实验一 a酵母菌的形态观察 一 教学要求 学习并掌握形态观察及死活细胞的鉴别方法。 二 实验原理 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比 细菌大几十倍甚至十几倍。大多数以出芽方式进行无性 繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢 子。本实验是通过美蓝染液水浸片和水—碘液水浸片来 观察酵母的形态和出芽生殖方式
实验一 a酵母菌的形态观察 一 教学要求 学习并掌握形态观察及死活细胞的鉴别方法。 二 实验原理 酵母菌是不运动的单细胞真核微生物，其大小通常比 细菌大几十倍甚至十几倍。大多数以出芽方式进行无性 繁殖，有的分裂繁殖；有性繁殖是通过接合产生子囊孢 子。本实验是通过美蓝染液水浸片和水—碘液水浸片来 观察酵母的形态和出芽生殖方式
美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，还 原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由 于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能 力，使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因 此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细 胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色，借此即可 对酵母菌的死活细胞进行鉴别
美蓝是一种无毒的染料，它的氧化型呈蓝色，还 原型无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时，由 于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能 力，使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。因 此，具有还原能力的酵母活细胞是无色的，而死细 胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色，借此即可 对酵母菌的死活细胞进行鉴别
Scanning electron micrograph of the common baker's and brewer's yeast Saccharomyces cerevisiae. Note the budding division and previous bud scars
Scanning electron micrograph of the common baker's and brewer's yeast Saccharomyces cerevisiae. Note the budding division and previous bud scars
三 材料与器材 ⚫ 菌种：斯达油脂酵母（Lipomyces starkeyi） 2. 1390. ⚫ 培养基和试剂：麦芽汗琼脂培养基， 0.05％ 和0.1 吕氏碱性美蓝染色液，革兰 氏染色用碘液. ⚫ 显微镜，玻片等
三 材料与器材 ⚫ 菌种：斯达油脂酵母（Lipomyces starkeyi） 2. 1390. ⚫ 培养基和试剂：麦芽汗琼脂培养基， 0.05％ 和0.1 吕氏碱性美蓝染色液，革兰 氏染色用碘液. ⚫ 显微镜，玻片等
四 操作步骤 1、菌种活化 将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上，25~28℃培养 48 h左右备用。 2、美蓝镜片的观察 1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色掖，然 后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混 合均匀。 2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢 慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。 3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍 镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细 胞。 4）染色约0.5h后再次进行观察，注意死活细胞数量是否 增加
四 操作步骤 1、菌种活化 将酵母移种至新鲜的麦芽汁琼脂斜面上，25~28℃培养 48 h左右备用。 2、美蓝镜片的观察 1）在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色掖，然 后按无菌操作用接种环挑取少量酵母菌苔放在染液中，混 合均匀。 2）用镊子取一块盖玻片，先将一边与菌液接触，然后慢 慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。 3）将制片放置约3min后镜检，先用低倍镜然后用高倍 镜观察酵母的形态和出芽情况，并根据颜色来区别死活细 胞。 4）染色约0.5h后再次进行观察，注意死活细胞数量是否 增加
5）用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操作。 3、水一碘液镜片的观察 在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液，然后在其 上加3小滴水，取少许酵母菌苔放在水一碘液中混 匀，盖上盖玻片后镜检。 五 注意事项 1、加染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时， 菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。 2、盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察
5）用0.05%吕氏碱性美蓝染液重复上述操作。 3、水一碘液镜片的观察 在载玻片中央加一小滴革兰氏染色用碘液，然后在其 上加3小滴水，取少许酵母菌苔放在水一碘液中混 匀，盖上盖玻片后镜检。 五 注意事项 1、加染液不宜过多或过少，否则，在盖上盖玻片时， 菌液会溢出或出现大量气泡而影响观察。 2、盖玻片不宜平着放下，以免产生气泡影响观察
六 思考题 1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同， 对酵母菌死细胞数量有何影响？试分析其原因。 2、在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别 于一般细菌？
六 思考题 1、吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同， 对酵母菌死细胞数量有何影响？试分析其原因。 2、在显微镜下，酵母菌有哪些突出的特征区别 于一般细菌？
实验一 b 酵母菌子囊孢子的观察 一 教学要求 学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法。 二、基本原理 子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的 有性孢子。在酵母菌中，能否形成子囊孢子及 其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。酵 母菌形成子囊孢子需要一定的条件，所以对不 同种属的酵母要选择适合形成子囊孢子的培养 基
实验一 b 酵母菌子囊孢子的观察 一 教学要求 学习并掌握酵母菌子囊孢子的观察方法。 二、基本原理 子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的 有性孢子。在酵母菌中，能否形成子囊孢子及 其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。酵 母菌形成子囊孢子需要一定的条件，所以对不 同种属的酵母要选择适合形成子囊孢子的培养 基
Sexual spores ⚫ Ascospore – Formed in a sac (ascus)
Sexual spores ⚫ Ascospore – Formed in a sac (ascus)
三 材料与器材 ⚫ 菌种：同前. ⚫ 试剂：5％孔雀绿水溶液，0.5％番红水溶 液，95％乙醇. ⚫ 显微镜，玻片等
三 材料与器材 ⚫ 菌种：同前. ⚫ 试剂：5％孔雀绿水溶液，0.5％番红水溶 液，95％乙醇. ⚫ 显微镜，玻片等