GD0U-B-11-213 《植物细胞工程》课程教学大纲 课程编号1340064学分35总学时60理论36实验/上机24 英文课程名 plant cell engineering 开课院（系）农学院开课系园林系修订时间006年10月20日 课程简介 课程简介： 《植物细胞工程》是应用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究 改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。 它是一门现代生物科学理论和工程技术相结合的综合性学科。细胞工程学的基本理论基 础是细胞全能性学说，其研究的对象是所有以细胞为基础的生物体，研究目标包括在细 胞、组织和器官水平上对生物进行遗传改良，生长发育调控，或进行特殊产物的生产。 细胞工程是现代生物技术的重要组成部分，同时也是现代生物学研究的重要技术工具。 其研究技术涉及到细胞器、细胞、组织和器官水平利用工程技术原理和手段所进行的各 类体外操作。 课程大纲 一、课程的性质与任务： 《植物细胞工程》是应用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究 改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。 它是一门现代生物科学理论和工程技术相结合的综合性学科。《植物细胞工程》是生物 技术专业植物科学方向学生的专业方向课。细胞工程是现代生物技术的重要组成部分， 同时也是现代生物学研究的重要技术工具。要求学生通过本课程的学习掌握植物组织、 器官及其细胞离体培养的原理与技术，为从事生物学领域的相关研究及其与细胞工程有 关的生物技术产业奠定良好的理论和技术基础， 二、课程的目的与基本要求： 理论知识方面：重点掌握本学科的基本原理和基本技术：细胞全能性学说在细胞工 程中的指导作用；培养条件下的细胞分化和器官发生的调控：离体培养条件下的遗传与 变异特点。掌握不同组织、器官的培养特点和控制方法。了解细胞工程的各类技术在现
1 《植物细胞工程》课程教学大纲 课程编号 1340064 学分 3.5 总学时 60 理论 36 实验/上机 24 英文课程名 plant cell engineering 开课院（系） 农学院 开课系 园林系 修订时间2006 年10月20日 课 程 简 介 课程简介: 《植物细胞工程》是应用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究 改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。 它是一门现代生物科学理论和工程技术相结合的综合性学科。细胞工程学的基本理论基 础是细胞全能性学说，其研究的对象是所有以细胞为基础的生物体，研究目标包括在细 胞、组织和器官水平上对生物进行遗传改良，生长发育调控，或进行特殊产物的生产。 细胞工程是现代生物技术的重要组成部分，同时也是现代生物学研究的重要技术工具。 其研究技术涉及到细胞器、细胞、组织和器官水平利用工程技术原理和手段所进行的各 类体外操作。 课 程 大 纲 一、课程的性质与任务： 《植物细胞工程》是应用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究 改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。 它是一门现代生物科学理论和工程技术相结合的综合性学科。《植物细胞工程》是生物 技术专业植物科学方向学生的专业方向课。细胞工程是现代生物技术的重要组成部分， 同时也是现代生物学研究的重要技术工具。要求学生通过本课程的学习掌握植物组织、 器官及其细胞离体培养的原理与技术，为从事生物学领域的相关研究及其与细胞工程有 关的生物技术产业奠定良好的理论和技术基础。 二、课程的目的与基本要求： 理论知识方面：重点掌握本学科的基本原理和基本技术：细胞全能性学说在细胞工 程中的指导作用；培养条件下的细胞分化和器官发生的调控；离体培养条件下的遗传与 变异特点。掌握不同组织、器官的培养特点和控制方法。了解细胞工程的各类技术在现 GDOU-B-11-213
