电泳检测技术 (一)工作原理:所谓电泳,是指带电粒子在电 场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的 不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特 征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定 量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组 份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极 其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制 造的。 ■分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳和 聚丙烯酰胺凝胶电泳
电泳检测技术 ◼ (一)工作原理:所谓电泳,是指带电粒子在电 场中的运动,不同物质由于所带电荷及分子量的 不同,因此在电场中运动速度不同,根据这一特 征,应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定 量分析,或将一定混合物进行组份分析或单个组 份提取制备,这在临床检验或实验研究中具有极 其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制 造的。 ◼ 分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳和 聚丙烯酰胺凝胶电泳
5989:880" 0a9 @动草火条 电泳仪 水平式电泳槽
电泳仪 水平式电泳槽
垂直板电泳仪 11UD
◼ 垂直板电泳仪
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琼脂糖凝胶电泳
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DNA鉴定 ■鉴定亲子关系目前用得最多的是DNA分型鉴定。人的血液、 毛发、唾液、口腔细胞及骨头等都可以用于亲子鉴定,十分 方便。 ■一个人有23对(46条)染色体,同一对染色体同一位置上的 如巢装药精点的隆位类自父秦与母余晶青 一对基因称为等位基因,一殷二个来自父亲, 一个就应与父亲相同,否则就存在疑问了。 ■ 利用DNA进行亲子鉴定,只要作十几至几十个DNA位点作检 测,如果全部一样,就可以确定亲子关系,如果有3个以上的 位点不同,则可排除亲子关系,、有一两个位点不同,则应考 虑基因突变的可能,加做一些位点的检测进行辨别。DNA亲 子鉴定,否定亲子关系的准确率几近100%,肯定亲子关系的 准确率可达到99.99%
DNA鉴定 ◼ 鉴定亲子关系目前用得最多的是DNA分型鉴定。人的血液、 毛发、唾液、口腔细胞及骨头等都可以用于亲子鉴定,十分 方便。 ◼ 一个人有23对(46条)染色体,同一对染色体同一位置上的 一对基因称为等位基因,一般一个来自父亲,一个来自母亲。 如果检测到某个DNA位点的等位基因,一个与母亲相同,另 一个就应与父亲相同,否则就存在疑问了。 ◼ 利用DNA进行亲子鉴定,只要作十几至几十个DNA位点作检 测,如果全部一样,就可以确定亲子关系,如果有3个以上的 位点不同,则可排除亲子关系,有一两个位点不同,则应考 虑基因突变的可能,加做一些位点的检测进行辨别。DNA亲 子鉴定,否定亲子关系的准确率几近100%,肯定亲子关系的 准确率可达到99.99%
使用方法(琼脂糖凝胶电泳为例): ■1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输 出端联接,注意极性不要接反。 ■2.电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小, 根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 ■ 3接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电 压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。 ■4.工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状 态,并拨出电泳插头
(二)使用方法(琼脂糖凝胶电泳为例): ◼ 1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输 出端联接,注意极性不要接反。 ◼ 2.电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小, 根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。 ◼ 3.接通电源,缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电 压为止,设定电泳终止时间,此时电泳即开始进行。 ◼ 4.工作完毕后,应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状 态,并拨出电泳插头
三)注意事项: ■1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物 及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要 应先断电,以免触电。同时要求夜器必须有良好接地端,以 防漏电。 ■2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短 路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有 可能导致衣器损环。 ■ 3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流 量也不同,.其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同 介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 ■4在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以 多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命
(三)注意事项: ◼ 1.电泳仪通电进入工作状态后,禁止人体接触电极、电泳物 及其它可能带电部分,也不能到电泳槽内取放东西,如需要 应先断电,以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端,以 防漏电。 ◼ 2.仪器通电后,不要临时增加或拨除输出导线插头,以防短 路现象发生,虽然仪器内部附设有保险丝,但短路现象仍有 可能导致仪器损坏。 ◼ 3.由于不同介质支持物的电阻值不同,电泳时所通过的电流 量也不同,其泳动速度及泳至终点所需时间也不同,故不同 介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。 ◼ 4.在总电流不超过仪器额定电流时(最大电流范围),可以 多槽关联使用,但要注意不能超载,否则容易影响仪器寿命