第二章第二节 中医实验研究的思路
第二章 第二节 中医实验研究的思路
中医实验研究的目的与意义 首先,第一自然段,讲定义,讲目的。 介绍了为什么中医要引入实验方法(弥补临床观察、 直觉领悟之不足等等)。 “基础研究优点: 1)通常可以提示什么可能发生; 2)从可控的实验室情境中得出的结果往往比现实生活 中的更有说服力。” (B.H.坎特威茨等.实验心理学,25)
一、中医实验研究的目的与意义 首先，第一自然段，讲定义，讲目的。 介绍了为什么中医要引入实验方法（弥补临床观察、 直觉领悟之不足等等）。 “基础研究优点： 1）通常可以提示什么可能发生； 2）从可控的实验室情境中得出的结果往往比现实生活 中的更有说服力。” （B.H.坎特威茨等. 实验心理学, 25）
背景 中医药对疾病治疗的疗效,需要比较、评价、发展、 提高。如何实现?动物实验是主要手段之 中医临床特点是辨证论治。“同病异治”、异病同治”。 自然地要求实验动物,以及动物实验中开展辨证论治 问题是动物如何辨证论治,首先是动物有没有证候,如 何采集其证候。 诚如教材撰写所言,在撰写该教材的时候 (1998-199),中医学术界尚不能对小鼠等实验动物, 开展辨证论治
背景 中医药对疾病治疗的疗效，需要比较、评价、发展、 提高。如何实现？动物实验是主要手段之一。 中医临床特点是辨证论治。“同病异治”、“异病同治”。 自然地要求实验动物，以及动物实验中开展辨证论治。 问题是动物如何辨证论治，首先是动物有没有证候，如 何采集其证候。 诚如教材撰写所言，在撰写该教材的时候 （1998-1999），中医学术界尚不能对小鼠等实验动物， 开展辨证论治
当时对疾病动物证候的判断,主要采取三种方式: 1)以方测证。 2)微观辨证(即引用临床或实验发现的与证候有关 的实验室检测指标)。 3)疾病、证候叠加造模。 在取得积极进展的同时,其局限性妨碍了其推广与 应用。 通过我们多年的探索,小鼠参见虚证的四诊和辨证 方法基本建立。我们以后会介绍
当时对疾病动物证候的判断，主要采取三种方式： 1）以方测证。 2）微观辨证（即引用临床或实验发现的与证候有关 的实验室检测指标）。 3）疾病、证候叠加造模。 在取得积极进展的同时，其局限性妨碍了其推广与 应用。 通过我们多年的探索，小鼠参见虚证的四诊和辨证 方法基本建立。我们以后会介绍
假说 1.荷瘤(疾病)小鼠是存在证候,以及证候演变的。 2.采用我们建立起来的小鼠四诊&辨证方法,是可 以采集并刻画荷瘤小鼠证候的 3.早期荷瘤小鼠的证候是可以预测其预后的。 4.不同中药处方对荷瘤小鼠的作用可能存在差异
假说 1．荷瘤（疾病）小鼠是存在证候，以及证候演变的。 2．采用我们建立起来的小鼠四诊＆辨证方法，是可 以采集并刻画荷瘤小鼠证候的。 3．早期荷瘤小鼠的证候是可以预测其预后的。 4．不同中药处方对荷瘤小鼠的作用可能存在差异
材料和方法 1.实验动物与造模 KM品系小鼠,雄性,120只,17-24g,清洁级条件 下常规饲养。随机取10只作为正常对照,其余腹水传代 肝癌H22细胞右腋下接种0.2ml(含瘤细胞数8×10°个)。 2.实验分组及用药 接种后第5天选出瘤体大小适中小鼠90只(其余淘 汰),随机分组分为10组,每组小鼠10只:正常组对照 主(甲)、模型对照组(乙)、不同中药复方组8个,来 自国内公开报道的处方(处方与出处不宜公开),分别标 记为丙、丁、戊、己、庚、辛、壬、癸。并于当天用药。 中药采用标准水煎醇沉工艺,剂量为正常成人每公斤体 重的10倍。每组小鼠每日灌胃0.5m,正常组及模型组 灌等量自来水。常规饲养