代生物学与生物技术领域的应用途径与发展潜力。 实践技能方面：重点掌握植物细胞工程的基本操作技术一无菌操作：掌握外植体选 择、愈伤组织和胚状体诱导、器官发生调控等基本技术：了解细胞大批量培养方法，原 生质体分离与体细胞杂交技术。 三、面向专业： 生物技术（植物科学方向）。 四、先修课程： 细胞生物学、分子生物学、遗传学、生理学、生物化学。 五、本课程与其它课程的联系： 《植物细胞工程》的发展随分子生物学、细胞生物学、发育生物学、生理学、遗传 学及其它生物类学科的飞速发展而发展，也与计算机科学、材料科学等应用学科的进步 密切相关。同时，细胞工程学的发展反过来又为其它生命学科提供了桥梁和载体，促进 了这些学科的发展与进步。 六、教学内容安排、要求、学时分配及作业： 绪论(4) 1生物工程 1.1定义(C) 12发展历程(C》 1.3现代生物工程的特点与组成(C) 1.3.1发酵工程1.3.2酶工程 1.3.3蛋白质工程 13.4基因工程 1.3.5生物化学工程 2细胞工程 2.1定义(A) 2.2主要研究内容(B)2.3细胞工程与其他生物工程的关系(C) 3植物细胞工程 3.1定义(A) 3.2特点(B》 3.3研究类型和任务(C) 4植物细胞工程的发展历史(B) 4.1理论渊源4.2理论奠基及探索阶段 4.3组培技术建立阶段 4.4植物组织培养物的形态发生研究阶段 4.5迅速发展和应用研究阶段 5植物细胞工程的应用与展望(C) 6国内外微繁概况(C)
2 代生物学与生物技术领域的应用途径与发展潜力。 实践技能方面：重点掌握植物细胞工程的基本操作技术—无菌操作；掌握外植体选 择、愈伤组织和胚状体诱导、器官发生调控等基本技术；了解细胞大批量培养方法，原 生质体分离与体细胞杂交技术。 三、面向专业： 生物技术（植物科学方向）。 四、先修课程: 细胞生物学、分子生物学、遗传学、生理学、生物化学。 五、本课程与其它课程的联系： 《植物细胞工程》的发展随分子生物学、细胞生物学、发育生物学、生理学、遗传 学及其它生物类学科的飞速发展而发展，也与计算机科学、材料科学等应用学科的进步 密切相关。同时，细胞工程学的发展反过来又为其它生命学科提供了桥梁和载体，促进 了这些学科的发展与进步。 六、教学内容安排、要求、学时分配及作业： 绪论（4） 1 生物工程 1.1 定义（C） 1.2 发展历程（C） 1.3 现代生物工程的特点与组成 （C） 1.3.1 发酵工程 1.3.2 酶工程 1.3.3 蛋白质工程 1.3.4 基因工程 1.3.5 生物化学工程 2 细胞工程 2.1 定义（A） 2.2 主要研究内容（B） 2.3 细胞工程与其他生物工程的关系（C） 3 植物细胞工程 3.1 定义（A） 3.2 特点（B） 3.3 研究类型和任务（C） 4 植物细胞工程的发展历史 （B） 4.1 理论渊源 4.2 理论奠基及探索阶段 4.3 组培技术建立阶段 4.4 植物组织培养物的形态发生研究阶段 4.5 迅速发展和应用研究阶段 5 植物细胞工程的应用与展望 （C） 6 国内外微繁概况（C）
