第四章药物定量分析与分析方法验证(不讲) [教学目的 、掌握定量分析方法验证的效能指标。 、熟悉定量分析样品的前处理方法 了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用 [本章分配学时数]4学时 [教学环节与教学内容 [复习引入]2分钟 在上一章里,我们介绍了药物杂质检查的相关内容,其中包括11种一般杂 质的检查方法以及以药物和杂质在物化性质上的差异为基础的特殊杂质的检查 方法,另外我们还重点要求同学们着重掌握一些与药物杂质检查相关的概念。通 过上一章的学习,同学们应该掌握了一般杂质检查的原理、方法和计算,并熟悉 了特殊杂质检査的方法和原理。那么,在下一章里,同学们将会接触到药物分析 基础知识的第三大部分,即药物定量分析与分析方法验证。通过本章的学习,同 学们应该掌握定量分析方法验证的效能指标,熟悉定量分析样品的前处理方法 了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用 [教授新课] 定量分析样品的前处理方法 1.概述 (1)含金属或卤素的药物,如葡萄糖酸锑钠,硬脂酸镁,碘苯酯,磺 溴肽钠等,在分析前需要经过不同方法处理后,方可进行测定。 (2)处理方法因金属或卤素在分子中结合的牢固程度而异,如:有机 卤素药物,所含卤素原子均直接与碳原子相连,但不同药物中卤 素所处的位置不同,则与碳原子结合的牢固程度就有差异。如果 卤素和芳环相连接,则结合牢固,与脂肪酸的碳原子相连接,则 结合不牢固 (3)而含金属的有机药物,有两种情况:一是金属原子不直接与碳原 子相连,通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物,称为含金属
- 1 - 第四章 药物定量分析与分析方法验证（不讲） [教学目的] 一、掌握定量分析方法验证的效能指标。 二、熟悉定量分析样品的前处理方法。 三、了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用。 [本章分配学时数] 4 学时 [教学环节与教学内容] [复习引入] 2 分钟 在上一章里，我们介绍了药物杂质检查的相关内容，其中包括 11 种一般杂 质的检查方法以及以药物和杂质在物化性质上的差异为基础的特殊杂质的检查 方法，另外我们还重点要求同学们着重掌握一些与药物杂质检查相关的概念。通 过上一章的学习，同学们应该掌握了一般杂质检查的原理、方法和计算，并熟悉 了特殊杂质检查的方法和原理。那么，在下一章里，同学们将会接触到药物分析 基础知识的第三大部分，即药物定量分析与分析方法验证。通过本章的学习，同 学们应该掌握定量分析方法验证的效能指标，熟悉定量分析样品的前处理方法， 了解定量分析样品的前处理方法的进展及在药物分析中的应用。 [教授新课] 一、定量分析样品的前处理方法 1．概述 （1） 含金属或卤素的药物，如葡萄糖酸锑钠，硬脂酸镁，碘苯酯，磺 溴肽钠等，在分析前需要经过不同方法处理后，方可进行测定。 （2） 处理方法因金属或卤素在分子中结合的牢固程度而异，如：有机 卤素药物，所含卤素原子均直接与碳原子相连，但不同药物中卤 素所处的位置不同，则与碳原子结合的牢固程度就有差异。如果 卤素和芳环相连接，则结合牢固，与脂肪酸的碳原子相连接，则 结合不牢固。 （3） 而含金属的有机药物，有两种情况：一是金属原子不直接与碳原 子相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物，称为含金属
