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生物技术制药 第五章 动物细胞制药
第五章动物细胞制 第一节概述 ·第二节动物细胞的形态和生理特点 第三节生产用动物细胞的要求和获得令 第四节动物细胞的培养条件和培养基 第五节动物细胞培养的方法和操作方式 公的动物细胞生物反应器及其检测控制系统 把情动物细胞制药的前景和展望
第五章 动物细胞制药 • 第一节 概述 • 第二节 动物细胞的形态和生理特点 • 第三节 生产用动物细胞的要求和获得 • 第四节 动物细胞的培养条件和培养基 • 第五节 动物细胞培养的方法和操作方式 • 第六节 动物细胞生物反应器及其检测控制系统 • 第七节 动物细胞制药的前景和展望
第一节概述 (1)发现细胞和细胞学说创立。1665年英国物理学家 Hooke通过自制的显微镜观察切成薄片的软不时看到死 细胞的细胞壁 (2)组织培养或细胞培养。1885年德国生理盐水培养 鸡胚组织,至1907年,细胞体外培养宣布进入金个新时 代。 (3)细胞工程学时代。对细胞进行人工改造及培养以 使其为人类服务的时代,包括真核细胞的基因重组、导 处天扩增和表达的理论和技术,细胞融合的理论和技术 细施器特别是细胞核移植的理论和技术,染色体改造的 狸论和我,转基因动、植物的理论和技术,细胞大量 培养的理论和技术,以及产物分离纯化的理论和技术。 (4)细胞工程制药成为现代制药技术中常用的手段
第一节 概述 • （1）发现细胞和细胞学说创立。1665年英国物理学家 Hooke通过自制的显微镜观察切成薄片的软木时看到死 细胞的细胞壁。 • （2）组织培养或细胞培养。1885年德国生理盐水培养 鸡胚组织，至1907年，细胞体外培养宣布进入一个新时 代。 • （3）细胞工程学时代。对细胞进行人工改造及培养以 使其为人类服务的时代，包括真核细胞的基因重组、导 入、扩增和表达的理论和技术，细胞融合的理论和技术， 细胞器特别是细胞核移植的理论和技术，染色体改造的 理论和技术，转基因动、植物的理论和技术，细胞大量 培养的理论和技术，以及产物分离纯化的理论和技术。 • （4）细胞工程制药成为现代制药技术中常用的手段
第二节动物细胞的形态和特 动物细胞的形态 动物细胞的生理特点
第二节 动物细胞的形态和特点 • 一、动物细胞的形态 • 二、动物细胞的生理特点
动物细胞的形态 细胞的分化(或特化) 形态分化在离体培养同样也存在。 离体培养的细胞分为两类 贴壁狹赖型( anchorage-dependent)和非 壁依赖型( anchorage-independent) 2解者简称为贴壁细胞,后者可简称为 悬细胞娶
一、动物细胞的形态 细胞的分化（或特化） 形态分化在离体培养同样也存在。 离体培养的细胞分为两类： 贴壁依赖型（anchorage-dependent）和非 贴壁依赖型（anchorage-independent）， 前者可简称为贴壁细胞，后者可简称为 悬浮细胞
,米 微绒毛 纤毛 尖头伪足 体的查 胞饮沟 皱襞 圆形伪足一 多糖一蛋白质复合物 胞饮泡6 纤毛根 中间联结 分泌小泡 液泡 线粒体 桥粒 高尔基体 动物细胞结 心粒 细胞膜 构图 糙面内质网 核仁 染色质 核糖体 光面内质网 微体 溶酶体 ∴:日一隔壁联结 微管 十 膜褶 y 脂肪滴 基膜
动物细胞结 构图
动物细胞的形态 1、贴壁细胞 这类细胞的生长必须有给以贴附的 表面,细胞依靠自身分泌的或培养基中提 供的贴附因子才能在该表面上生长、增殖。 细胞在该表面生长一般形成两种形态, 成维样细胞型或上皮样细胞型。前者主 篡来源于中胚层组织的细胞,生长时呈放 积施涡状或火焰状走行:后者主要来 源层和内胚层组织的细胞,生长时 彼心孥密连接成单层细胞片
