
贵州师范大学《微生物学实验》课程大纲2013级使用)生命科学学院院(部):编制人:翁庆北审核人:适用专业:生命科学、生物技术、生物工程、园艺2013年7月20日
贵州师范大学 《微生物学实验》课程大纲 ( 2013 级使用) 院(部): 生命科学学院 编制人: 翁庆北 审核人:_ 适用专业: 生命科学、生物技术、生物工程、园艺 2013 年 7 月 20 日

《微生物学》实验大纲课程名称:微生物学实验课程代码:2210900006学分:1学时:16适用专业(专业类):生物科学、生物技术、生物工程一、课程的目的与任务微生物学是实践性很强的学科,微生物学实验技术是该学科的重要内容。《微生物学实验》是生物科学相关专业的一门必修的基础性实践教学课程。该课程与《微生物学》理论课紧密结合,是一门重要的技术基础课。通过本课程的教学,使学生较熟练掌握微生物学实验的基本操作技术和初步掌握研究微生物的基本方法。学会无菌操作方法,具有制备培养基的能力,掌握微生物的分离、纯化、观察的基本知识和技能,了解菌种保藏的一般方法。学会干热灭菌箱、高压蒸汽灭菌锅、恒温培养箱的使用:掌握细菌、放线菌、真菌为主要内容的各类微生物细胞基本染色原理和方法以及制片观察技术,熟练掌握显微镜的使用技术,使学生熟悉细菌、酵母菌、霉菌的基本形态结构,比较它们与其它生物的相似和不同之处。通过本实验课的学习,培养学生的观察能力、动手能力和实践操作能力,使学生在实验中更深地理解微生物学基础理论,具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实验技能,为今后的教学、科研及生产工作打下基础。二、实验项目与学时分配实验性质备注学序号实验项目时验综设必选计做做证合V3V1环境中微生物及无菌操作23V培养基制作及灭菌VV3V3微生物的分离纯化和平板菌落计数V24菌落形态观察及菌种保藏VV5革兰氏染色法3V63VV细菌芽孢染色和活细菌运动性观察73VV细菌鞭毛和荚膜观察3VV8细菌生理生化反应3V97霉菌和放线菌形态观察210VV酵母菌的形态观察211VV显微镜直接计数法和大小测定312VV细菌总数和大肠菌群测定133VV化学因素对微生物的影响6VV抗生素的效价测定14V6J15乳酸发酵及酸奶的制作16微生物分离纯化实验设计6VV
《微生物学》实验大纲 课程名称:微生物学实验 课程代码:2210900006 学 分:1 学 时:16 适用专业(专业类):生物科学、生物技术、生物工程 一、课程的目的与任务 微生物学是实践性很强的学科,微生物学实验技术是该学科的重要内容。《微生物学实验》是 生物科学相关专业的一门必修的基础性实践教学课程。该课程与《微生物学》理论课紧密结合,是 一门重要的技术基础课。通过本课程的教学,使学生较熟练掌握微生物学实验的基本操作技术和初 步掌握研究微生物的基本方法。学会无菌操作方法,具有制备培养基的能力,掌握微生物的分离、 纯化、观察的基本知识和技能,了解菌种保藏的一般方法。学会干热灭菌箱、高压蒸汽灭菌锅、恒 温培养箱的使用;掌握细菌、放线菌、真菌为主要内容的各类微生物细胞基本染色原理和方法以及 制片观察技术,熟练掌握显微镜的使用技术,使学生熟悉细菌、酵母菌、霉菌的基本形态结构,比 较它们与其它生物的相似和不同之处。 通过本实验课的学习,培养学生的观察能力、动手能力和实践操作能力,使学生在实验中更深 地理解微生物学基础理论,具有适应于从事相关学科的基础理论研究与实际生产应用的微生物学实 验技能,为今后的教学、科研及生产工作打下基础。 二、实验项目与学时分配 序号 实验项目 学 时 实验性质 备注 验 证 综 合 设 计 必 做 选 做 1 环境中微生物及无菌操作 3 √ √ 2 培养基制作及灭菌 3 √ √ 3 微生物的分离纯化和平板菌落计数 3 √ √ 4 菌落形态观察及菌种保藏 2 √ √ 5 革兰氏染色法 3 √ √ 6 细菌芽孢染色和活细菌运动性观察 3 √ √ 7 细菌鞭毛和荚膜观察 3 √ √ 8 细菌生理生化反应 3 √ √ 9 霉菌和放线菌形态观察 3 √ √ 10 酵母菌的形态观察 2 √ √ 11 显微镜直接计数法和大小测定 2 √ √ 12 细菌总数和大肠菌群测定 3 √ √ 13 化学因素对微生物的影响 3 √ √ 14 抗生素的效价测定 6 √ √ 15 乳酸发酵及酸奶的制作 6 √ √ 16 微生物分离纯化实验设计 6 √ √