的有机药物,其分子结构中的金属原子结合不够牢固,在水溶液 中即可理解出金属离子,若有机结构部分不干扰分析时,可在溶 液中直接进行其金属的鉴别或含量测定;二是金属原子直接与碳 原子以共价键相连接,结合状态比较牢,称为有机金属药物,在 溶液中其金属一般不能解离成离子状态,应该根据共价键的牢固 程度,经适当处理,将其金属转变为适于分析的状态(多转变为 无机的金属盐或离子),方可进行其金属的鉴别或含量测定。 2.不经有机破坏的分析方法 (1)直接测定法 凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些CM(金属 原子直接与碳原子相连)键结合不牢固的有机金属药物,在水溶 液中可以电离,因而不需有机破坏,可直接选用适当的方法进行 测定。例如富马酸亚铁的含量测定,可用硫酸铈标准溶液直接进 行滴定。 (2)经水解后测定法 1)直接回流后测定法 本法是将含卤素的有机药物溶于适当溶剂(如乙醇)中,加NaOH 溶液或AgNO3溶液后,加热回流使其水解,将有机结合的卤素 经水解作用转变为无机的卤素离子,然后选用间接银量法进行测 定。本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药 物,如卤素和脂肪酸链相连者 例如:三氯叔丁醇的含量测定(银量法) 本品在NaOH溶液中加热回流使分解产生NaCl,与AgNO3生成 AgCl沉淀,过量的AgNO3用硫氰酸铵液回滴定。 CCI-C(CH3h-OH 4NaOH 回流 (CH3hC0+ 3NaCI+HCOONa 2H( NaCl+ AgNO3 AgCl L NaNO AgNO3+ NHSCN 一 AgSCN+NH4NO )用硫酸水解后测定法 2
- 2 - 的有机药物，其分子结构中的金属原子结合不够牢固，在水溶液 中即可理解出金属离子，若有机结构部分不干扰分析时，可在溶 液中直接进行其金属的鉴别或含量测定；二是金属原子直接与碳 原子以共价键相连接，结合状态比较牢，称为有机金属药物，在 溶液中其金属一般不能解离成离子状态，应该根据共价键的牢固 程度，经适当处理，将其金属转变为适于分析的状态（多转变为 无机的金属盐或离子），方可进行其金属的鉴别或含量测定。 2．不经有机破坏的分析方法 （1） 直接测定法 凡金属原子不直接与碳原子相连的含金属药物或某些 C-M（金属 原子直接与碳原子相连）键结合不牢固的有机金属药物，在水溶 液中可以电离，因而不需有机破坏，可直接选用适当的方法进行 测定。例如富马酸亚铁的含量测定，可用硫酸铈标准溶液直接进 行滴定。 （2） 经水解后测定法 1) 直接回流后测定法 本法是将含卤素的有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加 NaOH 溶液或 AgNO3 溶液后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素 经水解作用转变为无机的卤素离子，然后选用间接银量法进行测 定。本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药 物，如卤素和脂肪酸链相连者。 例如：三氯叔丁醇的含量测定（银量法） 本品在 NaOH 溶液中加热回流使分解产生 NaCl，与 AgNO3 生成 AgCl 沉淀，过量的 AgNO3 用硫氰酸铵液回滴定。 CCl3 C(CH3)2 OH + 4NaOH 回流 (CH3)2CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O NaCl + AgNO3 AgCl + NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN + NH4NO3 2) 用硫酸水解后测定法
