试验 D. ADCC 试验 E.Raji 细胞试验 4.补体结合试验中所用补体是哪种动物血清 A．马血清 B．绵羊新鲜血清 C．豚鼠新鲜血清 D．大白鼠新鲜血清 E．山羊新鲜血清 5.下列哪项试验不能用于补体缺陷的过筛诊断 A.CDC 试验 B．CH50 试验 C．血清 C3 含量测定 D.血清 C1 含量测定 E.C4 溶血活性试验
6.B因子溶血活性测定中，在缓冲液中加入EGTA是为了螯合反应体系中的 A.Mg离子 B.Ca离子 C.Zn"离子 D.Fe离子 E.p“离子 7.在单个补体成分溶血活性测定中，用氨水处理是为了去除哪个补体成分 A.CI B.C2 C.C4 D.C5 E.C3 8.检测免疫小鼠脾细胞分泌到细胞外的抗SRBC抗体的试验是 A.CHso试验 B.CFT C.APHo测定 D.B因子活性测定 E.溶血空 斑试验 9.利用溶血反应作为指示系统，判断抗原抗体是否相对应的试验是 A.CHso试验 B.CFT C.APHn测定 D.B因子活性测定 E.抗补体 试验 10.补体经典途径的最重要的激活物是 A.特异性抗原 B.特异性抗体 C.抗原抗体复合物 D.细菌脂多糖 E. 酵母多糖 (二)多项选择题(X型题) 1.补体参与的反应试验包括 A.免疫溶血试验 B.补体结合试验 C.补体依赖的细胞毒试验 D.免疫 黏附试验 E.白细胞趋化试验 2.补体含量的检测方法有 A.单向免疫扩散法 B.火箭免疫电泳 C.免疫比浊法 D.酶联免疫吸附试验 E.放射免疫分析法 3.检测补体经典激活途径常用的指标有 A.CHs。试验 B.C4活性测定 C.APH5o测定 D.B因子活性测定 E.溶血空斑试验 4.检测补体旁路激活途径常用的指标有 A.CHso试验 B.CFT C.APHn测定 D.B因子活性测定 E.溶血空斑 试验 5.通过补体受体进行的试验有
6.B 因子溶血活性测定中,在缓冲液中加入 EGTA 是为了螯合反应体系中的 A.Mg2+离子 B.Ca2+离子 C.Zn2+离子 D.Fe3+离子 E. P3+离子 7.在单个补体成分溶血活性测定中,用氨水处理是为了去除哪个补体成分 A.C1 B.C2 C.C4 D.C5 E.C3 8.检测免疫小鼠脾细胞分泌到细胞外的抗 SRBC 抗体的试验是 A.CH50 试验 B.CFT C.APH50 测定 D.B 因子活性测定 E.溶血空 斑试验 9.利用溶血反应作为指示系统,判断抗原抗体是否相对应的试验是 A.CH50 试验 B.CFT C.APH50 测定 D.B 因子活性测定 E.抗补体 试验 10.补体经典途径的最重要的激活物是 A.特异性抗原 B.特异性抗体 C.抗原抗体复合物 D.细菌脂多糖 E. 酵母多糖 （二）多项选择题（X 型题） 1.补体参与的反应试验包括 A.免疫溶血试验 B.补体结合试验 C.补体依赖的细胞毒试验 D.免疫 黏附试验 E.白细胞趋化试验 2．补体含量的检测方法有 A．单向免疫扩散法 B．火箭免疫电泳 C．免疫比浊法 D．酶联免疫吸附试验 E．放射免疫分析法 3.检测补体经典激活途径常用的指标有 A.CH50 试验 B.C4 活性测定 C.APH50 测定 D.B 因子活性测定 E.溶血空斑试验 4.检测补体旁路激活途径常用的指标有 A.CH50 试验 B.CFT C.APH50 测定 D.B 因子活性测定 E.溶血空斑 试验 5.通过补体受体进行的试验有
