贵州师范大学：生命科学学院《遗传学》课程实验指导书（共五个实验）.docx_大学文库

实验一染色体组型分析一、实验目的学习和掌握染色体组型(核型)分析的基本方法。二、实验原理染色体组型通常是指生物体细胞所有可测定的染色体表型特征的总称，包括染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体基数，每条染色体大小、形态等。它是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。染色组型分析是对染色体进行分组，对核型的各种特征进行定量和定性描述，可以用来鉴别真假杂种，对研究染色体的结构变异，数目变异，B染色体，物种的起源和遗传进化，基因定位等有很大的参考价值。进行核型分析可利用有丝分裂染色体或减数分裂染色体，其中最常见的是有丝分裂染色体。三、实验材料大麦、玉米、蚕豆或蛙、小白鼠等有丝分裂中期染色体标本，和经显微摄影所得放大照片，要求染色体分散良好，无重叠或重叠很少，着丝粒、随体等形态清晰可辨。四、实验器具每人用同一种植物（或动物）的5～10个细胞有丝分裂中期照片5～10张；镊子、剪刀、直尺、计算器、铅笔、绘图纸、坐标纸、保险丝、分规等。五、实验步骤1染色体数目的统计取良好的制片，观察统计时原则上需尽可能观察多个个体约100个细胞，使其具有较大的准确性和代表性，因自然界某些物种不同个体之间，不同组织之间染色体数目有时会有差异，制片时实验材料经处理后也常会出现一个个体的制片中不同细胞含有染色体数不同，如二倍体或四倍体，即便如此，该个体也只能以二倍体计数。取其众数，此众数即该物种的染色体数目。若细胞中发现一个或多个小型染色体，其大小约为正常染色体1/2，小的只有随体大小，且同一个体中数目比较稳定，形态上多为中部或端部着丝粒染色体，则它们是B染色体（超数染色体），主要存在于二倍体植物。2摄影和放大照片>选择染色体分散，不重叠或少重叠，着丝粒清晰，染色体不扭曲，不断裂的5个以上细胞，拍摄放大，用此照片进行核型分析。3染色体形态分析（1）测量先在已知放大倍数的照片上分别将每一细胞内的染色体随意编序号，然后依次从着丝粒中部量至每个臂的端部，得出每条染色体的长短臂长度，计算出臂比值（长臂长/短臂长），绝对长度（长臂长+短臂长），将数据填入下表，具有随体或次继痕的染色体，以“*标记。附表8.1××××核型分析参数表（草表）序号绝对长度（mm）长臂长+短臂臂比值（长臂/短臂）长123(2)配对根据所测数据结合目测，按染色体的形态及大小，臂比，次缢痕的位置，随体的形态大小等，将同源染色体配对。(3）排队，排队的原则是：染色体长的在前，具有随体的染色体，性染色体在最后，若有随体的染色体在两对以上，则大的随体染色体在前，小的随体染色体在后，B染色体一般排在最后。（4）剪贴剪下放大照片上的每条染色体，按照已确定的同源关系和先后顺序，粘贴在绘图纸上。植物应注意使着丝粒处于同一水平线上（动物则不一定），短臂向上长臂向下，如有条件，应与原始照片一起翻拍，成为核型图。（5）计算染色体的长度一般情况下，细胞所处的时期会有差异，故同样的染色体在不

实验一染色体组型分析一、实验目的学习和掌握染色体组型(核型)分析的基本方法。二、实验原理染色体组型通常是指生物体细胞所有可测定的染色体表型特征的总称，包括染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体基数，每条染色体大小、形态等。它是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。染色组型分析是对染色体进行分组，对核型的各种特征进行定量和定性描述，可以用来鉴别真假杂种，对研究染色体的结构变异，数目变异，B 染色体，物种的起源和遗传进化，基因定位等有很大的参考价值。进行核型分析可利用有丝分裂染色体或减数分裂染色体，其中最常见的是有丝分裂染色体。三、实验材料大麦、玉米、蚕豆或蛙、小白鼠等有丝分裂中期染色体标本，和经显微摄影所得放大照片，要求染色体分散良好，无重叠或重叠很少，着丝粒、随体等形态清晰可辨。四、实验器具每人用同一种植物(或动物)的 5～10 个细胞有丝分裂中期照片 5～10 张；镊子、剪刀、直尺、计算器、铅笔、绘图纸、坐标纸、保险丝、分规等。五、实验步骤 1 染色体数目的统计取良好的制片，观察统计时原则上需尽可能观察多个个体约 100 个细胞，使其具有较大的准确性和代表性，因自然界某些物种不同个体之间，不同组织之间染色体数目有时会有差异，制片时实验材料经处理后也常会出现一个个体的制片中不同细胞含有染色体数不同，如二倍体或四倍体，即便如此，该个体也只能以二倍体计数。