例如:硬脂酸镁含量测定 硬脂酸镁,与定量硫酸液共沸、水解生成硬脂酸和MgSO4,剩余 的酸以NaOH液滴定。 Mg(C17H3sCOO)+H2S0-4 MgSO4 2C17H35CO0F H2S04 2NaoH Na2SO4 2H20 (3)经氧化还原后测定法 1)碱性还原后测定法 卤素结合于芳环上时,由于分子中碘的结合较牢固,需在碱性溶 液中加还原剂(如锌粉)回流,使碳一碘键断裂,形成无机碘化 物后测定 例如:泛影酸含量测定(银量法) COOH 回流 + 1INaoH 3Zn CH3COHN NHCOCH3 COONa 3Nal 2CH3 COoNa 3Na2ZnO2+ 3H2O H2N NH2 NaI+ANO3→Ag↓+NaNO3 2)酸性还原后测定法 例如:碘番酸含量测定 碘番酸在醋酸酸性条件下用锌粉还原,使碳一碘键断裂,形成无 机碘化物后用银量法测定。 3)利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量(间接碘量法) a.含锑药物 利用五价锑有机药物中可游离的Sbs的氧化性,在酸性液中 氧化碘化钾,并定量析岀碘,可用硫代硫酸钠滴定液滴定(如 3
- 3 - 例如：硬脂酸镁含量测定 硬脂酸镁，与定量硫酸液共沸、水解生成硬脂酸和 MgSO4，剩余 的酸以 NaOH 液滴定。 Mg(C17H35COO)2 + H2SO4 MgSO4 + 2C17H35COOH H2SO4 + 2NaOH Na2SO4 + 2H2O （3） 经氧化还原后测定法 1）碱性还原后测定法 卤素结合于芳环上时，由于分子中碘的结合较牢固，需在碱性溶 液中加还原剂（如锌粉）回流，使碳－碘键断裂，形成无机碘化 物后测定。 例如：泛影酸含量测定（银量法） COOH I NHCOCH3 I CH3COHN I + 11NaOH + 3Zn 回流 COONa H2N NH2 + 3NaI + 2CH3COONa + 3Na2ZnO2 + 3H2O NaI + AgNO3 AgI + NaNO3 2）酸性还原后测定法 例如：碘番酸含量测定 碘番酸在醋酸酸性条件下用锌粉还原，使碳－碘键断裂，形成无 机碘化物后用银量法测定。 3）利用药物中可游离的金属离子的氧化性测定含量（间接碘量法） a．含锑药物 利用五价锑有机药物中可游离的 Sb5＋的氧化性，在酸性液中 氧化碘化钾，并定量析出碘，可用硫代硫酸钠滴定液滴定（如：
葡萄糖酸锑钠的含量测定)。 Sb+ 2KI I2 L2+ 2Na2S2O3- 2Nal Na2S4O6 b.含铁药物 将含铁药物加酸溶解后,便游离出Fe3,利用Fe3在酸性溶 液中氧化碘化钾,析出的碘可用硫代硫酸钠滴定液滴定以测 定含量。 3.经有机破坏的分析方法 条件:含金属有机药物及有机卤素药物结构中的金属原子、卤素与碳原 子结合牢固者,用水解或氧化还原后测定方法难以将有机结合的金属原 子及卤素转变为无机的金属化合物及卤素化合物。 (1)湿法破坏 1)硝酸一高氯酸法 本法破坏能力强,反应比较强烈。故进行破坏时,必须严密注意 切勿将容器中的内容物蒸干,以免发生爆炸 本法适用于血、尿、组织等生物样品的破坏。经本法破坏后,所 得的无机金属离子,一般为高价态。本法对含氮杂环药物的破坏 不够完全,此时宜选用干法烧灼进行破坏 2)硝酸一硫酸法 本法适用于大多数有机物质的破坏,如燃料、中间体或药物等。 经本法破坏分解所得的无机金属离子均为高价态 因碱土金属可与硫酸形成不溶性的硫酸盐,将会吸附被测定的金 属离子,使测定的结果偏低。所以本法不适用于含碱土金属有机 药物的破坏。此时,可改用硝酸一髙氯酸法进行破坏、 3)硫酸一硫酸盐法 本法所用硫酸盐为硫酸钾或硫酸钠,因硫酸钠为含水化合物,不 利于有机破坏,故一般多采用硫酸钾。加入硫酸盐的目的,是为 了提髙硫酸的沸点,以使样品破坏完全。同时,也防止硫酸在加 热过程中过早地分解为三氧化硫而损失