一、动物细胞的形态 • 1、贴壁细胞 • 这类细胞的生长必须有给以贴附的支持物 表面，细胞依靠自身分泌的或培养基中提 供的贴附因子才能在该表面上生长、增殖。 细胞在该表面生长一般形成两种形态，即 成纤维样细胞型或上皮样细胞型。前者主 要来源于中胚层组织的细胞，生长时呈放 射状、旋涡状或火焰状走行；后者主要来 源于外胚层和内胚层组织的细胞，生长时 彼此紧密连接成单层细胞片
、动物细胞的形态 2、悬浮细胞 这类细胞的生长不依赖支持物表面,可在培养液 中呈悬浮状态生长,如血液的淋巴细胞和用以生 产干扰素的 Namalwa细胞等,细胞呈圆 3、兼性贴壁细胞 兼具上述两种生长方式的细胞,称为兼性贴壁细 胞如cHO细胞、小鼠L929细胞。当它们贴附 在支持物表面上生长时呈上皮或成纤维细胞的形 ,顶当悬浮于培养基中生长时则呈圆形,但有 时它们可相互支持贴附在一起生长
一、动物细胞的形态 • 2、悬浮细胞 • 这类细胞的生长不依赖支持物表面，可在培养液 中呈悬浮状态生长，如血液的淋巴细胞和用以生 产干扰素的Namalwa细胞等，细胞呈圆形。 • 3、兼性贴壁细胞 • 兼具上述两种生长方式的细胞，称为兼性贴壁细 胞，如CHO细胞、小鼠L929细胞。当它们贴附 在支持物表面上生长时呈上皮或成纤维细胞的形 态，而当悬浮于培养基中生长时则呈圆形，但有 时它们可相互支持贴附在一起生长
动物细胞的生理特点 1、细胞的分裂周期长 一般为12-48,胞分裂周期间期期 +G,期)+分裂期(M期) G1期:凡细胞无增殖活动时皆滞留在G期 S期:DNA的合成,一般为68小时 G2期:DNA量加倍,RNA合成和染色体螺旋化, 持续时间短,一般为25h M期般持续时间很短,仅05~1h。相当于有 紛的中后期和末期,主要是染色体的变化、 分裂黍并形成子细胞。 细胞分裂代数与培养中的代数及相互关系
二、动物细胞的生理特点 • 1、细胞的分裂周期长 • 一般为12~48h，细胞分裂周期=间期（G1期+S期 +G2期）+分裂期（M期） • G1期：凡细胞无增殖活动时皆滞留在G1期 • S 期：DNA的合成，一般为6~8小时 • G2期：DNA量加倍，RNA合成和染色体螺旋化， 持续时间短，一般为2~5h。 • M期：一般持续时间很短，仅0.5~1h。相当于有 丝分裂的中后期和末期，主要是染色体的变化、 分裂，并形成子细胞。 • 细胞分裂代数与培养中的代数及相互关系
动物细胞的生理特点 2、细胞生长需贴附于基质,并有接触拉制现象 大多数正常二倍体( dipoid)细胞的生长都需要 定的基质(如玻璃,塑料等)上贴附錢后 才能生长增殖,其机制可能与电荷、钙美寶子的 作用以及许多贴附因子有关。 当细胞在基质上分裂增殖,逐渐汇合成片时,细 与周围细胞相互接触时,细胞才停止增殖 定的营养,细胞仍可存活一段时间,但细 密度再增加,该现象就称为接触抑制或密度 依赖制现象。一旦细胞转化为异倍体后,该现 象消细胞可多层生长,细胞密度可大大增加
二、动物细胞的生理特点 • 2、细胞生长需贴附于基质，并有接触抑制现象 • 大多数正常二倍体（dipoid）细胞的生长都需要 一定的基质（如玻璃，塑料等）上贴附，伸展后 才能生长增殖，其机制可能与电荷、钙镁离子的 作用以及许多贴附因子有关。 • 当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片时，细 胞与其周围细胞相互接触时，细胞才停止增殖。 保持一定的营养，细胞仍可存活一段时间，但细 胞密度不再增加，该现象就称为接触抑制或密度 依赖抑制现象。一旦细胞转化为异倍体后，该现 象消失，细胞可多层生长，细胞密度可大大增加