网泰山医学院 省级精整鞋程申报 生药学实验方法与技术 生药学是一门专门研究商品生药的科学,也是一门综合性的应用学科。最初,生药学的主 要任务是甄别商品生药的真伪优劣,随着社会的发展和科学技术的不断进步,赋予生药学的内 容和任务不断翻新和增加。现在,随着全球性的推崇天然物质的热潮的迭起,天然药物的开发 应用,无论是何种形式的都是以生药学为基础的。作为药学专业的学习,如果不掌握这门学科 的基础知识和基本技能,要开展相关的工作是比较困难的,因此很有必要使药学生在掌握本学 科的基本理论知识的同时还要掌握一些支撑这些基本理论知识的技能,这样,才能使我们所掌 握的生药学知识比较全血面,工作起来才能够胜任基本的要求。 一、药用植物学部分 1,标本的采集:为什么要进行标本采集?这是植物学或药用植物学工作者在从事科研、教学 等工作时必须要进行的野外调查工作的重要内容之一。采集标本,首先是专业工作人员对自然 资源进行的一项调查工作,做到心中有数,另外,标本也是自然资源的重要凭证,也是今后进 行研究时作为重要的资料之一。因此,各地专业单位都建立有标本馆室供人们研究之用。各单 位也可在馆际之间进行标本的交流,甚至可以和国外进行标本的交流。之前首先要进行选点、 选路线、并做好野外工作的一切准备。然后进行实地调查、采集、并做好野外工作记录、还要 注重环境与资源保护等。如何真正做好这项工作?也不是一件简单的事情,要充分考虑到各方 面的情况,做好足够的准备,如:调查采集的内容、掌握有关的信息资料、工作方面的准备、 生活方面的准备、出行的时节(时间、季节等)、出行的路线、乘车的考虑、经费的问题等等 都要考虑的十分具体细致并十分可行。 工作中首先要求采集者在采集时充分考虑到下一步制做标本的具体要求,再下手进行采集, 特别要针对当前实物的具体情况选留标本的大小,如木本植物类,由于体积比较大,在下手剪 下标本时,既要考虑到剪哪一支的问题还要考虑到将来台纸的大小的问题:草本类植物也有大 小的问题,特别是体积比较大时,不同部位有时还要分别压制,如果能在一起压制,还要注意 尽量减少分枝、叶子、花序等部位的重叠:压制时要将标本修剪(较小的标本不需要)到理想 的状态,平铺于干燥的草纸上,摆放自然得体,叶子要翻过米一两片压上:较大的地下部分要 及时切开压上:糖分多或多汁的标本要先用开水烫一下再压制:容易脱落的植物器官要及时收 集等:及时做好工作记录,按照记录本的格式要求一一记录(内容尽量详细、野外观察要仔细、 调查要充分周到):及时挂好号牌,并要规范书写,切忌敷衍了事或偷懒误事。 2标本的制做:标本的制做是专业工作人员、管理人员必须要学握的一项技术,这是一项
@泰山医学院 dical Universit 省级精美程申报 长期的、连续不断的工作,也是一项技术性很强的技术工作,要求制作者要具备专业理论和专 业素质,还要有很好的敏业精神、吃苦耐劳的精神及奉献精神。在进行这项工作时,一般有标 本的选择整形、压制、号牌的书写、消毒、装订等工作程序,这个过程中间包含着许多专业的 知识、美学的知识等 将选择好的标本平铺于台纸上,再根据标本的大小摆放在合适的位置上(特别要注意在台 纸的左上角留出付签的位置,在右下角留出鉴定签的位置),然后用手术刀片在标本的适当位置 上切开切口,然后将准备好的白纸条(宽约3一4m)两端顺缝插下,待标本的所有位置的纸 条插完后,翻过来一一拉紧并用胶水粘紧即得(也可用细白线固定)。