取其众数，此众数即该物种的染色体数目。若细胞中发现一个或多个小型染色体，其大小约为正常染色体 1/2，小的只有随体大小，且同一个体中数目比较稳定，形态上多为中部或端部着丝粒染色体，则它们是 B 染色体(超数染色体)，主要存在于二倍体植物。 2 摄影和放大照片〗选择染色体分散，不重叠或少重叠，着丝粒清晰，染色体不扭曲，不断裂的 5 个以上细胞，拍摄放大，用此照片进行核型分析。 3 染色体形态分析 (1)测量先在已知放大倍数的照片上分别将每一细胞内的染色体随意编序号，然后依次从着丝粒中部量至每个臂的端部，得出每条染色体的长短臂长度，计算出臂比值(长臂长/短臂长)，绝对长度(长臂长+短臂长)，将数据填入下表，具有随体或次缢痕的染色体，以“*” 标记。附表 8.1 ××××核型分析参数表(草表) 序号绝对长度(mm) 长臂长+短臂长臂比值(长臂/短臂) 1 2 3 . (2)配对根据所测数据结合目测，按染色体的形态及大小，臂比，次缢痕的位置，随体的形态大小等，将同源染色体配对。 (3)排队排队的原则是：染色体长的在前，具有随体的染色体，性染色体在最后，若有随体的染色体在两对以上，则大的随体染色体在前，小的随体染色体在后，B 染色体一般排在最后。 (4)剪贴剪下放大照片上的每条染色体，按照已确定的同源关系和先后顺序，粘贴在绘图纸上。植物应注意使着丝粒处于同一水平线上(动物则不一定)，短臂向上长臂向下，如有条件，应与原始照片一起翻拍，成为核型图。 (5)计算染色体的长度一般情况下，细胞所处的时期会有差异，故同样的染色体在不

染色体大小对称性：植物中一般规定1um4um为小染色体，4um～12μm为中染色本，12uμm以上为大染色体。1m以下的为微小染色体。若染色体大小相似，称为对称性，反之大小悬殊，称为不对称性。染色体核型对称性：Stebbins在1971年根据核型中最大和最小染色体的长度比，及臂比大于2：1的染色体所占的比例将其划分为12个类型（附表8. 4) :附表8.4染色体对称核型到不对称核型的分类(Stebbins1971)最长与最短臂比大于2：1的染色体百分比1.00染色体长度比0. 000.01~0.500.51~0.994: 13C注：在表中1A为最对称核型，4C为最不对称核型六、实验作业1把分析的物种的结果填入核型分析参数表。写出核型公式，制作核型图。2对该物种的核型进行综合描述。实验二人群中PTC味盲基因频率的分析一、实验目的1、学习和掌握群体中基因频率的分析方法。2、通过对人体遗传性状的分析及基因频率的计算，了解选择对改变基因频率的作用。二，实验原理PTC即苯硫脲，是一种无毒无副作用的化合物，人体对苯硫脲（PTC)尝味的能力是由对等位基因（Tt）所决定的遗传性状，其中T对t为不完全显性。在不同人群中对该物质的尝味能力不同。利用这一原理，将PTC配制成各种浓度的溶液，由低浓度到高浓度逐步测试学生的尝味能力，由此可区分出味盲（隐性纯合体）、高度敏感（显性纯合体）和介于二者之间的人（杂合体）。据此可对人群中味盲基因的频率进行分析。正常尝味者的基因型为TT，能尝出1／750000—1/6,000,000的PTC溶液的苦味具有基因Tt的人尝味能力较低，只能尝出1／480，000～1/380，000的PTC溶液的苦味酸，而基因型为tt的人只能尝出>1/24,OOO的PTC溶液的苦味，甚至对PTC的结晶物也尝不出苦味来，在遗传学上被称为味盲。三、实验材料1、PTC溶液的配制原液：取PTC结晶1.3g，加蒸馏水1000ml，时时摇晃，在室温（20℃左右）下1一2日即完全溶解。原液的PTC浓度约为1／750，原液稀释1倍为2号液，2号液稀释1倍为3号液，以此类推，直至配成14号液，浓度为1／6,000,000。将配好的14种PTC溶液分别置于消毒好的滴瓶中。2、若干毫升蒸馏水及洁净滴管。四、实验步骤1.让受试者坐于椅子上，仰头张嘴。用滴管滴5～10滴14号液于受试者舌根部，让受试者徐徐下咽品味，然后用蒸馏水作同样的试验。2.询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道，若不能鉴别或鉴别不准确，则依次用13号，12号...溶液重复试验，直至能明确鉴别出PTC的苦味为止。3，当受试者鉴别出某一号溶液时，应当再用此号溶液重复尝味三次，三次结果相同时，才是可靠的。4.测定时应将PTC溶液与蒸馏水反复交替给受试者，以免由于受试者的猜想及其他心理作用而影响结果的准确性。5.tt基因型的阈值范围为1-6号液，Tt基因型的阈值范围为7-10号液，TT基因型的值范围为11-14号液。根据测试结果，记录业统计所调查人群中的基因型。五、实验报告1.根据实验结果，算出味盲者tt基因型的频率。2，求出基因t与基因T的频率。3.假定tt基因型的适应值=0，求出选择后基因t的频率（q1)，及改变量△q的值