6.1世界微繁概况 6.2国内微繁概况 思考题： 1通过学习植物生物技术简史，您对科学发现的必然”与“偶然”的对立统一有什么新 的认识？ 2什么是植物细胞工程？ 第一章实验室及基本设备（④） 1实验室 11实验室设计原则(A 12小型工厂设计(C) 13设备(B) 2器皿的选择与清洗(C) 2.1配制培养基需要的器皿 2.2细胞组织培养用的器皿 2.3玻璃器皿的清洗 3培养基的配制(A) 3.1培养基种类 3.2培养基特点 3.3培养基成分与作用 3.4母液的配制(A) 3.5培养基的配制 35.1高温消毒的培养基(A)3.52过滤消毒的培养基(B) 4材料器械的消毒与无菌操作 4.1植物材料的消毒(A) 4.1.1供体植物材料 4.2外植体的选择和处理(A) 4.2.1外植体的选择原则 4.2.2常用的外植体 4.2.3外植体的灭菌 4.3器械的消毒(A) 4.4无菌操作的步骤(A) 4.5污染源及其表现特征(A) 4.5.1污染物的种类 4.5.2污染产生原因及克服 思考题： 1植物细胞工程实验室的基本组成与要求。 2培养基的组成成分有哪几类，在离体培养中的功能是什么？ 3
3 6.1 世界微繁概况 6.2 国内微繁概况 思考题： 1 通过学习植物生物技术简史，您对科学发现的“必然”与“偶然”的对立统一有什么新 的认识？ 2 什么是植物细胞工程？ 第一章 实验室及基本设备 (4) 1 实验室 1.1 实验室设计原则(A) 1.2 小型工厂设计（C） 1.3 设备（B） 2 器皿的选择与清洗 （C） 2.1 配制培养基需要的器皿 2.2 细胞组织培养用的器皿 2.3 玻璃器皿的清洗 3 培养基的配制 （A） 3.1 培养基种类 3.2 培养基特点 3.3 培养基成分与作用 3.4 母液的配制 （A） 3.5 培养基的配制 3.5.1 高温消毒的培养基（A） 3.5.2 过滤消毒的培养基 （B） 4 材料器械的消毒与无菌操作 4.1 植物材料的消毒 （A） 4.1.1 供体植物材料 4.2 外植体的选择和处理（A） 4.2.1 外植体的选择原则 4.2.2 常用的外植体 4.2.3 外植体的灭菌 4.3 器械的消毒 （A） 4.4 无菌操作的步骤（A） 4.5 污染源及其表现特征 （A） 4.5.1 污染物的种类 4.5.2 污染产生原因及克服 思考题： 1 植物细胞工程实验室的基本组成与要求。 2 培养基的组成成分有哪几类，在离体培养中的功能是什么？
3高温消毒培养基的配制步骤？ 4培养基不凝固的可能原因有哪些？ 5植物体外培养所需要的生长调节类物质有哪些？它们的作用各是什么？ 6何谓“污染”，其原因是什么？怎样判断污染的类别？ 7为了提高离体培养的成功率，应怎样进行外植体的选择与处理？ 第二章基本原理（④ 1植物细胞全能性 1.1植物的再生现象(B) 12植物细胞全能性概念(B) 12.1细胞全能性的认识过程 1.2.2植物活细胞具有生命特征属性 12.3细胞在合适的离体培养条件下可以展现该物种的生命特征属性 12.4植物细胞“全能性”的概念 1.2.5植物细胞全能性的实现途径 2植物细胞的分化(C) 2.1定义 2.2分子遗传学观点如何解释细胞分化 3离体培养条件下植物细胞的脱分化和再分化(B) 3.1定义 3.2离体培养条件下细胞的脱分化和再分化的时期 3.3细胞分化 3.4细胞脱分化和再分化的条件 4影响植物细胞脱分化和再分化的因子(B) 4.1培养基组成的影响4.2环境条件与植物细胞脱分化和再分化 4.3供体遗传性和生理状态与植物细胞脱分化和再分化 5植物胚状体 5.1定义(A 5.2植物胚状体发生的普遍性(C) 5.3植物离体培养中器官发生的基本形式(C) 5.4胚状体的类别和特点(B) 6植物体细胞胚胎发生(C) 6.1植物体细胞胚胎发生过程 6.2植物体细胞胚胎发生途径 6.3植物体细胞胚胎发生的极性和生理隔离 6.4植物体细胞胚胎发生的生理学和生物化学 思考题： 1离体条件下生长素与细胞分裂素在细胞分化中的作用？ 2细胞全能性概念经历了怎样的演变过程？