总的原则是装订出来的标 本既要有科学价值,也要得体美观。 3标本的鉴定:①鉴定签及副签的书写。鉴定签是标本的名片,它是标本的重要文字资料, 具有十分重要的应用价值,因此要求鉴定者具有十分坚实的专业知识,还要十分重视这项工作, 切忌盲目从事。鉴定签的书写要十分流利规范,不要涂改,不要撕去前人的签子,以视尊重。 鉴定签的内容通常有采集号、学名、鉴定者、鉴定日期等:副签的内容通常和野外记录本的 内容格式相同,仅尺寸小一些。其格式如下: 幸鉴定签格式: 采集号: 鉴定人: 鉴定日期 幸号牌格式: 。采集人: 采集号: 采集地: 采集日期: 幸副签及采集记录本格式: 采集人: 采集号: 采集地: 采集日期: 海拔: 生境: 习性 高度
@泰山医学院 省级精整鞋程申报 根: 茎 叶: 衣 果实 种子: 地方名: 药名: 植物名: 科属名: 拉丁学名: 用逸: 备注: ②标本的鉴定:这是一项艰苦细致科学性极强的工作,鉴定者首先要具备扎实的植物分类学 和植物形态学知识,并要具备雄厚的专业工作经验。工作中要克服浮躁和急于求成的心理以 及懒惰思想,科学认真地观察标本、认真细致地研究标本,还要充分地利用好资料,才有可 能做好它 二.生药鉴定部分 1生药的性状鉴定技术:就是通常利用人的感官通过看、摸、闻(嗅)、尝、水试、火试等 方法对生药的性状即大小、形状、粗细、表面特征、断面、质地、气、味等进行观察鉴定,以 达到确定其真伪优劣的目的。性状鉴定又称为经验鉴定,顾名思义,就是经验积崇的东西是十 分重要的,这种积累不是一朝一夕就能实现的,它是一个十分漫长的过程,这中间需要首先建 立浓厚的专业兴趣,刻苫努力、勤学好问、主动钻研,还要不断吸收相关学科的基础理论知识, 只有这样,才有可能做好这项工作。但也不能气馁,要有信心和决心,只要坚定不移地做下去 是一定会成功的。看:就是用眼睛看药材的大小、长短、粗细、形状、颜色、表面特征、断面 特征等。例如:甘草为“细长圆柱形,长30一120厘米,直径0.6一3厘米。外皮红棕色、暗棕 色或灰褐色,有明显的皱纹、沟纹等纹理,皮孔横长,断面纤维性,黄白色,有明显的环纹及 放射状纹理,有裂隙:根茎表面有节和节间,节上有芽痕,横断面中央有髓等,都是“看的内 容:“质坚实而重”,是“摸”的内容:气微是“闻”的内容;味甜而特殊”是“尝”的内容等。又如: 熊胆的水试法是,胆仁少许于水杯中,即在水面上转旋下沉扯黄线,到达杯底而不扩散者为真。 沉香燃烧时发浓烟及强烈香气,并有黑色油状物渗出者为真。 2.生药的显微鉴定技术:
@泰山医学院 省级精藁程申报 (一)制片方法:首先要根据显微观察的不同目的制作不同的制片,例如要: ①观察组织构造:通常使用的切片方法有: 徒手切片法:通常将选择好的材料两端切齐,以左手持材料,右手持刀片,从左前向右后水平 切割材料(切片时随时以水湿润刀口),将切片以毛笔扫入盛水的平皿中,然后从切片中挑选 较好者制片,以备显微观察。此法适合较幼嫩的地下器官、嫩茎、较粗的叶柄、较幼嫩的果实 种子等器官。也可用两片双面刀片并齐,在桌面上或硬的支撑物上下切,可获得薄厚理想的切 片(适合薄的材料,如叶片、花的各部等)。 滑走切片法:利用滑走切片机代替徒手切片的一种方法。适合较坚硬、较粗大的材料。通常将 选择好的材料固定于切片机上,调整好厚薄(0一50微米)就可以切片。同样将切片置于水中 挑选较薄的进行制片观察。 