材料和方法 1．实验动物与造模 KM 品系小鼠，雄性，120 只，17-24g，清洁级条件 下常规饲养。随机取 10 只作为正常对照，其余腹水传代 肝癌 H22 细胞右腋下接种 0.2ml（含瘤细胞数 8×106个）。 2．实验分组及用药 接种后第 5 天选出瘤体大小适中小鼠 90 只（其余淘 汰），随机分组分为 10 组，每组小鼠 10 只：正常组对照 主（甲）、模型对照组（乙）、不同中药复方组 8 个，来 自国内公开报道的处方（处方与出处不宜公开），分别标 记为丙、丁、戊、己、庚、辛、壬、癸。并于当天用药。 中药采用标准水煎醇沉工艺，剂量为正常成人每公斤体 重的 10 倍。每组小鼠每日灌胃 0.5ml，正常组及模型组 灌等量自来水。常规饲养
3.小鼠四诊检测指标及方法 标准采集: (1)体重 (2)腋温(℃C) (3)爪和尾显微数码拍照(计算机图像处理 ,提取反映红色程度的r值) (4)晚间35s旷场自主活动计数(跨格数的水 平移动、前肢离地数的垂直移动) (5)瘤体积(cm,计算公式:abb/2,a代表 肿瘤的长径,b代表肿瘤的短径) (6)估算瘤重(g,瘤重=瘤体积) (7)生存时间
3．小鼠四诊检测指标及方法 标准采集： （1）体重 （2）腋温（℃） （3）爪和尾显微数码拍照（计算机图像处理 ，提取反映红色程度的r值） （4）晚间35s旷场自主活动计数（跨格数的水 平移动、前肢离地数的垂直移动） （5）瘤体积（cm，计算公式：abb/2，a代表 肿瘤的长径，b代表肿瘤的短径） （6）估算瘤重（g，瘤重=瘤体积） （7）生存时间
结果 不同组别荷瘤小鼠生存情况 120% 100% 80% 只匙最关关兴 60% 乙丙丁戊己庚 40% XAA(D 20% 辛壬癸 接种后天数 图2所有荷瘤小鼠生存情况
结果 1．不同组别荷瘤小鼠生存情况 0% 20% 40% 60% 80% 100% 120% 1d 7d 13d 19d 25d 31d 接种后天数 生存率 乙 丙 丁 戊 己 庚 辛 壬 癸 图2 所有荷瘤小鼠生存情况
2.荷瘤小鼠不同阶段四诊的演变 (1)总体上,荷瘤小鼠肿瘤体积呈持续增长; 去瘤体重呈抛物线状,中晚期增长平缓)。 53 0-正常体重 一瘤体积 荷瘤体重 去瘤体重 7d 14d 18d 2ld 25d 28d 32d l8d21d25d28d32d 接种后天数 接种后天数 图3所有荷瘤小鼠估算瘤重(g)增长情况图4所有荷瘤小鼠体重(g)增长情况 以上分别反映什么证候?
0 2 4 6 8 10 12 7d 14d 18d 21d 25d 28d 32d 接种后天数 瘤体积（cm 3 ) 瘤体积 28 33 38 43 48 53 58 7d 14d 18d 21d 25d 28d 32d 接种后天数 体重（g） 正常体重 荷瘤体重 去瘤体重 2．荷瘤小鼠不同阶段四诊的演变 （1）总体上，荷瘤小鼠肿瘤体积呈持续增长； 去瘤体重呈抛物线状，中晚期增长平缓）。 图3 所有荷瘤小鼠估算瘤重（g）增长情况 图4 所有荷瘤小鼠体重（g）增长情况 以上分别反映什么证候？
(2)荷瘤小鼠好奇和自主活动持续下降。旷场检 测小鼠水平和垂直运动减少。 (3)荷瘤小鼠腋温持续下降,下降幅度大,严重 时降幅达9%! 38.5 16 0-正常水平 荷瘤水平 常腋温 -正常垂直 荷瘤腋温 一荷瘤垂直 金:a .5 14d18d21d25d28d32d d 2ld 25d 28d 32d 接种后天数 接种后天数 图5所有荷瘤小鼠旷场活动情况 图6所有荷瘤小鼠腋温(℃)改变情况 以上分别反映什么证候?
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 7d 14d 18d 21d 25d 28d 32d 接种后天数 活动度 正常水平 荷瘤水平 正常垂直 荷瘤垂直 33 33.5 34 34.5 35 35.5 36 36.5 37 37.5 38 38.5 7d 14d 18d 21d 25d 28d 32d 接种后天数 腋温（℃） 正常腋温 荷瘤腋温 （2）荷瘤小鼠好奇和自主活动持续下降。旷场检 测小鼠水平和垂直运动减少。 （3）荷瘤小鼠腋温持续下降，下降幅度大，严重 时降幅达9%！ 图5 所有荷瘤小鼠旷场活动情况 图6 所有荷瘤小鼠腋温（℃）改变情况 以上分别反映什么证候？