4 3 高温消毒培养基的配制步骤？ 4 培养基不凝固的可能原因有哪些？ 5 植物体外培养所需要的生长调节类物质有哪些？它们的作用各是什么？ 6 何谓“污染”，其原因是什么？怎样判断污染的类别？ 7 为了提高离体培养的成功率，应怎样进行外植体的选择与处理？ 第二章 基本原理(4) 1 植物细胞全能性 1.1 植物的再生现象（B） 1.2 植物细胞全能性概念（B） 1.2.1 细胞全能性的认识过程 1.2.2 植物活细胞具有生命特征属性 1.2.3 细胞在合适的离体培养条件下可以展现该物种的生命特征属性 1.2.4 植物细胞“全能性”的概念 1.2.5 植物细胞全能性的实现途径 2 植物细胞的分化（C） 2.1 定义 2.2 分子遗传学观点如何解释细胞分化 3 离体培养条件下植物细胞的脱分化和再分化 （B） 3.1 定义 3.2 离体培养条件下细胞的脱分化和再分化的时期 3.3 细胞分化 3.4 细胞脱分化和再分化的条件 4 影响植物细胞脱分化和再分化的因子（B） 4.1 培养基组成的影响 4.2 环境条件与植物细胞脱分化和再分化 4.3 供体遗传性和生理状态与植物细胞脱分化和再分化 5 植物胚状体 5.1 定义（A） 5.2 植物胚状体发生的普遍性（C） 5.3 植物离体培养中器官发生的基本形式（C） 5.4 胚状体的类别和特点（B） 6 植物体细胞胚胎发生（C） 6.1 植物体细胞胚胎发生过程 6.2 植物体细胞胚胎发生途径 6.3 植物体细胞胚胎发生的极性和生理隔离 6.4 植物体细胞胚胎发生的生理学和生物化学 思考题： 1 离体条件下生长素与细胞分裂素在细胞分化中的作用？ 2 细胞全能性概念经历了怎样的演变过程？
3器官发生的影响因素及调控机理？ 4某一植物叶片，通过灭菌后接种到MS+2,4D2的培养基上诱导愈伤组织发生，请 设计一系列(3个以上)实验配方促使愈伤组织再分化，如果不能再分化，请分析原因并 提出下一步的解决措施。 第三章植物器官和组织培养(2) 1植物器官和组织培养的基本程序(A) 1.1无菌外植体的获得 1.2初代培养物的建立 13形态发生和植株再生 1.4培养产物的观察记载 2植物营养器官培养(C》 2.1植物根段培养 2.2植物茎段培养 2.3植物叶培养 3植物繁殖器官培养(C) 3.1植物花器官培养 32植物幼果培养 3.3植物种子培养 4植物组织培养(C) 4.1植物分生组织培养 4.2植物愈伤组织培养 4.3植物薄层组织培养 思考题：根据不同培养材料，如何进行培养反应的观察记载？ 第四章植物离体繁殖（⑤） 1植物快繁的器官形成方式(A) 2植物快繁的程序 2.1无菌培养的建立(A 2.2阶段Ⅱ-繁殖体增殖(A) 2.2.1培养材料的增殖 2.2.2增殖培养基 2.2.3增殖体的大小和切割方法 2,2.4影响增殖的因素以及解决措施 2.2.5提高繁殖速度的方法 2.3阶段一芽苗生根 2.3.1离体生根(A) 2.32活体生根(C) 2.4阶段IV一小植株的移栽驯化 2.4.1移栽(B) 2.4.2驯化管理(C) 2.4.3试管苗移栽后易于死亡的原因(A) 2.4.4提高试管苗移栽成活率的技术和措施(A) 2.4.5移栽技术(B) 2.4.6使用杀菌剂和抗蒸腾剂(C