染色体大小对称性：植物中一般规定 1μm～4μm 为小染色体，4μm～12μm 为中染色本，12μm 以上为大染色体。1μm 以下的为微小染色体。若染色体大小相似，称为对称性，反之大小悬殊，称为不对称性。染色体核型对称性：Stebbins 在 1971 年根据核型中最大和最小染色体的长度比，及臂比大于 2∶1 的染色体所占的比例将其划分为 12 个类型(附表 8.4)∶ 附表 8.4 染色体对称核型到不对称核型的分类(Stebbins 1971) 最长与最短染色体长度比臂比大于 2∶1 的染色体百分比 0.00 0.01～0.50 0.51～0.99 1.00 ＜2∶1 1A 2A 3A 4A 2∶1～4∶1 1B 2B 3B 4B ＞4∶1 1C 2C 3C 4C 注：在表中 1A 为最对称核型，4C 为最不对称核型六、实验作业 1 把分析的物种的结果填入核型分析参数表。写出核型公式，制作核型图。 2 对该物种的核型进行综合描述。实验二人群中 PTC 味盲基因频率的分析一、实验目的 1、学习和掌握群体中基因频率的分析方法。 2、通过对人体遗传性状的分析及基因频率的计算，了解选择对改变基因频率的作用。二，实验原理ＰＴＣ即苯硫脲，是一种无毒无副作用的化合物，人体对苯硫脲(PTC)尝味的能力是由一对等位基因(Tt)所决定的遗传性状，其中 T 对 t 为不完全显性。在不同人群中对该物质的尝味能力不同。利用这一原理，将ＰＴＣ配制成各种浓度的溶液，由低浓度到高浓度逐步测试学生的尝味能力，由此可区分出味盲（隐性纯合体）、高度敏感（显性纯合体）和介于二者之间的人（杂合体）。据此可对人群中味盲基因的频率进行分析。正常尝味者的基因型为 TT，能尝出 1／750,000—1／6,000,000 的 PTC 溶液的苦味，具有基因 Tt 的人尝味能力较低，只能尝出 1／480,000～l／380,000 的 PTC 溶液的苦味酸，而基因型为 tt 的人只能尝出>1／24,000 的 PTC 溶液的苦味，甚至对 PTC 的结晶物也尝不出苦味来，在遗传学上被称为味盲。三、实验材料 l、PTC 溶液的配制原液：取 PTC 结晶 l.3g，加蒸馏水 1000ml，时时摇晃，在室温(20℃左右)下 l 一 2 日即完全溶解。原液的 PTC 浓度约为 1／750，原液稀释 1 倍为 2 号液，2 号液稀释 1 倍为 3 号液，以此类推，直至配成 14 号液，浓度为 1／6,000,000。将配好的 14 种 PTC 溶液分别置于消毒好的滴瓶中。 2、若干毫升蒸馏水及洁净滴管。四、实验步骤 1．让受试者坐于椅子上，仰头张嘴。用滴管滴 5～10 滴 14 号液于受试者舌根部，让受试者徐徐下咽品味，然后用蒸馏水作同样的试验。 2．询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道，若不能鉴别或鉴别不准确，则依次用 13 号，12 号.溶液重复试验，直至能明确鉴别出 PTC 的苦味为止。 3．当受试者鉴别出某一号溶液时，应当再用此号溶液重复尝味三次，三次结果相同时，才是可靠的。 4．测定时应将 PTC 溶液与蒸馏水反复交替给受试者，以免由于受试者的猜想及其他心理作用而影响结果的准确性。 5．t t 基因型的阈值范围为 1-6 号液，Tt 基因型的阈值范围为 7-l0 号液，TT 基因型的阈值范围为 11-14 号液。根据测试结果，记录业统计所调查人群中的基因型。五、实验报告 1．根据实验结果，算出味盲者 t t 基因型的频率。 2，求出基因 t 与基因 T 的频率。 3．假定 tt 基因型的适应值=0，求出选择后基因 t 的频率(q l)，及改变量Δq 的值

例：04-2班测定了61人对苯硫脲的尝味能力，其中30人（TT）有尝味能力、杂合的有28人（Tt）、味盲者有3人（tt）。问是否是达到Hardy-weiberg平衡？T基因的频率pr=(30X2+28)/(61X2)=0.72：t基因的频率qs=(3×2+28)/(61×2)=0.28TTTtI tt总计3302861实际频数(0)N(Np*)(Nq")理论频数(C)(N2pq)31.622424.59524.7824x2 =0.0830. 4710.664(O-C)°/C1.2191.219(<1.39),p=0.5，符合Hardyweiberg平衡群体。