- 4 - 葡萄糖酸锑钠的含量测定）。 Sb 5＋ ＋ 2KI H + Sb 3+ + I2 + 2K + I2 + 2Na2S2O3 2NaI + Na2S4O6 b．含铁药物 将含铁药物加酸溶解后，便游离出 Fe3＋，利用 Fe3＋在酸性溶 液中氧化碘化钾，析出的碘可用硫代硫酸钠滴定液滴定以测 定含量。 3．经有机破坏的分析方法 条件：含金属有机药物及有机卤素药物结构中的金属原子、卤素与碳原 子结合牢固者，用水解或氧化还原后测定方法难以将有机结合的金属原 子及卤素转变为无机的金属化合物及卤素化合物。 （1） 湿法破坏 1）硝酸－高氯酸法 本法破坏能力强，反应比较强烈。故进行破坏时，必须严密注意 切勿将容器中的内容物蒸干，以免发生爆炸。 本法适用于血、尿、组织等生物样品的破坏。经本法破坏后，所 得的无机金属离子，一般为高价态。本法对含氮杂环药物的破坏 不够完全，此时宜选用干法烧灼进行破坏。 2）硝酸－硫酸法 本法适用于大多数有机物质的破坏，如燃料、中间体或药物等。 经本法破坏分解所得的无机金属离子均为高价态。 因碱土金属可与硫酸形成不溶性的硫酸盐，将会吸附被测定的金 属离子，使测定的结果偏低。所以本法不适用于含碱土金属有机 药物的破坏。此时，可改用硝酸－高氯酸法进行破坏、 3）硫酸－硫酸盐法 本法所用硫酸盐为硫酸钾或硫酸钠，因硫酸钠为含水化合物，不 利于有机破坏，故一般多采用硫酸钾。加入硫酸盐的目的，是为 了提高硫酸的沸点，以使样品破坏完全。同时，也防止硫酸在加 热过程中过早地分解为三氧化硫而损失
经本法破坏分解所得的金属离子,多为低价态。本法常用于含砷 或锑有机药物的破坏分解。因在有机物破坏时须经炭化过程,最 后得到低价态的三价砷或锑离子。如用本法破坏低碳化合物时, 宜添加适量的淀粉等多碳化合物,以保证在破坏过程中,经炭化, 将金属离子都转变为低价态 4)其它湿法 硝酸一硫酸一髙氯酸法、硫酸一过氧化氢法、硫酸一髙锰酸钾法 等,其根据都是增加氧化剂 注 a.湿法破坏所用的仪器,一般为硅玻璃或硼玻璃制成的凯氏烧 瓶 b.所用试剂及蒸馏水均不应含有被测金属离子或干扰测定的其 它金属离子等组分 c.由于整个操作过程所用矿酸量数倍于样品,所以必须按相同 条件进行空白试验校正 d.操作时应在通风橱内进行。 (2)干法破坏 )本法是将有机物灼烧灰化以达分解的目的。将适量样品置于瓷坩 埚或镍坩埚、铂坩埚中,常加无水碳酸钠或轻质氧化镁等以助灰 化,混合均匀后,先小火加热,使样品完全炭化,然后放入高温 炉中灼烧,使其灰化完全,即可 2)应注意的问题 a.加热或灼烧时,应控制温度在420℃以下,以防止某些被测金 属化合物的挥发。 b.灰化完全与否,直接影响测定结果的准确性。 c.经本法破坏后,所得灰分往往不易溶解,但此时切勿弃去。 3)本法适用于湿法不易破坏完全的有机物(如含氮杂环类有机药 物)以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。不适用于含易挥 发性金属(如汞、砷等)有机药物的破坏
- 5 - 经本法破坏分解所得的金属离子，多为低价态。本法常用于含砷 或锑有机药物的破坏分解。因在有机物破坏时须经炭化过程，最 后得到低价态的三价砷或锑离子。如用本法破坏低碳化合物时， 宜添加适量的淀粉等多碳化合物，以保证在破坏过程中，经炭化， 将金属离子都转变为低价态。 4）其它湿法 硝酸－硫酸－高氯酸法、硫酸－过氧化氢法、硫酸－高锰酸钾法 等，其根据都是增加氧化剂。 注： a. 湿法破坏所用的仪器，一般为硅玻璃或硼玻璃制成的凯氏烧 瓶； b. 所用试剂及蒸馏水均不应含有被测金属离子或干扰测定的其 它金属离子等组分； c. 由于整个操作过程所用矿酸量数倍于样品，所以必须按相同 条件进行空白试验校正； d. 