第二章预处理过程及检测 技术
第二章 预处理过程及检测 技术
2.1生物材料预处理概述 口2.1.1动物组织和器官:要先除去结缔组织、脂 肪等非活性部分,然后绞碎,选择适当的溶剂形 成细胞悬液。 ▣2.1.2 植物组织和器官:要先去壳、除脂,再粉 碎,选择适当的溶剂形成细胞悬液
2.1 生物材料预处理概述 2.1.1 动物组织和器官:要先除去结缔组织、脂 肪等非活性部分,然后绞碎,选择适当的溶剂形 成细胞悬液。 2.1.2 植物组织和器官:要先去壳、除脂,再粉 碎,选择适当的溶剂形成细胞悬液
2.1.3 微生物 口胞内:固液分离、 破碎细胞. 口胞外:固液分离、液体. 口2.1.4发酵液、细胞培养液、组织分泌液以及制 成的细胞悬液等:则根据目标产物所处位置不同 进行相应的处理
2.1.3 微生物 胞内:固液分离、破碎细胞. 胞外:固液分离、液体. 2.1.4 发酵液、细胞培养液、组织分泌液以及制 成的细胞悬液等:则根据目标产物所处位置不同 进行相应的处理
2.2固态物料预处理 口2.2.1组织与细胞破碎 口细胞破碎就是采用物理、化学、酶或机械的方 法,在一定程度上破坏细胞壁和细胞膜,设法 使胞内产物最大程度地释放到液相中
2.2 固态物料预处理 2.2.1 组织与细胞破碎 细胞破碎就是采用物理、化学、酶或机械的方 法,在一定程度上破坏细胞壁和细胞膜,设法 使胞内产物最大程度地释放到液相中
2.2.2 方法 1.机 口 (1) 典收送 有限 (2) (3) (4) 四圆“:,回 caigou.com.cn
2.2.2 方法 1. 机械破碎法 (1)高压匀浆法(酵母、细菌细胞) (2)珠磨法 (3)撞击破碎法 (4)超声波震荡破碎细菌细胞:
2.化学法 ▣I 酸碱处理:加稀酸、稀碱、浓盐溶液 ▣化学试剂处理:有机溶剂或表面活性剂(如胆酸 盐、氧化十二烷基吡啶)处理细胞,可使细胞结 构破坏,释放出内容物
2. 化学法 酸碱处理:加稀酸、稀碱、浓盐溶液 化学试剂处理:有机溶剂或表面活性剂(如胆酸 盐、氧化十二烷基吡啶)处理细胞,可使细胞结 构破坏,释放出内容物
3.生物法 (1) 组织自溶法 正常细胞 1 (2) 酶解法 (3) 噬菌体法 2 凋亡小体 自溶 6 巨噬细胞 坏死 凋亡
3.生物法 (1)组织自溶法 (2)酶解法 (3)噬菌体法
4物理法 0) 渗透压冲击法 (高渗透压介质-低渗透压介质) 适用于不具有细胞壁或细胞壁强度较弱细胞的破 碎 ▣冻结-融化法 口冻结-室温缓慢融化,反复多次 口适用于比较脆弱的菌体
4 物理法 渗透压冲击法 (高渗透压介质-低渗透压介质) 适用于不具有细胞壁或细胞壁强度较弱细胞的破 碎 冻结-融化法 冻结-室温缓慢融化,反复多次 适用于比较脆弱的菌体
质粒○ ①重组DNA 含重组IDNA ◆○ 的土壤农杆菌 抗多聚半乳 多聚半乳糖 糖醛酸梅基 醛酸葡基因 因(目的基因 抗多聚半乳糖 土寒农杆萄 醛酸酶基因 培养② 普通誉茄细胞 mRNAI与mRNA2结合 培养③ 多聚半乳锯 抗多聚半乳糖 醛酸酶基因 醛酸酶基因 番茄抗软化培有过程示意图
2.2.3 细胞破碎效果的检测 ▣ 破碎率定义:被破碎的细胞的数量占原始细胞数量 的百分数。 Y〔%)=1o0×[〔wo-w)1wo] 其中No:原细胞数,N:破碎后残存的正常细胞。 N,和N的可通过直接测定法、目的产物测定法和测 定导电率得到
2.2.3 细胞破碎效果的检测 破碎率定义:被破碎的细胞的数量占原始细胞数量 的百分数。 其中N0:原细胞数,N:破碎后残存的正常细胞。 N0和N的可通过直接测定法、目的产物测定法和测 定导电率得到