实验三植物叶片细胞有丝分裂染色体制片与观察+染色体结构变异观察一、实验目的学习和掌握植物叶片细胞有丝分裂染色体压片技术，为制备植物染色体标本提供新的途径。二、实验原理有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式，高等植物的有丝分裂主要发生在根尖，茎尖及幼叶等部位的分生组织。根尖取材较容易，操作简便。通过固定，染色和压片可在光镜下看见大量的处于有丝分裂各期的细胞和染色体，看到染色体的形态特征和变化特点。采用药物或冷冻处理，可阻止纺锤体形成，使细胞停留在中期，并使染色体缩短，易于分散。此外，通过对细胞组织进行酸解或酶解，可除去细胞之间的果胶层，并使细胞软化，彼此易于分开，利于压片和染色。三、实验材料蚕豆（Viciafaba）叶片。四、实验器具和药品1器具显微镜、水浴锅、剪刀、镊子、刀片、载片、盖片、滤纸、酒精灯等。2药品无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、0.1NHC1。五、实验步骤1取材当蚕豆植株长至8——15cm，顶芽侧叶叶长5—15cm时，于上午9~11时左右，剪取侧叶（注意：不要取顶莞叶片，以免影响顶的生长）。2固定自的是迅速将组织和细胞杀死，并使细胞结构尽可能保持生活时的状态。将材料移入卡诺固定液（乙醇3份，冰乙酸1份）中，415℃条件下固定3h，可制片。3解离将叶片从固定液中取出，蒸溜水漂洗后置入60℃水浴锅中预热的0.1mol/LHC1中，恒温解离10min～15min，蒸溜水洗2～3次（约5min）。4染色将解离后的材料，用水冲洗2-3次，切取叶尖或叶基2册左右，置于载玻片上捣碎，用丙酸-水合氯醛-铁矾-苏木精染色5-10分钟，即可盖片观察。六、作业1、绘制你观察到的图象，并注明其细胞分裂时期。2、植物叶片涂片法与根尖涂片法有何优缺点？如何改进？

例：04-2 班测定了 61 人对苯硫脲的尝味能力，其中 30 人(TT)有尝味能力、杂合的有 28 人(Tt)、味盲者有 3 人(tt)。问是否是达到 Hardy-weiberg 平衡？ T 基因的频率 pT= (30×2+28)/(61×2)=0.72；t 基因的频率 qt= (3×2+28)/(61×2)=0.28 χ2 2 = 1.219(<1.39)， p=0.5,符合 Hardyweiberg 平衡群体。实验三植物叶片细胞有丝分裂染色体制片与观察+染色体结构变异观察一、实验目的学习和掌握植物叶片细胞有丝分裂染色体压片技术，为制备植物染色体标本提供新的途径。二、实验原理有丝分裂是植物体细胞增殖的主要方式，高等植物的有丝分裂主要发生在根尖，茎尖及幼叶等部位的分生组织。根尖取材较容易，操作简便。通过固定，染色和压片可在光镜下看见大量的处于有丝分裂各期的细胞和染色体，看到染色体的形态特征和变化特点。采用药物或冷冻处理，可阻止纺锤体形成，使细胞停留在中期，并使染色体缩短，易于分散。此外，通过对细胞组织进行酸解或酶解，可除去细胞之间的果胶层，并使细胞软化，彼此易于分开，利于压片和染色。三、实验材料蚕豆(Vicia faba)叶片。四、实验器具和药品 1 器具显微镜、水浴锅、剪刀、镊子、刀片、载片、盖片、滤纸、酒精灯等。 2 药品无水乙醇、70%乙醇、冰乙酸、饱和对二氯苯水溶液、0.1%秋水仙素、0.1NHCl。五、实验步骤 1 取材当蚕豆植株长至 8——15cm，顶芽侧叶叶长 5—15cm 时，于上午 9～11 时左右，剪取侧叶（注意：不要取顶荛叶片，以免影响顶荛的生长）。 2 固定目的是迅速将组织和细胞杀死，并使细胞结构尽可能保持生活时的状态。将材料移入卡诺固定液(乙醇 3 份，冰乙酸 1 份)中，4～15℃条件下固定 3h，可制片。 3 解离将叶片从固定液中取出，蒸溜水漂洗后置入 60℃水浴锅中预热的 0.1mol/LHCl 中，恒温解离 10min～15min，蒸溜水洗 2～3 次(约 5min)。 4 染色将解离后的材料，用水冲洗 2-3 次，切取叶尖或叶基 2 册左右，置于载玻片上捣碎，用丙酸-水合氯醛-铁矾-苏木精染色 5-10 分钟，即可盖片观察。六、作业 1、绘制你观察到的图象，并注明其细胞分裂时期。 2、植物叶片涂片法与根尖涂片法有何优缺点？如何改进？ TT Tt tt 总计实际频数(O) 30 28 3 61 理论频数(C) (Np2 ) 31.6224 (N2pq) 24.5952 (Nq2 ) 4.7824 N (O-C)2 /C 0.083 0.471 0.664 1.219