A.免疫黏附试验 B.CHo试验 C.ADCC效应 D.凝集试验 E.Raji细胞 试验 6.下列那些试验和补体系统无关 A.免疫黏附试验 B.CH5o试验 C.ADCC效应 D.凝集试验 E.CDC 试验 7.参与免疫溶血试验的成分有 A.溶血素 B.绵羊红细胞 C.补体 D.人红细胞 E.抗人红细 胞抗体 二、填空题 1.补体参与的反应试验类型包括 和 2.参与补体结合试验的试剂可分为 和 两个系统。 3.Ⅲ型变态反应疾病患者的血清中补体水平 4.补体的最佳保存温度是 5.补体结合试验中有 和 三个系统参与反应。 三、名词解释 1.免疫溶血试验(immunohemolysis test) 2.补体结合试验(complement fixation test,CFT) 3.血清总补体溶血活性测定(complement hemolysis50%assay,.CHso assay,CHo试验) 4.旁路途径溶血活性测定(alternative pathway hemolysis50%assay,APHso assay, APHa试验) 5.致敏红细胞(sensitized red cell) 四、问答题 1.免疫溶血试验的原理和用途。 2.补体结合试验的影响因素。 3.如何进行补体单个成分的测定？ 4.补体结合试验和抗补体试验有何不同？ 5.补体依赖细胞毒试验的原理
A.免疫黏附试验 B.CH50 试验 C.ADCC 效应 D.凝集试验 E.Raji 细胞 试验 6.下列那些试验和补体系统无关 A.免疫黏附试验 B.CH50 试验 C.ADCC 效应 D.凝集试验 E.CDC 试验 7. 参与免疫溶血试验的成分有 A.溶血素 B.绵羊红细胞 C.补体 D.人红细胞 E.抗人红细 胞抗体 二、填空题 1．补体参与的反应试验类型包括 、 、 和 。 2．参与补体结合试验的试剂可分为 和 两个系统。 3．Ⅲ型变态反应疾病患者的血清中补体水平 。 4．补体的最佳保存温度是 。 5．补体结合试验中有 、 和 三个系统参与反应。 三、名词解释 1.免疫溶血试验(immunohemolysis test) 2.补体结合试验（complement fixation test，CFT） 3.血清总补体溶血活性测定(complement hemolysis 50% assay，CH50 assay，CH50 试验) 4.旁路途径溶血活性测定(alternative pathway hemolysis 50% assay，APH50 assay， APH50 试验) 5.致敏红细胞（sensitized red cell） 四、问答题 1.免疫溶血试验的原理和用途 。 2.补体结合试验的影响因素 。 3.如何进行补体单个成分的测定？ 4.补体结合试验和抗补体试验有何不同？ 5.补体依赖细胞毒试验的原理
6.免疫黏附试验的原理 7.补体测定有何临床意义？ 第三部分参考答案与题解 一、选择题 (一)单项选择题(A型题) 1.A2.A3.D4。C5.A6.B7.C8.E9.B 10.C (二)多项选择题(X型题) 1.ABCD 2.ABCDE 3.AB 4.CD 5.AE 6.CD 7.ABC 二、填空题 1。免疫溶血试验、补体结合试验、补体依赖的细胞毒试验的原理、免疫黏附试验的原 理。 2.指示系统、反应系统。 3.降低。 4.一20℃以下。5。指示系统、补体、 反应系统。 三、名词解释 1.免疫溶血试验：是补体能使己被抗体致敏了的红细胞发生溶血的一种实验方法，实 验时将三者混合，置37℃30min,如条件适合溶血即可发生。 2.补体结合试验：抗原抗体复合物可结合补体，而游离的抗原或抗体则不能，以溶血 素和绵羊红细胞作为指示系统，指示补体是否被结合，从而可判断抗原抗体是否相对应。它 可用已知抗原检测未知抗体，也可用己知抗体检测未知抗原。 3.50%补体溶血试验：用于血清总补体溶血活性测定，是根据免疫溶血试验原理设计的。 当红细胞与溶血素的量一定时，溶血程度与补体的量及活性正相关，因50%溶血作为反应终 点比以100%溶血作为终点更敏感，故以50%溶血作为反应终点。 4.50%旁路途径补体溶血活性测定：正常情况下，涎酸可抑制B因子活性。家兔红细胞 所含涎酸量低于其他动物的红细胞，可以激活血清中的B因子，引起旁路途径活化，导致兔 红细胞溶解。在红细胞量一定时，溶血程度与血清中参与旁路活化的补体量及活性呈正相关