5 3 器官发生的影响因素及调控机理？ 4 某一植物叶片，通过灭菌后接种到 MS+2,4-D2 的培养基上诱导愈伤组织发生，请 设计一系列（3 个以上）实验配方促使愈伤组织再分化，如果不能再分化，请分析原因并 提出下一步的解决措施。 第三章 植物器官和组织培养 (2) 1 植物器官和组织培养的基本程序（A） 1.1 无菌外植体的获得 1.2 初代培养物的建立 1.3 形态发生和植株再生 1.4 培养产物的观察记载 2 植物营养器官培养（C） 2.1 植物根段培养 2.2 植物茎段培养 2.3 植物叶培养 3 植物繁殖器官培养（C） 3.1 植物花器官培养 3.2 植物幼果培养 3.3 植物种子培养 4 植物组织培养（C） 4.1 植物分生组织培养 4.2 植物愈伤组织培养 4.3 植物薄层组织培养 思考题：根据不同培养材料，如何进行培养反应的观察记载？ 第四章 植物离体繁殖 (5) 1 植物快繁的器官形成方式（A） 2 植物快繁的程序 2.1 无菌培养的建立（A） 2.2 阶段 II—繁殖体增殖（A） 2.2.1 培养材料的增殖 2.2.2 增殖培养基 2.2.3 增殖体的大小和切割方法 2.2.4 影响增殖的因素以及解决措施 2.2.5 提高繁殖速度的方法 2.3 阶段 III—芽苗生根 2.3.1 离体生根 （A） 2.3.2 活体生根（C） 2.4 阶段 IV 一小植株的移栽驯化 2.4.1 移栽（B） 2.4.2 驯化管理（C） 2.4.3 试管苗移栽后易于死亡的原因（A） 2.4.4 提高试管苗移栽成活率的技术和措施（A） 2.4.5 移栽技术（B） 2.4.6 使用杀菌剂和抗蒸腾剂（C）
3植物快繁的商业化应用 3.1商业化生产规模及工艺流程(C) 3.2商业化生产及效益分析(C) 32.1试管苗增殖率的估算 3.22提高繁殖速度方法 3.2.3生产计划的制定和实施 3.2.4产品质量监控 3.2.5商业化生产效益分析 3.3降低商业化生产成本的措施(C) 3.4商业化生产应注意的问题 3.4.1污染(A) 3.4.2遗传稳定性(B) 3.4.3玻璃化(A) 3.4.4褐化(A) 3.4.5黄化(B) 思考题： 1离体繁殖中芽增殖方式有哪些？各有何特点？ 2离体无性繁殖依器官发生方式不同分为哪几种繁殖类型？ 3为什么用于繁殖的组培技术要尽量避免使用外源激素？ 4以你熟悉的一种作物为例，简述离体繁殖的主要技术环节及其注意事项？ 5什么是褐变现象、玻璃化现象？产生原因及克服措施？ 第五章胚胎培养及离体授粉（①）(C) 1植物胚培养 1.1胚培养的类型 1.2胚培养的应用 13幼胚培养的基本技术 1.4幼胚离体培养的生长发育方式 1.5影响胚培养的因素 2植物胚乳培养 2.1胚乳培养方法 2.2影响胚乳培养的因素 2.3胚乳培养的应用 3植物胚珠和子房培养 3.1胚珠培养 3.2子房培养 4植物离体授粉 4.1离体授粉的类型 4.2离体授粉的方法 4.3影响离体授粉受精的因素 思考题：
6 3 植物快繁的商业化应用 3.1 商业化生产规模及工艺流程（C） 3.2 商业化生产及效益分析（C） 3.2.1 试管苗增殖率的估算 3.2.2 提高繁殖速度方法 3.2.3 生产计划的制定和实施 3.2.4 产品质量监控 3.2.5 商业化生产效益分析 3.3 降低商业化生产成本的措施（C） 3.4 商业化生产应注意的问题 3.4.1 污染（A） 3.4.2 遗传稳定性（B） 3.4.3 玻璃化（A） 3.4.4 褐化（A） 3.4.5 黄化（B） 思考题： 1 离体繁殖中芽增殖方式有哪些？各有何特点？ 2 离体无性繁殖依器官发生方式不同分为哪几种繁殖类型？ 3 为什么用于繁殖的组培技术要尽量避免使用外源激素？ 4 以你熟悉的一种作物为例，简述离体繁殖的主要技术环节及其注意事项？ 5 什么是褐变现象、玻璃化现象？产生原因及克服措施？ 第五章 胚胎培养及离体授粉 (1) （C） 1 植物胚培养 1.1 胚培养的类型 1.2 胚培养的应用 1.3 幼胚培养的基本技术 1.4 幼胚离体培养的生长发育方式 1.5 影响胚培养的因素 2 植物胚乳培养 2.1 胚乳培养方法 2.2 影响胚乳培养的因素 2.3 胚乳培养的应用 3 植物胚珠和子房培养 3.1 胚珠培养 3.2 子房培养 4 植物离体授粉 4.1 离体授粉的类型 4.2 离体授粉的方法 4.3 影响离体授粉受精的因素 思考题：
1幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有何特点？ 2未授粉胚珠子房培养与授粉后胚珠子房培养有何不同？ 3胚乳培养的技术关键是什么？胚乳培养有什么意义？ 4简述离体授粉受精的概念、意义和方法 第六章无病毒苗木培育() 1病毒病害概述(C) 1.1病毒的危害 1.2植物病毒病害的病原 13病毒的必要参考属性 1.4植物病毒分布和为害 2植物病毒的传播(C》 2.1介体传播 2.2非介体传播 3植物脱病毒的意义(C) 3.1脱毒的重要性 3.2脱毒的经济意义 4植物脱病毒的机理(A) 4.1茎尖分生组织培养脱毒 4.2热处理脱毒 5植物脱毒方法(A) 5.1物理方法 5.2化学方法 5.3生物学方法 5.4综合脱毒方法 5.4.1茎尖培养结合热处理脱毒法 5.4.2茎尖培养结合病毒钝化剂处理脱毒法 6.无病毒植株脱毒程序(C》 6.1材料准备 6.2生长点分离和培养 7脱病毒植株的检测和保存(B) 7.1脱病毒植株的检测 7.1.1生物学鉴定 7.1.2血清学鉴定 7.1.3分子生物学检测 7.1.4电镜鉴定法 7.2脱病毒植株的保存 72.1脱病毒植株保存 7.2.2脱病毒植株繁殖和应用 思考题： 1利用茎尖分生组织培养脱除植物病毒的原理。 2哪些因素影响茎尖培养的脱毒效果？ 3对于生根困难的植物脱毒在培养方式上采用哪些措施
7 1 幼胚培养时胚的发育方式有哪几种？各有何特点？ 2 未授粉胚珠子房培养与授粉后胚珠子房培养有何不同？ 3 胚乳培养的技术关键是什么？胚乳培养有什么意义？ 4 简述离体授粉受精的概念、意义和方法 第六章 无病毒苗木培育 (3) 1 病毒病害概述（C） 1.1 病毒的危害 1.2 植物病毒病害的病原 1.3 病毒的必要参考属性 1.4 植物病毒分布和为害 2 植物病毒的传播（C） 2.1 介体传播 2.2 非介体传播 3 植物脱病毒的意义（C） 3.1 脱毒的重要性 3.2 脱毒的经济意义 4 植物脱病毒的机理（A） 4.1 茎尖分生组织培养脱毒 4.2 热处理脱毒 5 植物脱毒方法（A） 5.1 物理方法 5.2 化学方法 5.3 生物学方法 5.4 综合脱毒方法 5.4.1 茎尖培养结合热处理脱毒法 5.4.2 茎尖培养结合病毒钝化剂处理脱毒法 6. 无病毒植株脱毒程序（C） 6.1 材料准备 6.2 生长点分离和培养 7 脱病毒植株的检测和保存（B） 7.1 脱病毒植株的检测 7.1.1 生物学鉴定 7.1.2 血清学鉴定 7.1.3 分子生物学检测 7.1.4 电镜鉴定法 7.2 脱病毒植株的保存 7.2.1 脱病毒植株保存 7.2.2 脱病毒植株繁殖和应用 思考题： 1 利用茎尖分生组织培养脱除植物病毒的原理。 2 哪些因素影响茎尖培养的脱毒效果？ 3 对于生根困难的植物脱毒在培养方式上采用哪些措施？
4植物脱病毒方法有哪些？为什么说茎尖培养脱病毒的方法最有效？如何检测脱病 毒植物？ 第七章花药和花粉培养2) 1概念和应用 1.1概念(A》 1.2花药和花粉培养的应用(C 2花粉小孢子发育途径(C) 2.1活体小孢子发育途径 2.2离体小孢子发育途径 2.3花粉植株形态发生方式 3花药和花粉培养方法 3.1花药培养(B) 3.2花粉培养(B》 32.1花粉分离与纯化 3.2.2花粉培养方式 3.3移栽驯化(C) 3.4白化苗现象(C) 3.5影响雄核发育和花粉花药培养的因素(C) 4单倍体植株鉴定和染色体加倍(C) 4.1花粉和花药植株的倍性 42花粉和花药植株的染色体加倍 思考题： 1花药培养与花粉培养有什么不同？ 