实验四果蝇的饲养管理和性状观察一、目的1、了解果蝇生活史中各个阶段的形态特征，观察果蝇常见的几种突变型；掌握鉴别雌雄果蝇的方法。2、学会果蝇的饲养管理和实验处置技术。二、实验原理果蝇(Drosophilamelanogester)属昆虫纲，双翅目，果蝇属。具完全变态。果蝇在20℃～25℃时，每12天左右可完成一个世代，生活史较短；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可产卵400～500个。培养果蝇的饲料来源广泛，价格便宜：果蝇常温下就可生长繁育，饲养容易：不同形态的突变型多达400个以上，便于观察分析；且染色体数目较少(2n=8)，加之其睡腺染色体巨大，因此是遗传学研究中常用的实验材料。三、材料野生型果蝇，及常见的几种突变型果蝇。四、器具原料和药品1器具：显微镜、双筒解部镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、麻醉皿、培养瓶、白瓷砖（15×15cm），毛笔、石棉网、黑纸、胶水、牛皮纸。2原料：琼脂、玉米粉、白糖、酵母、香蕉等。3药品：乙醚、酒精、丙酸。五、果蝇生活史的观察果蝇为完全变态，其生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个时期（附图11)，各时期持续时间的长短随温度的高低而不同。20℃时，从卵到幼虫约为8天，从幼虫到成虫约6天，整个生活；25℃时，卵到幼虫5天，蛹期4.2天，整个生活史约10天。20～25℃是果蝇生活的适宜温度；温度过高(30℃以上)，会引起果蝇不孕或死亡；温度过低（10℃以下），生活史可长达57天，且生活力降低。果蝇一般保存于恒温箱内，盛夏要注意降温。雌蝇一般可生活4周，雄蝇寿命较短。果蝇生活史1.卵2.一龄幼虫3.二龄幼虫4.三龄幼虫5.蛹6.成虫(雄)7.成虫(雌)羽化后的雌蝇，其生殖器官有一受精囊，可保留大量的精子，能使大量的卵受精。一般在儿小时后即开始交配，两天后开始产卵。一般情况下只有一个精子与卵受精，多余的精子可被雌体贮存起来，故杂交实验时必须选取贞蝇。（1)卵：用解剖针挑取少许附有卵的培养基涂于载玻片上，或用解部针轻压雌蝇腹部

实验四果蝇的饲养管理和性状观察一、目的 1、了解果蝇生活史中各个阶段的形态特征，观察果蝇常见的几种突变型；掌握鉴别雌雄果蝇的方法。 2、学会果蝇的饲养管理和实验处置技术。二、实验原理果蝇(Drosophila melanogester)属昆虫纲，双翅目，果蝇属。具完全变态。果蝇在 20℃～ 25℃时，每 12 天左右可完成一个世代，生活史较短；繁殖能力强，每只受精的雌蝇可产卵 400～500 个。培养果蝇的饲料来源广泛，价格便宜；果蝇常温下就可生长繁育，饲养容易；不同形态的突变型多达 400 个以上，便于观察分析；且染色体数目较少(2n=8)，加之其唾腺染色体巨大，因此是遗传学研究中常用的实验材料。三、材料野生型果蝇，及常见的几种突变型果蝇。四、器具原料和药品 1 器具：显微镜、双筒解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、麻醉皿、培养瓶、白瓷砖 (15×15cm)，毛笔、石棉网、黑纸、胶水、牛皮纸。 2 原料：琼脂、玉米粉、白糖、酵母、香蕉等。 3 药品：乙醚、酒精、丙酸。五、果蝇生活史的观察果蝇为完全变态，其生活史包括卵、幼虫、蛹、成虫四个时期(附图 1 1)，各时期持续时间的长短随温度的高低而不同。20℃时，从卵到幼虫约为 8 天，从幼虫到成虫约 6 天，整个生活；25℃时，卵到幼虫 5 天，蛹期 4.2 天，整个生活史约 10 天。20～25℃是果蝇生活的适宜温度；温度过高(30℃以上)，会引起果蝇不孕或死亡；温度过低(10℃以下)，生活史可长达 57 天，且生活力降低。果蝇一般保存于恒温箱内，盛夏要注意降温。雌蝇一般可生活 4 周，雄蝇寿命较短。果蝇生活史 1．卵 2．一龄幼虫 3．二龄幼虫 4．三龄幼虫 5．蛹 6．成虫(雄) 7．成虫(雌) 羽化后的雌蝇，其生殖器官有一受精囊，可保留大量的精子，能使大量的卵受精。一般在几小时后即开始交配，两天后开始产卵。一般情况下只有一个精子与卵受精，多余的精子可被雌体贮存起来，故杂交实验时必须选取贞蝇。 (1)卵：用解剖针挑取少许附有卵的培养基涂于载玻片上，或用解剖针轻压雌蝇腹部