合计154114440三、课程的基本内容:实验一环境中微生物及无菌操作1.实验目的:(1)证明环境中存在各种微生物,使学生对微生物有初步的认识:(2)学习和掌握无菌操作技术。(3)比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。2.实验内容:检验空气、尘主、自来水和人体表面的微生物:学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作。实验二培养基制作及灭菌1.实验目的:(1)学习和掌握配制培养基的原理、方法和步骤:(2)了解常用灭菌方法的原理,并熟悉灭菌方法的操作步骤。2.实验内容:根据待分离的微生物类型,选择培养基并配制;并进行高压蒸汽灭菌。学习微生物实验常用玻璃器血(吸管、培养皿、试管、三角瓶等)的清洗、包扎与干热灭菌,为微生物纯系分离作准备。实验三微生物的分离纯化和平板菌落计数1.实验目的:掌握倒平板的方法,正确使用微生物学实验中常用的工具,掌握无菌操作技术和利用平板菌落计数分离纯化微生物的基本原理和方法。2.实验内容:根据待分离的微生物选择分离样品及培养基:将待测样品进行梯度稀释,涂布平板,从环境样品中分离获得微生物纯培养,统计菌落数,计算每待测样品中的活菌数量。实验四菌落形态观察及菌种保藏1.实验自的:识别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌四大类微生物的菌落特征,学习微生物的划线分离,并掌握常用的菌种保藏方法。2.实验内容:根据分离的微生物,描述四大类微生物的菌落特征,学习区分微生物群体形态菌落特征;挑取单菌落进行菌种保藏。实验五革兰氏染色法1.实验自的:学习微生物涂片染色的操作方式:掌握细菌革兰氏染色原理和步骤,了解革兰氏染色法在细菌分类鉴定重要性:学习和巩固油镜的使用。2.实验内容:细菌涂片及革兰氏染色技术,利用油镜观察大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌等常见属细菌个体的形态特征。对未知细菌进行革兰氏染色鉴定。实验六细菌芽孢染色和活细菌运动性观察1.实验目的:掌握细菌的芽孢染色方法,学习观察细菌运动的方法。2.实验内容:学习细菌芽孢染色方法及形态特征观察,用悬滴法观察细菌的运动性,区分布朗运动和鞭毛运动。实验七细菌鞭毛和荚膜观察1.实验自的:掌握鞭毛和荚膜的染色方法,学习观察细菌运动的方法
合计 54 14 40 三、课程的基本内容: 实验一 环境中微生物及无菌操作 1.实验目的: (1)证明环境中存在各种微生物,使学生对微生物有初步的认识; (2)学习和掌握无菌操作技术。 (3)比较来自不同场所与不同条件下细菌的数量和类型。 2.实验内容:检验空气、尘土、自来水和人体表面的微生物;学习斜面接种及穿刺接种等无菌 操作。 实验二 培养基制作及灭菌 1.实验目的: (1)学习和掌握配制培养基的原理、方法和步骤; (2)了解常用灭菌方法的原理,并熟悉灭菌方法的操作步骤。 2.实验内容:根据待分离的微生物类型,选择培养基并配制;并进行高压蒸汽灭菌。学习微生 物实验常用玻璃器皿(吸管、培养皿、试管、三角瓶等)的清洗、包扎与干热灭菌,为微生物纯系分 离作准备。 实验三 微生物的分离纯化和平板菌落计数 1.实验目的:掌握倒平板的方法,正确使用微生物学实验中常用的工具,掌握无菌操作技术和 利用平板菌落计数分离纯化微生物的基本原理和方法。 2.实验内容:根据待分离的微生物选择分离样品及培养基;将待测样品进行梯度稀释,涂布平 板,从环境样品中分离获得微生物纯培养,统计菌落数,计算每待测样品中的活菌数量。 实验四 菌落形态观察及菌种保藏 1.实验目的:识别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌四大类微生物的菌落特征,学习微生物的划线 分离,并掌握常用的菌种保藏方法。 