2花药培养过程中花药为什么要经过低温处理 3花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度激素？ 4植物花药和花粉培养一般包括哪些步骤？ 第八章细胞培养（④ 1单细胞培养 1.1单细胞的分离(A) 11.1机械法 1.1.2酶解法 1.2单细胞培养(A) 12.1平板培养 1.2.2看护培养 1.2.3微室培养 1.2.4条件培养基培养 1.2.5其它单细胞培养技术 2细胞的悬浮培养(C 2.1悬浮培养的方法 2.2悬浮细胞的继代
8 4 植物脱病毒方法有哪些？为什么说茎尖培养脱病毒的方法最有效？如何检测脱病 毒植物？ 第七章 花药和花粉培养 (2) 1 概念和应用 1.1 概念（A） 1.2 花药和花粉培养的应用（C） 2 花粉小孢子发育途径（C） 2.1 活体小孢子发育途径 2.2 离体小孢子发育途径 2.3 花粉植株形态发生方式 3 花药和花粉培养方法 3.1 花药培养（B） 3.2 花粉培养（B） 3.2.1 花粉分离与纯化 3.2.2 花粉培养方式 3.3 移栽驯化（C） 3.4 白化苗现象（C） 3.5 影响雄核发育和花粉花药培养的因素（C） 4 单倍体植株鉴定和染色体加倍（C） 4.1 花粉和花药植株的倍性 4.2 花粉和花药植株的染色体加倍 思考题： 1 花药培养与花粉培养有什么不同？ 2 花药培养过程中花药为什么要经过低温处理？ 3 花药培养时为什么要用较高浓度蔗糖和较低浓度激素？ 4 植物花药和花粉培养一般包括哪些步骤？ 第八章 细胞培养(4) 1 单细胞培养 1.1 单细胞的分离（A） 1.1.1 机械法 1.1.2 酶解法 1.2 单细胞培养（A） 1.2.1 平板培养 1.2.2 看护培养 1.2.3 微室培养 1.2.4 条件培养基培养 1.2.5 其它单细胞培养技术 2 细胞的悬浮培养（C） 2.1 悬浮培养的方法 2.2 悬浮细胞的继代
2.3培养细胞的同步化 2.4培养基的振荡 3培养细胞蛋白质和DNA含量变化(C) 4影响细胞培养的因素(C) 4.1培养基 4.2细胞密度 4.3植物生长调节剂 4.4pH和C0: 5单细胞培养的程序(B) 5.1建立细胞株 52高产细胞株的选择 5.3鉴定和提取 6细胞生长和活力的测定 6.1细胞生长测定(B 6.2培养细胞活力的测定(B 7.植物细胞的规模培养(C) 7.1植物细胞规模化培养体系的建立 7.1.1种子细胞的选择 7.1.2种子细胞系的增殖与放大培养 7.13大规模培养体系的建立 7.2生物反应器类型及其特点 7.2.1搅拌式生物反应器 7.2.2气动式生物反应器 7.2.3固定化细胞生物反应器 7.3植物细胞规模化培养中的有关工程技术问题 8培养细胞的次生代谢及产物积累(C) 8.1植物次生代谢产物的主要类型 8.2培养条件下的植物细胞次生产物积累的特性 8.3提高细胞次生产物产量的途径 思考题： 1植物单细胞培养的意义是什么？单细胞培养的方法有哪些？ 2简述植物细胞培养单细胞分离方法及培养方法。 3利用细胞大规模培养技术生产植物次生代谢物有什么意义？ 4植物细胞规模培养与次生产物生产前景及需要研究解决的问题 第九章植物原生质体培养及细胞融合(2) 1概述(C) 2原生质体分离(B) 2.1机械法