将卵挤在载片上，用低倍镜观察。卵约0.5mm长，椭圆形，腹面稍扁平，背面的前端伸出一对触丝，其作用是使卵附在培养基表面而利于发育。(2)幼虫：卵孵化成幼虫后要经两次蜕皮，才能从一龄幼虫发育到三龄幼虫，三龄幼虫长约5mm，头部稍尖，口器为肉眼可见的小黑点，口器后部有一对透明的睡液腺，身体后半部上方两侧，可见一对生殖腺，精巢较大，为一明显的黑色班点，卵巢较小。(3)蛹：幼虫生活7～8天，就从培养基中爬出，附着在干燥的瓶壁或插在培养基的栖息纸上，逐渐形成一个梭形的蛹，蛹的前部有两个呼吸孔，后部有尾芽。蛹色起初淡黄，3～4天后变成深褐，表示要羽化了。（4)成虫：刚羽化的果蝇，虫体较大，翅还未展开，体表也未几丁质化，呈半透明乳白色，不久，蝇体变为短椭圆形，体色加深，双翅伸展，如野生型果蝇由开始的浅灰色转为灰褐色。果蝇成虫分为头、胸、腹三部分，头部有一大对的复眼，三个单眼和一对触角：胸部有三对足，一对翅和一对平衡棒：腹部背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器位于腹面末端，全身有许多体毛和刚毛。1雌雄性果蝇鉴别：果蝇有雌雄之分，幼虫期较难区别，成虫期则较易区别。a.体型雌果蝇体型较大，雄果蝇较小：b.腹部末端雌性腹部椭圆，末端稍尖，雄性末端钝圆；c.腹部背面雌性有明显5条黑色条纹，雄性有三条，前两条细，后一条宽，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。d.腹部腹面雌性有较明显的6个腹片，雄性有4个腹片。e.性梳雄性第一对足的节基部外侧有黑色鬃毛状性梳，雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一。JmTKU-a0L中：节基部的性梳左：雄性果蝇的左前足右：雌果蝇无性梳C、基节F、腿节TI、胫节TA、节TR、转节

将卵挤在载片上，用低倍镜观察。卵约 0.5mm 长，椭圆形，腹面稍扁平，背面的前端伸出一对触丝，其作用是使卵附在培养基表面而利于发育。 (2)幼虫：卵孵化成幼虫后要经两次蜕皮，才能从一龄幼虫发育到三龄幼虫，三龄幼虫长约 5mm，头部稍尖，口器为肉眼可见的小黑点，口器后部有一对透明的唾液腺，身体后半部上方两侧，可见一对生殖腺，精巢较大，为一明显的黑色班点，卵巢较小。 (3)蛹：幼虫生活 7～8 天，就从培养基中爬出，附着在干燥的瓶壁或插在培养基的栖息纸上，逐渐形成一个梭形的蛹，蛹的前部有两个呼吸孔，后部有尾芽。蛹色起初淡黄，3～ 4 天后变成深褐，表示要羽化了。 (4)成虫：刚羽化的果蝇，虫体较大，翅还未展开，体表也未几丁质化，呈半透明乳白色，不久，蝇体变为短椭圆形，体色加深，双翅伸展，如野生型果蝇由开始的浅灰色转为灰褐色。果蝇成虫分为头、胸、腹三部分，头部有一大对的复眼，三个单眼和一对触角；胸部有三对足，一对翅和一对平衡棒；腹部背面有黑色环纹，腹面有腹片，外生殖器位于腹面末端，全身有许多体毛和刚毛。 1 雌雄性果蝇鉴别：果蝇有雌雄之分，幼虫期较难区别，成虫期则较易区别。 a．体型雌果蝇体型较大，雄果蝇较小； b．腹部末端雌性腹部椭圆，末端稍尖，雄性末端钝圆； c．腹部背面雌性有明显 5 条黑色条纹，雄性有三条，前两条细，后一条宽，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。 d．腹部腹面雌性有较明显的 6 个腹片，雄性有 4 个腹片。 e．性梳雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳，雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一。左：雄性果蝇的左前足中：跗节基部的性梳右：雌果蝇无性梳 C、基节 TR、转节 F、腿节 TI、胫节 TA、跗节

2果蝇几种突变类型的观察果蝇的突变性状一般要用肉眼或放大镜在培养瓶外观察，或在解剖镜下观察，主要有如附表突变名基因符性状特征在染色体上座号称位白眼X 1.5W复眼白色残翅翅全退化，部分残留不能飞IIR67.0vg黄体全身呈浅橙黄色X0.0y黑檀体身体呈乌木色，黑亮ⅢI R 70.7le焦毛区 21.0Sn刚毛卷曲如烧焦状小翅区 36.1m翅短仅长至腹端4果蝇的麻醉果蝇性状的观察以及果蝇的杂交实验分析，都必须将果蝇麻醉，使之处于静止状态后方可进行。在一软木塞上钻一圆孔（约5mm）并在圆孔中塞上脱脂药棉，将此软木塞盖在一个200mL的广口瓶上，即做成了麻醉瓶，再用一培养皿，在血的底部粘上一条滤纸即成麻醉皿。麻醉时，先将培养瓶倒置，使果蝇向瓶底部运动，然后打开麻醉瓶和培养瓶塞，并迅速将培养瓶和麻醉瓶口对接（麻醉瓶在下，培养瓶在上），左手紧握两瓶接口稍倾斜，然后轻拍培养瓶瓶壁，使果蝇落入麻醉瓶内，迅速盖好两个瓶塞。将数滴乙醚滴在软木塞的药棉上，一分钟后，果蝇即处于昏迷状态，将其倾倒在酒精擦过的白磁板上，用毛笔轻轻拨动进行观察。