操作时应在通风櫉内进行。 （2） 干法破坏 1) 本法是将有机物灼烧灰化以达分解的目的。将适量样品置于瓷坩 埚或镍坩埚、铂坩埚中，常加无水碳酸钠或轻质氧化镁等以助灰 化，混合均匀后，先小火加热，使样品完全炭化，然后放入高温 炉中灼烧，使其灰化完全，即可。 2) 应注意的问题 a. 加热或灼烧时，应控制温度在 420℃以下，以防止某些被测金 属化合物的挥发。 b. 灰化完全与否，直接影响测定结果的准确性。 c. 经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但此时切勿弃去。 3) 本法适用于湿法不易破坏完全的有机物（如含氮杂环类有机药 物）以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。不适用于含易挥 发性金属（如汞、砷等）有机药物的破坏
(3)氧瓶燃烧法 氧瓶燃烧法( oxygen flask combustion method)是将有机药物放入 充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧,并将燃烧所产生的欲测物 质吸收于适当的吸收液中,然后根据欲测物质的性质,采用适宜 的分析方法进行鉴别,检査或测定含卤素有机药物或含硫、氮、 硒等其它元素的有机药物 本法是快速分解有机物的简单方法,它不需要复杂设备,就能够 使有机化合物中的待测元素定量分解成离子型 该方法的详细介绍及举例请参阅教材P67~69 二、定量分析方法特点 容量分析法 (1)容量分析法是将已知浓度的滴定液(中国药典中称滴定液)由滴 定管滴加到待测药物的溶液中,直到所加滴定液与被测药物按化 学计量反应完全为止,然后根据滴定液的浓度和消耗的体积,就 可以计算出被测药物的含量 (2)容量分析的关键问题是如何确定等当点。 当滴定液与被测药物完全作用时,反应达到了化学计量点即等当 点,在进行容量分析时,都希望在等当点时停止滴定 在等当点时,常常没有任何外观现象的变化,为此必须借助指示 剂的变色来确定滴定终点。 滴定终点与等当点不一定恰好符合,二者之间的误差称为滴定误 差。这是容量分析误差的来源之一,为了减少滴定误差,就需要 选择合适的指示剂,使滴定终点尽可能接近等当点。 (3)容量分析通常用于测定高含量或中含量组分,即被测组分的含量 在1%以上。容量分析法比较准确,一般情况下相对误差可达0.2% 以下。 (4)容量分析法操作简便、快速、比较准确,所用仪器普通易得,在 药品检验工作中具有很大的实用价值 (5)容量分析法的计算问题
- 6 - （3） 氧瓶燃烧法 氧瓶燃烧法（oxygen flask combustion method）是将有机药物放入 充满氧气的密闭的燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧所产生的欲测物 质吸收于适当的吸收液中，然后根据欲测物质的性质，采用适宜 的分析方法进行鉴别，检查或测定含卤素有机药物或含硫、氮、 硒等其它元素的有机药物。 本法是快速分解有机物的简单方法，它不需要复杂设备，就能够 使有机化合物中的待测元素定量分解成离子型。 该方法的详细介绍及举例请参阅教材 P67~69。 二、定量分析方法特点 1．容量分析法 （1） 容量分析法是将已知浓度的滴定液（中国药典中称滴定液）由滴 定管滴加到待测药物的溶液中，直到所加滴定液与被测药物按化 学计量反应完全为止，然后根据滴定液的浓度和消耗的体积，就 可以计算出被测药物的含量。 （2） 容量分析的关键问题是如何确定等当点。 当滴定液与被测药物完全作用时，反应达到了化学计量点即等当 点，在进行容量分析时，都希望在等当点时停止滴定。 在等当点时，常常没有任何外观现象的变化，为此必须借助指示 剂的变色来确定滴定终点。 滴定终点与等当点不一定恰好符合，二者之间的误差称为滴定误 差。这是容量分析误差的来源之一，为了减少滴定误差，就需要 选择合适的指示剂，使滴定终点尽可能接近等当点。 （3） 容量分析通常用于测定高含量或中含量组分，即被测组分的含量 在 1％以上。容量分析法比较准确，一般情况下相对误差可达 0.2％ 以下。 （4） 容量分析法操作简便、快速、比较准确，所用仪器普通易得，在 药品检验工作中具有很大的实用价值。 （5） 容量分析法的计算问题
