一、中医实验研究的目的与意义 首先,第一自然段,讲定义,讲目的。 介绍了为什么中医要引入实验方法(弥补临床观察、 直觉领悟之不足等等)。 “基础研究优点: 1)通常可以提示什么可能发生; 2)从可控的实验室情境中得出的结果往往比现实生活 中的更有说服力。” (B.H.坎特威茨等.实验心理学,25)
背景 中医药对疾病治疗的疗效,需要比较、评价、发展、 提高。如何实现?动物实验是主要手段之一。 中医临床特点是辨证论治。“同病异治”、“异病同治”。 自然地要求实验动物,以及动物实验中开展辨证论治。 问题是动物如何辨证论治,首先是动物有没有证候,如 何采集其证候。 诚如教材撰写所言,在撰写该教材的时候 (1998-1999),中医学术界尚不能对小鼠等实验动物, 开展辨证论治
当时对疾病动物证候的判断,主要采取三种方式: 1)以方测证。 2)微观辨证(即引用临床或实验发现的与证候有关 的实验室检测指标)。 3)疾病、证候叠加造模。 在取得积极进展的同时,其局限性妨碍了其推广与 应用。 通过我们多年的探索,小鼠参见虚证的四诊和辨证 方法基本建立。我们以后会介绍
假说 1.荷瘤(疾病)小鼠是存在证候,以及证候演变的。 2.采用我们建立起来的小鼠四诊&辨证方法,是可 以采集并刻画荷瘤小鼠证候的。 3.早期荷瘤小鼠的证候是可以预测其预后的。 4.不同中药处方对荷瘤小鼠的作用可能存在差异
材料和方法 1.实验动物与造模 KM品系小鼠,雄性,120只,17-24g,清洁级条件 下常规饲养。随机取10只作为正常对照,其余腹水传代 肝癌H22细胞右腋下接种0.2ml(含瘤细胞数8×10个)。 2.实验分组及用药 接种后第5天选出瘤体大小适中小鼠90只(其余淘 汰),随机分组分为10组,每组小鼠10只:正常组对照 主(甲)、模型对照组(乙)、不同中药复方组8个,来 自国内公开报道的处方(处方与出处不宜公开),分别标 记为丙、丁、戊、己、庚、辛、壬、癸。并于当天用药。 中药采用标准水煎醇沉工艺,剂量为正常成人每公斤体 重的10倍。每组小鼠每日灌胃0.5ml,正常组及模型组 灌等量自来水。常规饲养
3.小鼠四诊检测指标及方法 标准采集: (1)体重 (2)腋温(C) (3)爪和尾显微数码拍照(计算机图像处理 提取反映红色程度的r值) (4)晚间35s旷场自主活动计数(跨格数的水 平移动、前肢离地数的垂直移动) (5)瘤体积(cm,计算公式:abb/2,a代表 肿瘤的长径,b代表肿瘤的短径) (6)估算瘤重(g,瘤重=瘤体积) (7)生存时间
3.小鼠四诊检测指标及方法 标准采集: (1)体重 (2)腋温(℃) (3)爪和尾显微数码拍照(计算机图像处理 ,提取反映红色程度的r值) (4)晚间35s旷场自主活动计数(跨格数的水 平移动、前肢离地数的垂直移动) (5)瘤体积(cm,计算公式:abb/2,a代表 肿瘤的长径,b代表肿瘤的短径) (6)估算瘤重(g,瘤重=瘤体积) (7)生存时间
结果 1.不同组别荷瘤小鼠生存情况 120% 100% ■日B日998899日 80% 60% 出 40% 20% 乙丙丁戊己庚辛壬癸 0% 三 2 8 邑 居 接种后天数 图2所有荷瘤小鼠生存情况
结果 1.不同组别荷瘤小鼠生存情况 图2 所有荷瘤小鼠生存情况
2.荷瘤小鼠不同阶段四诊的演变 (1)总体上,荷瘤小鼠肿瘤体积呈持续增长; 去瘤体重呈抛物线状,中晚期增长平缓)。 2 58 0 53 48 0一正常体重 ·一瘤体积 43 。一荷瘤体重 女一去瘤体重 38 33 28 7d 14d 18d21d25d28d32d 7d 14d18d21d25d28d32d 接种后天数 接种后天数 图3所有荷瘤小鼠估算瘤重(g)增长情况 图4所有荷瘤小鼠体重(g)增长情况 以上分别反映什么证候?
2.荷瘤小鼠不同阶段四诊的演变 (1)总体上,荷瘤小鼠肿瘤体积呈持续增长; 去瘤体重呈抛物线状,中晚期增长平缓)。 图3 所有荷瘤小鼠估算瘤重(g)增长情况 图4 所有荷瘤小鼠体重(g)增长情况 以上分别反映什么证候?
(2)荷瘤小鼠好奇和自主活动持续下降。旷场检 测小鼠水平和垂直运动减少。 (3)荷瘤小鼠腋温持续下降,下降幅度大,严重 时降幅达9%! 西 38.5 164 5 12 7 36. 10 0一 正常水平 ·一荷瘤水平 6 0一正常腋温 8 ·一正常垂直 翼 35 。一荷瘤腋温 6 士荷瘤垂直 35 34 34 33 33 7d 14d 18d21d25d28d32d 7d 14d 18d21d25d28d32d 接种后天数 接种后天数 图5所有荷瘤小鼠旷场活动情况 图6所有荷瘤小鼠腋温(℃)改变情况 以上分别反映什么证候?
(2)荷瘤小鼠好奇和自主活动持续下降。旷场检 测小鼠水平和垂直运动减少。 (3)荷瘤小鼠腋温持续下降,下降幅度大,严重 时降幅达9%! 图5 所有荷瘤小鼠旷场活动情况 图6 所有荷瘤小鼠腋温(℃)改变情况 以上分别反映什么证候?