6.免疫黏附试验的原理 7.补体测定有何临床意义？ 第三部分 参考答案与题解 一、选择题 （一） 单项选择题（A 型题） 1.A 2.A 3.D 4。C 5.A 6.B 7.C 8.E 9.B 10.C （二）多项选择题（X 型题） 1.ABCD 2.ABCDE 3.AB 4.CD 5.AE 6.CD 7.ABC 二、填空题 1。免疫溶血试验、补体结合试验、补体依赖的细胞毒试验的原理、免疫黏附试验的原 理。 2.指示系统、 反应系统。 3.降低。 4.－20℃以下。 5。指示系统、补体、 反应系统。 三、名词解释 1. 免疫溶血试验：是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血的一种实验方法，实 验时将三者混合，置 37℃ 30min，如条件适合溶血即可发生。 2. 补体结合试验：抗原抗体复合物可结合补体，而游离的抗原或抗体则不能，以溶血 素和绵羊红细胞作为指示系统，指示补体是否被结合，从而可判断抗原抗体是否相对应。它 可用已知抗原检测未知抗体，也可用已知抗体检测未知抗原。 3. 50%补体溶血试验：用于血清总补体溶血活性测定，是根据免疫溶血试验原理设计的。 当红细胞与溶血素的量一定时，溶血程度与补体的量及活性正相关，因 50%溶血作为反应终 点比以 100%溶血作为终点更敏感，故以 50%溶血作为反应终点。 4. 50%旁路途径补体溶血活性测定：正常情况下，涎酸可抑制 B 因子活性。家兔红细胞 所含涎酸量低于其他动物的红细胞，可以激活血清中的 B 因子，引起旁路途径活化，导致兔 红细胞溶解。在红细胞量一定时，溶血程度与血清中参与旁路活化的补体量及活性呈正相关
5.致敏红细胞：指与溶血素结合的绵羊红细胞。 四、问答题 1.原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。·免疫溶血试验所参与的成分有 补体，抗原(SRBC)及抗体（溶血素），这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成 分，稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定：溶血空斑试验：CH试验：补体结 合试验：抗补体试验等。 2.补体结合试验有五种成分参与，每一成分的变更均可影响结果。如某些游离的抗原 或抗体能结合补体具有抗补体能力，补体不能过多或过少，否则将影响溶血素和绵羊红细胞 的溶血，故补体结合试验的成分应加以滴定并设立多种对照。 3.补体单个成分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个成分 的“补体试剂”。而后利用免疫溶血试验的原理，将致敏红细胞与“补体试剂”混合，再加 入待测血清，孵育后，溶血程度与待测血清中的该补体成分的溶血功能有关。测定含量可用 己知抗体以单向琼脂扩散等方法进行。 4.补体结合试验是以溶血素和绵羊红细胞作为指示系统，指示补体是否被结合，从而 判断抗原抗体是否相对应。它可用己知抗原检测未知抗体，也可用己知抗体检测未知抗原。 而抗补体试验是以溶血素和绵羊红细胞作为指示系统，指示补体是否被结合，用以判断血清 中是否存在能结合补体的抗原抗体复合物。 5.带有特异抗原的靶细胞与相应抗体结合后，在补体参与下，靶细胞膜被损伤，靶细 胞死亡，染料进入细胞而着色。靶细胞被杀伤的情况多用形态学方法进行检测。 