当白磁板上的果蝇即将苏醒时，可在麻醉皿的滤纸上滴加乙醚，扣在白瓷板上进行二次麻醉，麻醉的程度依实验需要而定：果蝇翅外展与身体呈45°角时，表示已麻醉过度，不能复苏。将不需要的果蝇倒入盛有酒精的瓶中。六、果蝇的繁育果蝇在水果摊或果园常可见到，它以生长在水果上的酵母菌为食。故凡可发酵的基质，均可作为果蝇饲料。目前实验室常用的果蝇饲料配方如下：A：糖6.2g，琼脂0.62g，水38mL，煮沸溶解：B：玉米粉8.25g，水38mL。A、B混合加热煮沸成糊状，加0.5mL丙酸，即可分装到培养瓶中。除玉米饲料外，还有米粉饲料和香蕉饲料。（1)米粉饲料配制：琼脂0.9一2.5g加入100mL水中，加热煮沸溶解：再加红糖10g，等溶解后，将8g米粉(或麦夫皮)调成糊状倒入，不断搅拌煮沸数分钟，成稀粥状即可分装使用。(2)香蕉饲料的配制：将熟透的香蕉捣碎，制成香蕉浆(约50g)：将1.5g琼脂加到48ml水中煮沸，溶解后拌入香蕉浆，再煮沸后即可分装。此两种饲料易生霉，需加少量防霉剂。果蝇的培养瓶、常用的有牛奶瓶、大中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶塞（或泡沫塑料作瓶塞）。培养瓶先消毒，然后倒入饲料（2cm厚），等冷却后，用酒精棉球擦瓶壁，再加入醇母粉少许，插入消毒过的吸水纸，作幼虫化蛹和栖息之用，因此也称栖息纸。七、作业1绘雌雄果蝇第一对足外形图(示性梳)。2将野生型和儿种突变型性状观察的结果

2 果蝇几种突变类型的观察果蝇的突变性状一般要用肉眼或放大镜在培养瓶外观察，或在解剖镜下观察，主要有如附表突变名称基因符号性状特征在染色体上座位白眼残翅黄体黑檀体焦毛小翅 w vg y e Sn m 复眼白色翅全退化，部分残留不能飞全身呈浅橙黄色身体呈乌木色，黑亮刚毛卷曲如烧焦状翅短仅长至腹端 X 1.5 Ⅱ R 67.0 X 0.0 Ⅲ R 70.7 X 21.0 X 36.1 4 果蝇的麻醉果蝇性状的观察以及果蝇的杂交实验分析，都必须将果蝇麻醉，使之处于静止状态后方可进行。在一软木塞上钻一圆孔( 约 5mm)并在圆孔中塞上脱脂药棉，将此软木塞盖在一个 200mL 的广口瓶上，即做成了麻醉瓶，再用一培养皿，在皿的底部粘上一条滤纸即成麻醉皿。麻醉时，先将培养瓶倒置，使果蝇向瓶底部运动，然后打开麻醉瓶和培养瓶塞，并迅速将培养瓶和麻醉瓶口对接(麻醉瓶在下，培养瓶在上)，左手紧握两瓶接口稍倾斜，然后轻拍培养瓶瓶壁，使果蝇落入麻醉瓶内，迅速盖好两个瓶塞。将数滴乙醚滴在软木塞的药棉上，一分钟后，果蝇即处于昏迷状态，将其倾倒在酒精擦过的白磁板上，用毛笔轻轻拨动进行观察。当白磁板上的果蝇即将苏醒时，可在麻醉皿的滤纸上滴加乙醚，扣在白瓷板上进行二次麻醉，麻醉的程度依实验需要而定：果蝇翅外展与身体呈 45°角时，表示已麻醉过度，不能复苏。将不需要的果蝇倒入盛有酒精的瓶中。六、果蝇的繁育果蝇在水果摊或果园常可见到，它以生长在水果上的酵母菌为食。故凡可发酵的基质，均可作为果蝇饲料。目前实验室常用的果蝇饲料配方如下： A：糖 6.2g，琼脂 0.62g，水 38mL，煮沸溶解； B：玉米粉 8.25g，水 38mL。 A、B 混合加热煮沸成糊状，加 0.5mL 丙酸，即可分装到培养瓶中。除玉米饲料外，还有米粉饲料和香蕉饲料。 (1)米粉饲料配制：琼脂 0.9—2.5g 加入 100mL 水中，加热煮沸溶解；再加红糖 10g，等溶解后，将 8g 米粉(或麦夫皮)调成糊状倒入，不断搅拌煮沸数分钟，成稀粥状即可分装使用。 (2)香蕉饲料的配制：将熟透的香蕉捣碎，制成香蕉浆(约 50g)；将 1.5g 琼脂加到 48mL 水中煮沸，溶解后拌入香蕉浆，再煮沸后即可分装。此两种饲料易生霉，需加少量防霉剂。果蝇的培养瓶、常用的有牛奶瓶、大中型指管，用纱布包裹的棉花球作瓶塞(或泡沫塑料作瓶塞)。培养瓶先消毒，然后倒入饲料(2cm 厚)，等冷却后，用酒精棉球擦瓶壁，再加入酵母粉少许，插入消毒过的吸水纸，作幼虫化蛹和栖息之用，因此也称栖息纸。七、作业 1 绘雌雄果蝇第一对足外形图(示性梳)。 2 将野生型和几种突变型性状观察的结果

