遗传转化实验 一、 仪器设备:高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真空泵、电子天平、 恒温培养摇床、离心机、光照培养箱等。 二、 器具:搪瓷杯、搪瓷盘、100ml 三角烧瓶、250ml 三角瓶、试剂瓶、烧 杯、培养皿、移液管、解剖刀柄、刀片、长镊子、滤纸、pH 试纸(5.4-7.0)、 标签纸、药勺、封口薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、1.5ml 的塑料 离心管、加液枪(100ul-1ml),枪头、枪头盒、细菌过滤器、0.22-0.45um 的虑膜、注射器等。 三、 实验材料:胡萝卜和水稻的愈伤组织 细菌菌株:根癌农杆菌菌株 EHA105 , 携 带 表 达 载 体 PCAMBIA1301-Sag12-IPT-Nos. 四、 剂及其配制: LB 培养基的配制: 将下列组分溶解在 0.9L 蒸馏水中: 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用 1N NaOH(10~15ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L 10ml 的 10mmol/l 的 AS(乙酰丁香酮)母液(100x)配制:称 19.6mg 的 AS, 先溶于少量甲醇中,然后慢慢加蒸馏水定容至 10ml,过滤除菌,分装成 200ul/ 管(每组 1 管),使用时将 200ul 的 AS 母液加入 20ml 的 MS 液体培养基中
遗传转化实验 一、 仪器设备:高压蒸汽灭菌锅、洁净工作台、循环水式真空泵、电子天平、 恒温培养摇床、离心机、光照培养箱等。 二、 器具:搪瓷杯、搪瓷盘、100ml 三角烧瓶、250ml 三角瓶、试剂瓶、烧 杯、培养皿、移液管、解剖刀柄、刀片、长镊子、滤纸、pH 试纸(5.4-7.0)、 标签纸、药勺、封口薄膜、牛皮纸、线绳、牛皮筋、脱脂棉、1.5ml 的塑料 离心管、加液枪(100ul-1ml),枪头、枪头盒、细菌过滤器、0.22-0.45um 的虑膜、注射器等。 三、 实验材料:胡萝卜和水稻的愈伤组织 细菌菌株:根癌农杆菌菌株 EHA105 , 携 带 表 达 载 体 PCAMBIA1301-Sag12-IPT-Nos. 四、 剂及其配制: LB 培养基的配制: 将下列组分溶解在 0.9L 蒸馏水中: 蛋白胨 10g 酵母提取物 5g 氯化钠 10g 如果需要用 1N NaOH(10~15ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L 10ml 的 10mmol/l 的 AS(乙酰丁香酮)母液(100x)配制:称 19.6mg 的 AS, 先溶于少量甲醇中,然后慢慢加蒸馏水定容至 10ml,过滤除菌,分装成 200ul/ 管(每组 1 管),使用时将 200ul 的 AS 母液加入 20ml 的 MS 液体培养基中