6.抗原抗体复合物激活补体后，可通过C或C粘附在具有补体受体C1的红细胞、 血小板或某些淋巴细胞上，形成较大的聚合物。利用这一原理设计的免疫粘附试验，可用于 检测抗原或抗体，也可检测细胞上的CR1。 7.一般补体升高多见于各种传染病，组织损伤，急性炎症和肿瘤病人，这些病人血清 补体总量可较正常人增高23倍，并有个别补体成分的升高，常见的是C4、C2,C和C的升 高，这可能与炎症感染过程中一些因子促进补体合成有关，但在病情危重时，总补体活性往 往下降。 补体下降分为先天性和后天获得性两种。先天性血清补体水平降低包括各种与人类补体 缺陷有关的疾病，后天获得性补体下降可能有以下情况：①补体被循环免疫复合物固定。如 急性肾小球肾炎时CH0、Ca下降：②补体合成减少。如严重肝脏疾病时CHso、Ca、C,明显下
5. 致敏红细胞：指与溶血素结合的绵羊红细胞。 四、问答题 1.原理是补体能使已被抗体致敏了的红细胞发生溶血。.免疫溶血试验所参与的成分有 补体，抗原（SRBC）及抗体（溶血素），这三种成分中如有两种是已知的就可测知第三个成 分，稀释该成分可测定其效价或含量。如溶血素的滴定；溶血空斑试验；CH50 试验；补体结 合试验；抗补体试验等。 2. 补体结合试验有五种成分参与，每一成分的变更均可影响结果。如某些游离的抗原 或抗体能结合补体具有抗补体能力，补体不能过多或过少，否则将影响溶血素和绵羊红细胞 的溶血，故补体结合试验的成分应加以滴定并设立多种对照。 3. 补体单个成分可测其溶血活性或含量。测定溶血活性应先制备缺乏该补体单个成分 的“补体试剂”。而后利用免疫溶血试验的原理，将致敏红细胞与“补体试剂”混合，再加 入待测血清，孵育后，溶血程度与待测血清中的该补体成分的溶血功能有关。测定含量可用 已知抗体以单向琼脂扩散等方法进行。 4．补体结合试验是以溶血素和绵羊红细胞作为指示系统，指示补体是否被结合，从而 判断抗原抗体是否相对应。它可用已知抗原检测未知抗体，也可用已知抗体检测未知抗原。 而抗补体试验是以溶血素和绵羊红细胞作为指示系统，指示补体是否被结合，用以判断血清 中是否存在能结合补体的抗原抗体复合物。 5. 带有特异抗原的靶细胞与相应抗体结合后，在补体参与下，靶细胞膜被损伤，靶细 胞死亡，染料进入细胞而着色。靶细胞被杀伤的情况多用形态学方法进行检测。 6. 抗原抗体复合物激活补体后，可通过 C3b 或 C4b 粘附在具有补体受体 CR1 的红细胞、 血小板或某些淋巴细胞上，形成较大的聚合物。利用这一原理设计的免疫粘附试验，可用于 检测抗原或抗体，也可检测细胞上的 CR1。 7．一般补体升高多见于各种传染病，组织损伤，急性炎症和肿瘤病人，这些病人血清 补体总量可较正常人增高 2~3 倍，并有个别补体成分的升高，常见的是 C4、C2，C3和 C9 的升 高，这可能与炎症感染过程中一些因子促进补体合成有关，但在病情危重时，总补体活性往 往下降。 补体下降分为先天性和后天获得性两种。先天性血清补体水平降低包括各种与人类补体 缺陷有关的疾病，后天获得性补体下降可能有以下情况：①补体被循环免疫复合物固定。如 急性肾小球肾炎时 CH50、C3 下降；②补体合成减少。如严重肝脏疾病时 CH50、C3、C4 明显下
降：③补体成分失活或消耗。如急性链球菌感染后肾小球肾炎时血清中出现C肾炎因子， 可引起C3大量活化而消耗：大面积烧伤，局部缺血时，机体释放各种蛋白水解酶，可裂解 多种补体成分，引起补体水平下降。 (谷俊莹刘若英)
降；③补体成分失活或消耗。如急性链球菌感染后肾小球肾炎时血清中出现 C3 肾炎因子， 可引起 C3 大量活化而消耗；大面积烧伤，局部缺血时，机体释放各种蛋白水解酶，可裂解 多种补体成分，引起补体水平下降。 (谷俊莹 刘若英)