性果状蝇性别眼色体色翅型备注数类型野生型（+)突变型（Vg）突变型（W）突变型（e号）六、作业根据自已的观察，提出观察结果的实验报告，并绘简图表示雌雄果蝇的特点。实验五果蝇睡腺染色体制片及观察一、实验目的学习剖离果蝇幼虫睡腺和压制睡腺染色体标本的方法：观察唾腺细胞的巨染色体。二、实验原理果蝇的睡腺位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近。剖取果蝇唾腺细胞进行制片观察可见到一个由4对染色体的着丝粒结合形成的染色中心，以及向四周伸展的5条染色体臂（X、2L、2R、3L、3R），其中第4对染色体为粒状，与染色中心密切相联，总称为睡腺染色体。果蝇唾腺染色体是一种典型的多线染色体。它是果蝇睡腺细胞核内有丝分裂所致，即核内染色体中的染色线连续复制而染色体并不分裂，结果使每条染色体中的染色线多达500～1000条，其长度和体积分别比其它细胞的染色体长100～200倍、大10002000倍，因此也称巨型染色体。由于每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，因而出现一系列宽窄不同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。不同染色体的横纹数量、形状和排列顺序是恒定的。利用这些特征不仅可以鉴定不同的染色体，还可以结合遗传实验结果进行基因定位。此外，由于其体细胞同源染色体的配对，故易于进行染色体的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。三、材料、仪器与试剂1材料果蝇三龄幼虫。2用具显微镜、双目解剖镜、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒精灯等。3药品试剂无水酒精、冰醋酸、1%醋酸洋红、改良品红、0.7%NaC1、1mo1/L盐酸、蒸馏水。培养基：玉米琼脂培养基。四、实验步骤1幼虫培养为使幼虫长得肥大、嫩白，应避免瓶内幼虫过分拥挤，可置于16～18℃下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即为三龄幼虫，此时虫体肥大，便于解剖，是制备唾腺染色体的最理想时期。2腺体取选取发育良好、虫体肥大的三龄幼虫，置于载玻片上，加几滴0.7%生理盐水，在双目解剖镜下左手持解剖针压住虫体中后部，右手持解剖针按住头部（即口器稍后处），轻轻向前拉动，使头部扯离虫体，从而拉出唾腺。腺体为一对囊状结构，位于食道两侧，由单层细胞构成，在解部镜下成透明状态；腺体侧常有少量泡沫状脂肪体，呈乳白色当剔除：最后留下一对腺体待用。整个部取过程须在生理盐水中进行

性状类型果蝇数性别眼色翅型体色备注野生型（+）突变型（Vg）突变型（W）突变型（e 号）六、作业根据自己的观察，提出观察结果的实验报告，并绘简图表示雌雄果蝇的特点。实验五果蝇唾腺染色体制片及观察一、实验目的学习剖离果蝇幼虫唾腺和压制唾腺染色体标本的方法；观察唾腺细胞的巨染色体。二、实验原理果蝇的唾腺位于幼虫前端的食道两侧和神经球附近。剖取果蝇唾腺细胞进行制片观察，可见到一个由 4 对染色体的着丝粒结合形成的染色中心，以及向四周伸展的 5 条染色体臂（X、2L、2R、3L、3R），其中第 4 对染色体为粒状，与染色中心密切相联，总称为唾腺染色体。果蝇唾腺染色体是一种典型的多线染色体。它是果蝇唾腺细胞核内有丝分裂所致，即核内染色体中的染色线连续复制而染色体并不分裂，结果使每条染色体中的染色线多达 500～1000 条，其长度和体积分别比其它细胞的染色体长 100～200 倍、大 1000～2000 倍，因此也称巨型染色体。由于每条染色体的染色线在不同的区段螺旋化程度不一，因而出现一系列宽窄不同、染色深浅不一或明暗相间的横纹。不同染色体的横纹数量、形状和排列顺序是恒定的。利用这些特征不仅可以鉴定不同的染色体，还可以结合遗传实验结果进行基因定位。此外，由于其体细胞同源染色体的配对，故易于进行染色体的缺失、重复、倒位和易位的细胞学观察和研究。三、材料、仪器与试剂 1 材料果蝇三龄幼虫。 2 用具显微镜、双目解剖镜、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒精灯等。 3 药品试剂无水酒精、冰醋酸、1%醋酸洋红、改良品红、0.7%NaCl、1mol/L 盐酸、蒸馏水。培养基：玉米琼脂培养基。四、实验步骤 1 幼虫培养为使幼虫长得肥大、嫩白，应避免瓶内幼虫过分拥挤，可置于 16～18℃下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即为三龄幼虫，此时虫体肥大，便于解剖，是制备唾腺染色体的最理想时期。 2 腺体剖取选取发育良好、虫体肥大的三龄幼虫，置于载玻片上，加几滴 0.7%生理盐水，在双目解剖镜下左手持解剖针压住虫体中后部，右手持解剖针按住头部（即口器稍后处），轻轻向前拉动，使头部扯离虫体，从而拉出唾腺。腺体为一对囊状结构，位于食道两侧，由单层细胞构成，在解剖镜下成透明状态；腺体侧常有少量泡沫状脂肪体，呈乳白色当剔除；最后留下一对腺体待用。整个剖取过程须在生理盐水中进行