2.实验内容:根据分离的微生物,描述四大类微生物的菌落特征,学习区分微生物群体形态菌 落特征;挑取单菌落进行菌种保藏。 实验五 革兰氏染色法 1.实验目的:学习微生物涂片染色的操作方式;掌握细菌革兰氏染色原理和步骤,了解革兰氏 染色法在细菌分类鉴定重要性;学习和巩固油镜的使用。 2.实验内容:细菌涂片及革兰氏染色技术,利用油镜观察大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球 菌等常见属细菌个体的形态特征。对未知细菌进行革兰氏染色鉴定。 实验六 细菌芽孢染色和活细菌运动性观察 1.实验目的:掌握细菌的芽孢染色方法,学习观察细菌运动的方法。 2.实验内容:学习细菌芽孢染色方法及形态特征观察,用悬滴法观察细菌的运动性,区分布朗 运动和鞭毛运动。 实验七 细菌鞭毛和荚膜观察 1.实验目的:掌握鞭毛和荚膜的染色方法,学习观察细菌运动的方法

2.实验内容:学习细菌鞭毛和荚膜的染色方法,观察细菌鞭毛和荚膜着生方式。实验八细菌生理生化反应1.实验目的:了解细菌鉴定中常用的主要生理生化反应试验法及其原理。2.实验内容:常用生理生化反应所用培养基、各种试剂的配制与灭菌,比较几种常见细菌V.P反应、甲基红反应和吲哚反应的结果:试验菌的液体接种和液体培养:学习用杜氏小管进行糖发酵试验,并比较不同种细菌的糖发酵试验结果。实验九霉菌和放线菌形态观察1.实验目的:学习水浸制片法观察真菌的形态;学习放线菌和霉菌的形态观察方法,了解他们的形态特征,识别常见霉菌、放线菌等代表属的形态特征。2.实验内容:用水浸制片法、玻璃纸法、印片法或插片法等观察真菌、放线菌的形态特征,对常见霉菌和放线菌的几个属,如青霉、毛霉、曲霉和根霉、链霉菌等的菌落形态特征和菌丝、无性产孢结构等形态进行观察。实验十酵母菌的形态观察1:实验自的:了解自然存在的酵母菌及其形态结构,学习酵母菌的形态观察法。2.实验内容:酵母菌水浸片的制备;酵母菌染色和死、活细胞的鉴别和死亡率的测定;酵母个体形态的观察:酵母菌出芽观察实验十一显微镜直接计数法和大小测定1:实验目的:学血球计数板进行微生物计数的原理和方法,学习测微尺测定待测微生物大小的方法2.实验内容:认识测微尺,学习目镜测微尺的标定:用血球计数板和测微尺测定酵母菌的大小、数量。实验十二细菌总数和大肠菌群测定1.实验目的:掌握大肠菌群的多管发酵测定方法、细菌总数测定等微生物卫生学指标。2.实验内容:培养基、试剂的配制与灭菌:样品处理,接种与培养:细菌菌落计数和大肠菌群测定。检测不同样品中大肠菌群的数量,并根据国标进行卫生状况的判断。实验十三化学因素对微生物的影响1.实验目的:了解某些化学药剂对微生物生长的影响。2.实验内容:测定常用化学消毒剂对微生物的作用。实验十四抗生素的效价测定1.实验目的:学习测定抗生素效价的基本原理和方法。2.实验内容:测定待测抗生素样品的效价,并比较不同待测样品的抗生素效价。实验十五乳酸发酵及酸奶的制作1.实验目的:了解酸奶发酵过程中细菌的变化及酸奶的制作原理。2.实验内容:(1)从新鲜酸乳中进行乳酸菌的分离纯化:(2)乳酸发酵及其检测。实验十六微生物分离纯化实验设计
2.实验内容:学习细菌鞭毛和荚膜的染色方法,观察细菌鞭毛和荚膜着生方式。 实验八 细菌生理生化反应 1.实验目的:了解细菌鉴定中常用的主要生理生化反应试验法及其原理。 2.实验内容:常用生理生化反应所用培养基、各种试剂的配制与灭菌,比较几种常见细菌 V.P. 反应、甲基红反应和吲哚反应的结果;试验菌的液体接种和液体培养;学习用杜氏小管进行糖发酵 试验,并比较不同种细菌的糖发酵试验结果。 实验九 霉菌和放线菌形态观察 1.实验目的:学习水浸制片法观察真菌的形态;学习放线菌和霉菌的形态观察方法,了解他们 的形态特征,识别常见霉菌、放线菌等代表属的形态特征。 2.实验内容:用水浸制片法、玻璃纸法、印片法或插片法等观察真菌、放线菌的形态特征,对 常见霉菌和放线菌的几个属,如青霉、毛霉、曲霉和根霉、链霉菌等的菌落形态特征和菌丝、无性 产孢结构等形态进行观察。 实验十 酵母菌的形态观察 1.