1)滴定度 指每lml某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。中 国药典用毫克(mg)表示 2)滴定度(T)的计算 在容量分析中,被测药物(B)与滴定液(A)之间都按一定 的摩尔比进行反应,反应可表示为: aa bB 滴定度(T)可按下式计算 T=M (mg/m/) M一滴定液的摩尔浓度 b-被测药物的摩尔数 a一滴定液的摩尔数 B一被测药物的毫摩尔质量(分子量) 3)百分含量计算 在测定药物含量时,常用直接滴定法和回滴定法,其计算方 法如下: a.直接滴定法 此法是用滴定液直接滴定,以求得被测药物的含量。 含量%= F×T 100% W T一滴定度值 W一供试品取量 V一消耗滴定液的体积 在实际工作中,所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规 定的摩尔浓度不一定恰好符合,此时就不能直接应用药 典上所给出的滴定度(T),但只要乘以滴定液浓度校正 因数(F)即可换算成实际的滴定度(T),即 式中F 实际摩尔浓度 规定摩尔浓度
- 7 - 1）滴定度 指每 1ml 某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物的重量。中 国药典用毫克（mg）表示。 2）滴定度（T）的计算 在容量分析中，被测药物（B）与滴定液（A）之间都按一定 的摩尔比进行反应，反应可表示为： aA + bB cC + dD 滴定度（T）可按下式计算： ( / ) b T M B mg ml a = M－滴定液的摩尔浓度 b－被测药物的摩尔数 a－滴定液的摩尔数 B－被测药物的毫摩尔质量（分子量） 3）百分含量计算 在测定药物含量时，常用直接滴定法和回滴定法，其计算方 法如下： a. 直接滴定法 此法是用滴定液直接滴定，以求得被测药物的含量。 100% V T W 含量％＝ T－滴定度值 W－供试品取量 V－消耗滴定液的体积 在实际工作中，所配制的滴定液的摩尔浓度与药典中规 定的摩尔浓度不一定恰好符合，此时就不能直接应用药 典上所给出的滴定度（T），但只要乘以滴定液浓度校正 因数（F）即可换算成实际的滴定度（T’），即 T T F ' = 式中 F = 实际摩尔浓度 规定摩尔浓度
于是,被测药物的百分含量可由下式求得: 含量%=xr 100% xT×F W 在学习过程中应注意记忆滴定液与被测药物在反应中的 摩尔比,即反应式中a与b的数值。只有这样,才能正 确计算滴定液和百分含量。 b.回滴定法(剩余滴定法) 此法是先加入定量过量的滴定液A,使其与被测药物反 应,待此反应进行完全后,再用另一滴定液B来回滴反 应中剩余的滴定液A 不做空白试验时百分含量计算方法 含量 (V-VB)×T×F 100% VA一先加入的定量过量的滴定液A体积 VB一滴定液B消耗体积 FA一滴定液A浓度校正因数 滴定液B浓度校正因数 W一供试品取量 T一滴定度 Il做空白试验的百分含量计算方法 含量。(V-B)xT×F 100% Vo一空白试验消耗硫酸滴定液体积 VB一样品测定试验消耗滴定液体积 T一滴定度 F一滴定液浓度校正因数 W一供试品取样量(g) 2.光谱分析法 当物质与辐射能相互作用时,物质内部发生能级跃迁。记录由能级跃迁 所产生的辐射能随波长的变化所得的图谱称为光谱,利用物质的光谱进