石蜡制片法(方法见附页): ②观察表面特征:有些幼嫩的器官其表面具有丰富的显微特征,由于横切片角度的关系,其表 面的特征观察不全血,因此,可以通过表血片进行观察,效果就比较理想。表面片的制法:将 选择好的材料平铺于桌面上,以尖镊子撕取表皮,将撕下的组织置于滴上水的载物片上封片观 察。也可将毛茸以刀片刮下直接装片观察。通常适合于幼嫩的果实、种子、茎、叶、花冠、花 尊等器官或部位。 ③组织解离法:为了观察植物组织中单个细胞的特征,通常使用组织解离(或叫细胞离体)法 进行处理,就可以达到目的。通常使用的方法有: 氢氧化钾(钠)法:材料(柔软)+5%KOH或NaOH一(水浴加热)轻压即散一封片。 硝铬酸法(常用):10%硝酸+10%铬酸等量混合→材料(浸泡)1-2天或更长。 浓硝酸氯酸钾法(较使的材料):材料+硝酸→沸水加热1mi→加氯酸钾一加热→材料成粉状一 冲洗一→制片一→观察。 ④粉末观察法:.水装片:观絮淀粉粒,油滴,油细胞等:b甘油装片:观察糊粉粒(可加稀碘 液使成黄棕色或棕色,如硝酸汞试液显砖红色)。C水合氯醛装片:方法:粉末+试剂→加热搅 动使颜色变浅一加甘油封藏观察。(不要加热迅速观察菊糖结晶。) (二)显微测量方法:为了客观描述显微特征的性状(长短、直径、厚薄等)须通过显微测量 的方法才能实现。 1.测微尺的介绍:①目镜量尺:是一直径约为2cm的圆形玻片,中央有一精细刻度尺,共有 100小格,总长1mm,是进行显微测量的重要标尺,但不能直接测量,(因为在标化前,每小格 微米数不定),使用前要用载台量尺(台尺)进行标化(校正),计算出目镜每一小格的微米数 然后才能测量
网泰山医学院 省级清款黄银申报 ②载台量尺(台尺):为一载玻片大小的长条形玻片,中央有一小圆形玻片,其下有一精细的刻 度尺(长为1毫米),等分为100小格,每格长为0.01毫米或10微米,共长1000微米。该尺 不能直接用来进行显微测量,仅用作标化目尺。 2.目尺的标化:通常选用单筒(直筒)、使用状况良好的显微镜,取下接目镜,旋开镜头,装 入目镜测微尺,镜台上安装载台量尺,先用低倍镜调焦,待视野中同时出现台尺的标尺和目尺 的标尺时,开始寻找两尺的最佳重合起始线(一定要完全重合),然后再寻找出远端的重合线(相 对较远者为好),精确计数两尺的刻度数,即目尺的多少小格与台尺的多少小格相当,然后以台 尺的格数乘以每小格的微米数,即得重合格数的微米数,再用重合格数的微米数除以目尺的重 合格数,即得目尺(低倍镜下)每小格的实际长度(微米数)。其它倍数的接目镜、接物镜在使 用中若需变换,则事先同样先标化,标化值须记录清楚。 3.显微测量:在进行实物测量时,取下载台量尺,换上标本制片,只需测其小格数,并做好记 录,然后乘以标化值,即为该物实际大小。示例:如何标化: 接目镜10倍,接物镜40倍。测得目尺的40小格与台尺的15小格相当(完全重合),则:10 微米×15小格(台尺)40小格(日尺)=3.75微米。 (三)叶显微常数及其测量: 1.气孔数(Stomatal Number):指每mm表皮上的气孔数。测量时,先用描绘器在白纸上画 下1mm的方框,将透化好的下表皮装片一定部位与方框重合,计算该框内气孔个数(用×表示), 一般连续测量10一30个单元,求其平均值。通常分别测上下表皮气孔数的比值有鉴别意义。 2.