实验目的:了解自然存在的酵母菌及其形态结构,学习酵母菌的形态观察法。 2.实验内容:酵母菌水浸片的制备;酵母菌染色和死、活细胞的鉴别和死亡率的测定;酵母个 体形态的观察;酵母菌出芽观察; 实验十一 显微镜直接计数法和大小测定 1.实验目的:学习血球计数板进行微生物计数的原理和方法,学习测微尺测定待测微生物大小 的方法 2.实验内容:认识测微尺,学习目镜测微尺的标定;用血球计数板和测微尺测定酵母菌的大小、 数量。 实验十二 细菌总数和大肠菌群测定 1.实验目的:掌握大肠菌群的多管发酵测定方法、细菌总数测定等微生物卫生学指标。 2.实验内容:培养基、试剂的配制与灭菌;样品处理,接种与培养;细菌菌落计数和大肠菌群 测定。检测不同样品中大肠菌群的数量,并根据国标进行卫生状况的判断。 实验十三 化学因素对微生物的影响 1.实验目的:了解某些化学药剂对微生物生长的影响。 2.实验内容:测定常用化学消毒剂对微生物的作用。 实验十四 抗生素的效价测定 1.实验目的:学习测定抗生素效价的基本原理和方法。 2.实验内容:测定待测抗生素样品的效价,并比较不同待测样品的抗生素效价。 实验十五 乳酸发酵及酸奶的制作 1.实验目的:了解酸奶发酵过程中细菌的变化及酸奶的制作原理。 2.实验内容:(1)从新鲜酸乳中进行乳酸菌的分离纯化;(2)乳酸发酵及其检测。 实验十六 微生物分离纯化实验设计

1,实验目的:通过试验设计,学习微生物的分离纯化基本方法和实验过程。2.实验内容:根据待测微生物,按照培养基原则选择适合的培养基,设计微生物分离纯化方案。四、课程的考核1.考核方式:考查2.考核方法:实验考核包括平时成绩、实验报告和操作技能考核,其中平时成绩包括实验课出勤、实验态度、实验纪律与实验卫生、实验课动手等,考查学生实验的主动性,占30%:(1)实验报告,检查学生是否按实验要求独立完成实验,报告撰写是否反映学生能力与素质,考查学生分析问题,解决问题的能力:占40%;(2)实验理论或实验操作技能考核实验理论考核可采取笔试或口试方式进行:实验操作考核采取一个教师对一个学生的方式进行。主要对显微镜检技术、制片染色技术、无菌操作技术及微生物的纯培养技术等基本技能进行考核:考试内容由学生抽签选择其中一项在规定时间内完成。占考试成绩的50%。3.成绩评定:操作技能十实验报告+实验技能考核:总评成绩=平时实验成绩×30%+实验报告×30%+操作技能考试成绩×40%,按优、良、中、及格、不及格五级分制记分;4.考核要求:所有环节独立完成。五、课程参考书、指导书1.沈萍,陈向东主编.微生物学实验,北京:高等教育出版社,20102.周德庆.微生物学实验教程(第三版).高等教育出版社,20133.赵斌、何绍江主编微生物学实验,北京:科学出版社,2002
1.实验目的:通过试验设计,学习微生物的分离纯化基本方法和实验过程。 2.实验内容:根据待测微生物,按照培养基原则选择适合的培养基,设计微生物分离纯化方案。 四、课程的考核 1.考核方式:考查 2.考核方法:实验考核包括平时成绩、实验报告和操作技能考核,其中平时成绩包括实验课出 勤、实验态度、实验纪律与实验卫生、实验课动手等,考查学生实验的主动性,占 30%; (1)实验报告,检查学生是否按实验要求独立完成实验,报告撰写是否反映学生能力与素质, 考查学生分析问题,解决问题的能力;占 40%; (2)实验理论或实验操作技能考核 实验理论考核可采取笔试或口试方式进行;实验操作考核 采取一个教师对一个学生的方式进行。主要对显微镜检技术、制片染色技术、无菌操作技术及微生 物的纯培养技术等基本技能进行考核;考试内容由学生抽签选择其中一项在规定时间内完成。占考 试成绩的 50%。 3.成绩评定: 操作技能+实验报告+实验技能考核; 总评成绩=平时实验成绩×30%+实验报告×30%+操作技能考试成绩×40%,按 优、良、中、及格、不及格五级分制记分; 4.考核要求:所有环节独立完成。 五、课程参考书、指导书 1.沈萍,陈向东主编.微生物学实验,北京:高等教育出版社,2010. 2.周德庆.微生物学实验教程(第三版).高等教育出版社,2013. 3.赵斌、何绍江主编. 微生物学实验,北京:科学出版社,2002