9 2.3 培养细胞的同步化 2.4 培养基的振荡 3 培养细胞蛋白质和 DNA 含量变化（C） 4 影响细胞培养的因素（C） 4.1 培养基 4.2 细胞密度 4.3 植物生长调节剂 4.4 pH 和 CO2 5 单细胞培养的程序（B） 5.1 建立细胞株 5.2 高产细胞株的选择 5.3 鉴定和提取 6 细胞生长和活力的测定 6.1 细胞生长测定（B） 6.2 培养细胞活力的测定（B） 7.植物细胞的规模培养（C） 7.1 植物细胞规模化培养体系的建立 7.1.1 种子细胞的选择 7.1.2 种子细胞系的增殖与放大培养 7.1.3 大规模培养体系的建立 7.2 生物反应器类型及其特点 7.2.1 搅拌式生物反应器 7.2.2 气动式生物反应器 7.2.3 固定化细胞生物反应器 7.3 植物细胞规模化培养中的有关工程技术问题 8 培养细胞的次生代谢及产物积累（C） 8.1 植物次生代谢产物的主要类型 8.2 培养条件下的植物细胞次生产物积累的特性 8.3 提高细胞次生产物产量的途径 思考题： 1 植物单细胞培养的意义是什么？单细胞培养的方法有哪些？ 2 简述植物细胞培养单细胞分离方法及培养方法。 3 利用细胞大规模培养技术生产植物次生代谢物有什么意义？ 4 植物细胞规模培养与次生产物生产前景及需要研究解决的问题。 第九章 植物原生质体培养及细胞融合(2) 1 概述（C） 2 原生质体分离（B） 2.1 机械法
2.2酶解法 2.2.1材料来源及预处理 2.2.2酶类 2.2.3材料预处理 2.2.4酶溶液的配制 2.2.5酶解处理 2.2.6原生质体纯化 2.2.7原生质体活力测定 2.2.8影响原生质体数量和活力因素 3.原生质体培养(C) 3.1培养方法 3.2供体材料 3.3植板密度 3.4培养基 3.5培养条件 4.原生质体的发育和植株再生(B) 4.1细胞壁再生 4.2细胞分裂和愈伤组织或胚状体形成 4.3植株再生 5再生植株的遗传性状及变异(C) 6.原生质体融合 6.1定义(A) 6.2融合原理(B)》 6.3融合方式(C) 6.3.1自发融合 6.3.2诱发融合 6.4融合程序(C) 6.5融合类型和方法(C)》 6.6融合产物的细胞学(C) 6.7融合体培养和发育(C)6.8体细胞杂种选择(C) 7细胞质工程（细胞拆合工程）(C) 思考题： 1什么叫原生质体？简述酶法分离植物原生质体的程序。 2植物原生质体的分离和培养有哪些主要步骤？ 3什么叫体细胞杂交？简述体细胞杂交在植物育种中的作用。 4PEG融合与电融合的原理及影响因素。 第十章植物种质资源离体保存() 1概述(C) 1.1植物种质资源保存的重要性 1.2种质资源保存方式 2限制生长保存(C)
10 2.2 酶解法 2.2.1 材料来源及预处理 2.2.2 酶类 2.2.3 材料预处理 2.2.4 酶溶液的配制 2.2.5 酶解处理 2.2.6 原生质体纯化 2.2.7 原生质体活力测定 2.2.8 影响原生质体数量和活力因素 3. 原生质体培养（C） 3.1 培养方法 3.2 供体材料 3.3 植板密度 3.4 培养基 3.5 培养条件 4.原生质体的发育和植株再生（B） 4.1 细胞壁再生 4.2 细胞分裂和愈伤组织或胚状体形成 4.3 植株再生 5 再生植株的遗传性状及变异（C） 6.原生质体融合 6.1 定义（A） 6.2 融合原理（B） 6.3 融合方式（C） 6.3.1 自发融合 6.3.2 诱发融合 6.4 融合程序（C） 6.5 融合类型和方法（C） 6.6 融合产物的细胞学 （C） 6.7 融合体培养和发育（C） 6.8 体细胞杂种选择（C） 7 细胞质工程（细胞拆合工程）（C） 思考题： 1 什么叫原生质体？简述酶法分离植物原生质体的程序。 2 植物原生质体的分离和培养有哪些主要步骤？ 3 什么叫体细胞杂交？简述体细胞杂交在植物育种中的作用。 4 PEG 融合与电融合的原理及影响因素。 第十章 植物种质资源离体保存(1) 1 概述（C） 1.1 植物种质资源保存的重要性 1.2 种质资源保存方式 2 限制生长保存（C）