气孔指数(Stomatal Index):指单位面积(一个视野)表皮内气孔数与表皮细胞数(含气 孔数)的比值, 利用网格测微尺或计算一个视野里表皮细胞数和气孔数,带入下列公式计算: I=SS+E×100 =气孔指数S=每单位面积内气孔数E=每单位面积内表皮细胞数 例:颠茄叶气孔指数的计算:目镜15×,物镜40×。连续测得4个视野,其气孔数与表皮细 胞数如下:视野a.4个、8个,视野b.5个、9个,视野c.4个、11个,视野d.3个、9个。计 算:1-4/4+9.25×100=303 3.脉岛束(Vein islet)和脉岛数(Nein-islet Number):指叶脉末端游离的叶肉组织小块,叫脉 岛束(脉岛)。每mm面积内脉岛的数目叫脉岛数。 取叶中部(含主脉)叶片,透化或整体装片(以绿化碱漂白)。在准各好的白纸上画出显微 量尺4mm'(2×2mm'或1×4mmr)方框,用描绘器反射到显微镜下与叶片重合,计算在方框内的脉 岛数。(凡位于方框四周被边线切割成不完全的脉岛,只计算两个边的数目,另两边的不计。连
@泰山医学院 省级精美程申报 续测10一20个方框,取其平均值)。注:此值不随叶的大小或植物的年龄而变化。 例:狭叶洋地黄叶的脉岛数测定:目镜:15×物镜10×。测得视野a=2、 b=1、c=4、d=2 脉岛数平均为2.25 例:曼陀罗叶的脉岛数的测定:测得视野a=8、b=13、c=11、d=10脉岛数平均为10,75 4.栅表比(Palisade Radio:)指一个表皮细胞下所覆盖的栅栏细胞的平均值 方法:取2mm叶片或叶粉末透化装片,在高倍镜下先绘4个相连续的表皮细胞轮廓,然后 调焦,显出该4个细胞下的栅栏细胞,并计数(4舍5入),以总数除以4,即得每个表皮细胞 下的杆栏细胞数,一般从叶的3个不同部位取材,每块材料测4一10次,最后求其平均值。注: 栅栏细胞不完全覆盖者,大半者以完整者计算,一半者两个算一个,少半者不算。例:狭叶洋 地黄叶的栅表比:视野a=3(表皮细胞1、栅栏细胞3)、b-3、c=3、d=2平均为2.75。 三.显微绘图技术:显微绘图是为了客观反映显微特征的基本技能之一,是文字描述的客观补 充和反映,好的绘图可以起到显微特征描述时画龙点睛的补充作用,同时给人以直观醒目的视 觉效果,对于客观准确理解显微特征有者直接的重要作用。显微绘图在生药学研究中有着重要 的作用和特殊的意义。 1,组织图的绘制:即对植物组织切片通过显微描绘器或显微投毙仪或自制显微投毙装置等使之 成像,然后以铅笔描出细胞、组织或其它显微特征的轮廓,再离开描绘工作状态,客观细致地 修改、定稿,然后覆以硫酸纸,以碳素墨水蘸笔复制,并进行标注,即为显微组织构造详图(前 者)或简图(后者)。 详图:客观准确地反映细胞形态、组织结构及后含物等显微特征的图叫详图 简图:用简单的线条表示组织构造轮廓和用规定的符合表示不同组织构造或特征的图叫简 图。 2粉末图的绘制:通过显微描绘器或特殊装置,先用铅笔绘出粉末特征(同时进行显微测量), 然后脱离工作状态,用橡皮轻擦特征图(切不可擦净,要保留原图的痕迹),用修好的铅笔进行 修改,并进行选择、剪贴、排版,然后覆以硫酸纸,用碳素墨水蘸笔复制并标注,即成粉末显 微特征墨线图。注:复制时,运笔最好一气哈成,线条要自然流畅,切忌涂檫、污损:粉末图 只有详图,无所谓简图。 四。生药的理化鉴定技术:可分为定性分析和定量分析两类。定性分析以确定生药的真实性, 定量分析以确定生药的品质优良度。随着生药有效成分研究的不断深入和现代仪器分析技术的 应用,生药鉴定从宏观一微观的形态学鉴定不断向有效成分和药效鉴定方向发展,直至目前普 遍应用的指纹技术等,理化鉴定的方法和手段也在不断地更新和发展。本节内容只介绍常用的 几种定性方法