- 8 - 于是，被测药物的百分含量可由下式求得： ' 100% V T W 含量％＝ 100% V T F W = 在学习过程中应注意记忆滴定液与被测药物在反应中的 摩尔比，即反应式中 a 与 b 的数值。只有这样，才能正 确计算滴定液和百分含量。 b. 回滴定法（剩余滴定法） 此法是先加入定量过量的滴定液 A，使其与被测药物反 应，待此反应进行完全后，再用另一滴定液 B 来回滴反 应中剩余的滴定液 A。 I. 不做空白试验时百分含量计算方法 0 B 100% V V T F W （ - ） 含量％＝ VA－先加入的定量过量的滴定液 A 体积 VB－滴定液 B 消耗体积 FA－滴定液 A 浓度校正因数 FB－滴定液 B 浓度校正因数 W－供试品取量 T－滴定度 II. 做空白试验的百分含量计算方法 0 B 100% V V T F W （ - ） 含量％＝ V0－空白试验消耗硫酸滴定液体积 VB－样品测定试验消耗滴定液体积 T－滴定度 F－滴定液浓度校正因数 W－供试品取样量（g） 2．光谱分析法 当物质与辐射能相互作用时，物质内部发生能级跃迁。记录由能级跃迁 所产生的辐射能随波长的变化所得的图谱称为光谱，利用物质的光谱进
行定性、定量和结构分析的方法称为光谱分析法,简称光谱法。如紫外 可见分光光度法、荧光分析法、原子吸收分光光度法和红外分光光度 法等 (1)紫外一可见分光光度法 1)特点 紫外一可见分光光度法是根据物质分子对波长为200nm 760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的光谱分析 方法。主要特点如下: a.灵敏度高,可达10-4gml-10g/ml b.准确度高,相对误差为2%~5%。 仪器价格较低廉,操作简单,易于普及。 d.应用广泛。许多化合物都可以采用此法进行测定,同时, 还可以应用计算分光光度法不经分离而直接测定混合物 中各组分的含量。 2)朗伯一比耳定律 3)仪器校正和检定 4)对溶剂的要求 5)测定法 详见教材P72~74 对照品比较法 b.吸收系数法 c.计算分光光度法 (2)荧光分析法 1)特点 某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波 长较长的荧光。当激发光停止照射后,荧光随之消失。同 种分子结构的物质,用同一波长的激发光照射,可以发射相 同波长的荧光。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条 件固定时,物质在一定浓度范围内,其荧光强度(也叫发射 光强度)与溶液中该物质的浓度成正比关系,可以用作定量 9
- 9 - 行定性、定量和结构分析的方法称为光谱分析法，简称光谱法。如紫外 －可见分光光度法、荧光分析法、原子吸收分光光度法和红外分光光度 法等。 （1） 紫外－可见分光光度法 1）特点 紫外－可见分光光度法是根据物质分子对波长为 200nm～ 760nm 这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的光谱分析 方法。主要特点如下： a. 灵敏度高，可达 10-4g/ml～10-7g/ml。 b. 准确度高，相对误差为 2％～5％。 c. 仪器价格较低廉，操作简单，易于普及。 d. 应用广泛。许多化合物都可以采用此法进行测定，同时， 还可以应用计算分光光度法不经分离而直接测定混合物 中各组分的含量。 2）朗伯－比耳定律 3）仪器校正和检定 4）对溶剂的要求 5）测定法 详见教材 P72～74 a. 对照品比较法 b. 吸收系数法 c. 