网泰山医学院 省级清款黄程申报 (一)显微化学鉴别法:是极其灵敏的定性化学鉴定方法,由于该法使用了显微镜,故能观察 到肉眼不易观察到的反应,能够准确地检查出显微制片中一系列不同的物质,这是一般化学鉴 定方法所不能做到的。生药的显微化学鉴别法即是利用显微化学的方法来确定细胞壁及其内含 物的化学性质或分辩组织结构,从而达到鉴别的目的。 1.药材切片或粉末试验法:检品(于载物片上)十试剂一镜检,产生的结品或沉淀及特殊的 颜色反应,若为组织切片,还可以观察反应的部位,以判断参加反应的成分在组织中的分布。 供试切片一般用徒手切片(厚20一40微米之间):干药材在切片前须经软化处理,但要注意 勿使所受检查的成分受影响。注:检查菊糖、粘液质等时不能用水处理,检查挥发油时不能用 高度醇或蒸煮法,检查钟乳体时不能用醋酸处理等 (1)切片: ①绵马贯众切片+1%香草醛醇溶液浓硫酸一(镜检)细胞间显红色(绵马酸及黄绵马酸类) ②香加皮十冰醋酸硫酸→(镜检)皮层及射线细胞显黄色,在紫外灯下显黄绿色荧光(4一甲 氧基水氧醛), ③穿山龙十冰醋酸硫酸一(镜检)木栓层及中柱外侧组织呈紫红色(穿山龙皂式的反应) ④穿心莲叶+3.5一二硝基苯甲酸(1克3.5一二硝基苯甲酸溶于50ml甲醇中,再加入2N氢氧 化钾溶液50ml用时新配)3一4滴一(镜检)叶肉显红或紫红色(五元不饱和内酯环的反应)。 ⑤浙贝母十碘试液一表皮一圈仍为白色,其余显蓝紫色(检查淀粉)。 ⑥苫参十氢氧化钠试液→(镜检)栓皮显橙红色,渐为血红色,久置不消失木部不现色(色素)。 ⑦胡+无水乙醇:浓硫酸溶液1滴→(镜检)可见木栓、栓内侧、皮层显黄绿色或蓝绿色(皂 武的定位反应) (2粉末: ①肉桂用氯仿浸渍一→浸液十2%盐酸苯肼一(镜检)黄色针状、杆状结晶(桂皮醛) ②黄连用乙醇浸渍一十30%硝酸或盐酸→(镜检)黄色针簇状结晶(检查小檗碱) ③胡椒粉末用乙醇浸渍,浸液稍干后加水封藏一(镜检)可见盖玻片边缘处产生针状结晶(胡 椒碱)。 ④甘草粉末十80%的硫酸(于白磁板上)一显橙黄色(甘草甜素的反应)。 ⑤槟榔粉末+稀硫酸1滴,再加水3一4ml一→微热几分钟,取滤液于载物片上十碘化钯钾试液 一(镜检)混浊。放置片刻,可见石榴红色球形或方形结品(槟榔碱的反应)。 2.浸出液试验法(显微结晶法):用药材粗粉十适量试剂浸渍,吸取浸液于载物片上,加试剂 后封藏、镜检,产生不同形态及颜色的结品。 ①丁香十氯仿浸渍一→浸液于载物片上十3%氢氧化钠的氯化钠饱和溶液一(镜检)簇状细
@泰山医学院 省级精整藻程申报 针形结晶(丁香酚)。 ②天仙子十乙醚及氨试液浸渍一→浸液于载物片上十碘化铋钾试液一(镜检)显黄紫色飞鸟状 结品(莨菪碱结品)。 ③黄藤+乙醇浸渍→浸液于载物片上+30%的硝酸或盐酸一(镜检)可见黄色断棒状结晶(小 檗碱)。 (二)微量升华法:生药中某些成分在一定温度下可以升华,镜检升华结晶及其形态鉴别生药。 必要时用熔点测定仪测其熔点或用化学反应法进一步确定其成分种类。在升华器中加入少许 的生药粉末,勿要超出升华器的面,上面放一干净的载物片,下面以酒精灯加热,待玻片下 凝结有升华物时,停止加热,取下玻片反过来放置,待放凉后在置于显微镜下直接观察。若 无升华器时,可用两张载物片中间以两根火柴棒隔开,期间放少许粉末,也可获得同样的效 果。 ①大黄(升华)一可见黄色梭针状、羽毛状结晶。若加氢氧化钠试液,结晶消失并显红色 (蒽配类化合物)。 ②胡黄连(升华)→针状、针簇状、棒状、板状结晶或球状结晶品(香荚酸及桂皮酸) ③徐长卿(升华)→柱状、针状、羽毛状结晶。若加三氯化铁溶液,结晶消失并呈暗紫色 (牡丹酚)。 ④麻黄(升华)一微细针状或颗粒状无色晶体(麻黄碱)。 ⑤鹿衔草(升华)→无色羽毛状结晶。若加三氯化铁溶液,则显示紫色(对苯二酚)。 ⑥斑蝥(升华)→白色柱状、棱状结晶。若加碱液,则结晶消失,若再加盐酸,结晶复出 (斑蝥素) ⑦龙脑冰片(升华)一棒状或多角形结晶(右旋龙脑)。 ⑧补骨脂(升华)→针状、簇针状结晶(香豆精类)。 (三)细胞壁及细胞内含物的显微化学反应: (I)植物细胞壁的检查:植物细胞壁的主要组成是纤维素,它形成了细胞壁的基本框架。由于 环境的影响基细胞生理机能的不同,在框架内常有其他物质的填充,从而使细胞壁常发生各种 不同的特化:木质化(填充了木质素一丙酸苯脂类的一种聚合物,可使细胞壁坚硬牢固,增 强植物支持能力)、木栓化(填充了木栓质一高分子脂肪酸的聚合物,可使细胞的透气透水性 降低,起到了保护植物细胞的作用)、角质化(同上)入、粘液化(细胞壁中的纤维素等成分发生 变化而成为粘液,通常为固态,吸水膨胀后成粘滞状态,多存在于植物种子表皮细胞上,在种 子萌发时可吸水、储水,以利萌发。)入硅质化(沉积了硅质 一二氧化硅。可使细胞壁坚硬, 以增强支持和抗压力的作用。通常这种细胞外壁较粗糙)、几丁质化(填充了几丁质—阝一1:4
网泰山医学院 省级清款黄银申报 乙酰胶基葡萄糖型直链多糖。多行在于低等植物细胞壁中)等。 ①纤维素细胞壁:为植物细胞壁的基本组成成分。通常和半纤维素同时存在,纤维素为一种 化学性质比较稳定、能耐酸碱及其它多种溶剂的多糖类物质,其结构全由单糖组成(由链状的 葡萄糖基(CH1O5)通过氧原子的相互结合而成)。结构上似直链淀粉,但纤维素的单糖单位 为B-葡萄糖,且分子量(为250,000-1,000,000,其结构由300一15,000个葡萄糖分子 组成)较淀粉(10,000一50,000或50,000-100,000。结构中有数 百一3下葡萄糖。构成淀粉的单糖单位为α一葡萄糖)大。半纤维素分子结构中除单糖之外, 还有糖醛酸参与构成,故称为酸性多糖。构成细胞壁纤维素是一些长短不一的链状纤维素分子, 这些分子有规则地平行排列并聚集在一起,称微团,再由微团组成丝状的微团系统,此称为微 纤丝(可以在电镜中看到),微纤丝又聚成较粗的纤丝,称大纤丝,大纤丝在光镜中可以看到。 由于纤维素分子有规则的排成晶格状,使纤维素细胞壁具有类似晶体的性质。纤维素细胞壁的 显微化学反应: 日,铜氨溶液反应:于实验材料中加入新配置的钢氨溶液,纤维素细胞壁渐膨胀而溶解(纤 维素在一般溶液中不溶)。 b.碘一硫酸反应:于材料中加1滴1%的碘液,再加1滴66.5%的硫酸,纤维素细胞壁呈 蓝色反应(纤维素成分越多,反应则越明显)。 c,氯化锌碘反应:于材料中加1滴氯化锌碘试液,纤维素细胞壁被染成紫色(栓化或木化 细胞壁被染成棕色或黄色)。此反应最常用,较上述反应更有效。 ②木质化细胞壁的显微化学反应: a,硫酸苯氨反应:于材料中加硫酸苯氨试液1滴,木质化细胞壁被染成鲜艳的姜黄色。