计算分光光度法 （2） 荧光分析法 1）特点 某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光波 长较长的荧光。当激发光停止照射后，荧光随之消失。同一 种分子结构的物质，用同一波长的激发光照射，可以发射相 同波长的荧光。当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条 件固定时，物质在一定浓度范围内，其荧光强度（也叫发射 光强度）与溶液中该物质的浓度成正比关系，可以用作定量
分析。本法特点为: a.灵敏度髙,荧光分析法的灵敏度一般较紫外一可见分光 光度法为高,其灵敏度可达100g/ml~1012g/mnl。 b.浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用,以及由于在液面 附近溶液会吸收激发光,使荧光强度下降,导致荧光强 度与浓度不成正比,因此,荧光分析法应在低浓度溶液 中进行。 c.荧光分析法因灵敏度高,故干扰因数也多,因此必须做 空白试验。 d.对易被光分解的样品,为使仪器灵敏度定标准确避免因 激发光多次照射而影响荧光强度,可选择一种激发光和 发射光波长与之近似而对光稳定的物质配成适当浓度的 溶液,作为基准溶液。在测定供试品溶液时用基准溶液 代替对照品溶液校正仪器的灵敏度。 e.能产生荧光的物质数量不多,但如果采用荧光衍生试剂, 常使无荧光或弱荧光物质得到强荧光性产物,从而提高 了分析方法的灵敏度和选择性,更扩大了荧光分析法的 应用范围。 f.取样少,方法快速,在药物分析领域中是重要的分析手 段之一 2)荧光分析仪(详见教材P74) 3)含量测定(详见教材P74~75) 3.色谱分析法 色谱分析法(又称层析法)根据其分离原理可分为:吸附色谱、分配色 谱、离子交换色谱与排阻色谱 又可根据分离方法分为:纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱 法、高效液相色谱法等 色谱分析法是一种分离分析方法,它先将各组分从混合物中分离再逐个 分析,因此是分析混合物的最有力手段。此法具有高灵敏度(可达
- 10 - 分析。本法特点为： a. 灵敏度高，荧光分析法的灵敏度一般较紫外－可见分光 光度法为高，其灵敏度可达 10-10g/ml～10-12g/ml。 b. 浓度太大的溶液会有“自熄灭”作用，以及由于在液面 附近溶液会吸收激发光，使荧光强度下降，导致荧光强 度与浓度不成正比，因此，荧光分析法应在低浓度溶液 中进行。 c. 荧光分析法因灵敏度高，故干扰因数也多，因此必须做 空白试验。 d. 对易被光分解的样品，为使仪器灵敏度定标准确避免因 激发光多次照射而影响荧光强度，可选择一种激发光和 发射光波长与之近似而对光稳定的物质配成适当浓度的 溶液，作为基准溶液。在测定供试品溶液时用基准溶液 代替对照品溶液校正仪器的灵敏度。 e. 能产生荧光的物质数量不多，但如果采用荧光衍生试剂， 常使无荧光或弱荧光物质得到强荧光性产物，从而提高 了分析方法的灵敏度和选择性，更扩大了荧光分析法的 应用范围。 f. 取样少，方法快速，在药物分析领域中是重要的分析手 段之一。 2）荧光分析仪（详见教材 P74） 3）含量测定（详见教材 P74～75） 3．色谱分析法 色谱分析法（又称层析法）根据其分离原理可分为：吸附色谱、分配色 谱、离子交换色谱与排阻色谱。 又可根据分离方法分为：纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱 法、高效液相色谱法等。 色谱分析法是一种分离分析方法，它先将各组分从混合物中分离再逐个 分析，因此是分析混合物的最有力手段。此法具有高灵敏度（可达