为避免 细胞中草酸钙结晶被溶解,可改用醋酸苯氨试液,亦显黄色。 b.间苯三酚反应:于材料中加入间苯三酚试液1一2滴使材料湿润,稍放置或微热后加浓盐酸】 滴,木质化细胞壁被染成红色或紫红色(有时仅用盐酸就能成红色,说明细胞壁本身含有间苯 三酚物质)。注:颜色的深浅,表示木质化程度的高低。 c.高锰酸盐反应:切片于1%的高锰酸盐小杯中放置5分钟→被染成棕色(氧化)。切片换水洗 涤后移至稀盐酸中(切片完全退色为止)一清水洗切片后,移于载物片上十1滴氨液一显红色 (木质化细胞壁的反应)。注:双子叶植物十分明显,裸子植物不反应,单子叶植物为黑褐色, 为不完全反应。 ③木栓化和角质化细胞壁的显微化学反应: 日,氯化锌碘反应:(见“纤维素细胞壁"的反应)被染成黄色或棕色 b.苏丹Ⅲ染色:切片十苏丹Ⅲ试液,稍热一→显桔红色、红色或紫红色。若再加入20%的氢氧化
@泰山医学院 省级精美程申报 钠试液,则呈黄色一→继续加热,木栓质溶解呈黄色滴状、角质化细胞壁不变形 ④粘液质细胞壁的显微化学反应:材料十玫红酸钠醇溶液→细胞壁显玫瑰红色。 材料+钉红 试液一红色。 ⑤硅质化(矿质化)细胞壁的显微化学反应:材料+硫酸或醋酸或硝酸一均不溶。若加氢氟酸 一→硅质化细胞壁溶解。 ⑥几丁质细胞壁的显微化学反应:此种物质填充的细胞壁常被误作纤维素细胞壁,但其折光性 强,也不与氯化锌碘反应。 切片+50%碱液,于160一170℃条件下加热1小时→儿丁质分解(分解产物可溶于3%的 醋酸溶液中)。 (2)细胞内含物的检查:细胞内含物是指细胞中经过代谢活动以后的产物,有的是废物,有的则 可能成为被再利用的储藏物质,它们大致可分为多糖类(淀粉、菊糖、粘液质等)、蛋白质、脂 类、挥发油、鞣质和结晶(草酸钙、碳酸钙、硅质等)几大类。 ①淀粉与淀粉粒:淀粉是一类多糖类物质,其分子量为:直链结构者10,000一50,000,交 链结构者50,000一100,000。淀粉粒是淀粉的一种储藏形式,为植物所特有。通常为细小颗 粒状,为植物性生药常有的显微性状特征,其形态各种各样,故可作为生药的显微鉴别依据。 其中心通常有一至多个核心,为淀粉在白色体中最早有集的部位,也称为脐点。围绕脐点,常 有无数的层纹。根据脐点的多少于层纹和脐点排列方式的不同,将淀粉粒分为三种类型,即单 粒、复粒和半复粒。一般来说,具体的植物性生药,通常含有特定形态的淀粉粒,这个特性比 较稳定,因此,可以用淀粉粒的不用形态来鉴别生药。化学的方法是:淀粉(或含淀粉的生药) 十12一蓝色(糖淀粉或直链淀粉)或紫或红紫色(胶淀粉或支链淀粉)一→加热时颜色消失→冷 却时颜色复出。 ②菊糖(菊淀粉):是植物代替淀粉而存在的一种储藏物质,越由30个B一1.2呋喃果糖组成。 广布于桔梗科、菊科等植物中。通常含菊糖的植物不含或少含淀粉粒。菊糖在植物生活状态下为 溶液,但用高度醇固定脱水后,即形成圆球装、半圆装或扇状,还可见放射纹和同心性环纹的结 晶体。常用的鉴定方法如下:生药切片或粉末十10%α一萘酚醇溶液1滴和浓硫酸2一3滴一菊糖 被染成红色(并迅速崩解)。 生药切片或粉末十15%一20%麝香草酚醇溶液1滴和浓硫酸2一3滴一→洋红色(并迅速崩解) 注:以上试验须防止水分的参与。 ③粘液:是多种多糖类物质的混和物,能遇水膨胀而成粘稠的液体。在植物界广泛分布,但在 兰科植物中含量较多。粘液可以存在于细胞液中,也可存在于细胞壁中,有时集中存在于粘液 细胞中或粘液腔(或粘液管)中