实验十补体结合反应 目的要求 1.以鼻疽补体结合反应为例，了解补体结合反应术式的基本环节。 2.能独立运用本血清学反应的知识，作血清学检验。 操作步骤 一、材料准备 溶血 从兽医生物药品厂购买，保存于冰箱中，有效期1年以上，1月之内效 价变动不大，1月可以测一次效价。 (二)补体从兽医生物药品厂购买冻干补体，保存于冰箱，效价可半月测一次。也可 以采3一4只成年雄性豚鼠血，分离血清，混合，保存于冰箱或冷处，24小时内应用。若检 查材料多，需大量补体时，不从心脏采血，可由颈动脉放血于培养皿中，待血液凝固后移于 冰箱次晨分离血清 如当日采血可直接离心分离血清。将混合的新鲜豚鼠血清，加入NaC 达10%，置于冰箱或冷处，保存期可达数日或1周 (三)绵羊颈静脉采血，盛于预先加玻珠的玻璃瓶中（或加有5%柠檬酸钠水溶液的玻 瓶中)，然后，将血分盛于离心管中，以每分钟1500~2000转离心10~15分钟，使红细胞 下沉，吸弃上清液，加3一4倍生理盐水混合，再次离心，每分钟1500转15分钟。这样经 第三次洗涤后，吸弃上清，将下沉的红细胞配成25%红细胞悬浮液（或临用前配制）。配制 好的红细胞下沉液置5~10℃下保存，24 时内可应用。若发现溶血时需重新配制 (四)异疽抗原从兽医生物药品厂购买。 (五)标准血清鼻疽阴、阳性血清由兽医生物药品厂购买。 (六)被检血清采取被检动物血清。分离血清后，用生理盐水稀释10倍，加热灭能， 以破坏其中补体和其中可能含有的抗补体物质。马血清加热至58一59℃，维持30分钟，骤 驴血清加热至6364℃， 维持40分钟 (七)生理 盐水蒸馏水中加入0.85%化学纯氯化钠，经灭菌后使用。 二、预备试验 (一)溶血素滴定将溶血素在水浴箱中加热至56℃、30分钟灭能。用生理盐水配成 1:100的基础稀释液(0.1ml溶血素加入生理盐水9.9ml),取10个试管，按表10-1作各种 稀释1·100 1.5000 然后另取13支试管，按表10-2加入各成分。第1山、12和13管分别为溶血素、补体与 生理盐水对照管。摇振均匀，置37℃水浴箱中，10分钟后取出观察结果：若1~7管红细胞 完全溶解，8管部分溶解，9一13管不溶解。溶血素的效价为1：3000，即能使红细胞完全溶 解的最小溶血素量，称为溶血素的效价，亦称为一个单位。当补体滴定、抗原滴定、正式试 验时，均用两个单位的溶血素（减少1倍稀释）。 (二)溶血素补体滴定按表10-3加入各成分。混合后置37℃水浴箱中，10分钟后取 出检查结果。 补体、溶血素、生理盐水三个对照管均为不溶血（表10-3中12、13、14管）。 溶血系补体效价在有两个单位溶血素存在时，于37℃10分钟能完全溶解2.5%绵羊 红细胞0.5毫升的最小补体量，为一个溶血系补体单位。溶血系补体效价为溶菌系补体测定 提供用量的参考
实验十 补体结合反应 目的要求 1．以鼻疽补体结合反应为例，了解补体结合反应术式的基本环节。 2．能独立运用本血清学反应的知识，作血清学检验。 操作步骤 一、材料准备 （一）溶血素 从兽医生物药品厂购买，保存于冰箱中，有效期 1 年以上，1 月之内效 价变动不大，1 月可以测一次效价。 （二）补体 从兽医生物药品厂购买冻干补体，保存于冰箱，效价可半月测一次。也可 以采 3～4 只成年雄性豚鼠血，分离血清，混合，保存于冰箱或冷处，24 小时内应用。若检 查材料多，需大量补体时，不从心脏采血，可由颈动脉放血于培养皿中，待血液凝固后移于 冰箱次晨分离血清。如当日采血可直接离心分离血清。将混合的新鲜豚鼠血清， 加入 NaCl 达 10％，置于冰箱或冷处，保存期可达数日或 1 周。 （三）绵羊颈静脉采血，盛于预先加玻珠的玻璃瓶中（或加有 5％柠檬酸钠水溶液的玻 瓶中），然后，将血分盛于离心管中，以每分钟 1500～2000 转离心 10～15 分钟，使红细胞 下沉，吸弃上清液，加 3～4 倍生理盐水混合，再次离心，每分钟 1500 转 15 分钟。这样经 第三次洗涤后，吸弃上清，将下沉的红细胞配成 2.5％红细胞悬浮液（或临用前配制）。配制 好的红细胞下沉液置 5～10℃下保存，24 小时内可应用。若发现溶血时需重新配制。 （四）鼻疽抗原 从兽医生物药品厂购买。 （五）标准血清 鼻疽阴、阳性血清由兽医生物药品厂购买。 （六）被检血清 采取被检动物血清。分离血清后，用生理盐水稀释 10 倍，加热灭能， 以破坏其中补体和其中可能含有的抗补体物质。马血清加热至 58～59℃，维持 30 分钟，骡 驴血清加热至 63～64℃，维持 40 分钟。 （七）生理盐水 蒸馏水中加入 0.85％化学纯氯化钠，经灭菌后使用。 二、预备试验 （一）溶血素滴定 将溶血素在水浴箱中加热至 56℃、30 分钟灭能。用生理盐水配成 1:100 的基础稀释液（0.1ml 溶血素加入生理盐水 9.9ml），取 10 个试管，按表 10-1 作各种 稀释度（1:1000～1:5000）。 然后另取 13 支试管，按表 10-2 加入各成分。第 11、12 和 13 管分别为溶血素、补体与 生理盐水对照管。摇振均匀，置 37℃水浴箱中，10 分钟后取出观察结果：若 1～7 管红细胞 完全溶解，8 管部分溶解，9～13 管不溶解。溶血素的效价为 1:3000，即能使红细胞完全溶 解的最小溶血素量，称为溶血素的效价，亦称为一个单位。当补体滴定、抗原滴定、正式试 验时，均用两个单位的溶血素（减少 1 倍稀释）。 （二）溶血素补体滴定 按表 10-3 加入各成分。混合后置 37℃水浴箱中，10 分钟后取 出检查结果。 补体、溶血素、生理盐水三个对照管均为不溶血（表 10-3 中 12、13、14 管）。 溶血系补体效价 在有两个单位溶血素存在时，于 37℃10 分钟能完全溶解 2.5％绵羊 红细胞 0.5 毫升的最小补体量，为一个溶血系补体单位。溶血系补体效价为溶菌系补体测定 提供用量的参考
表10-1溶血素稀释表 管号 溶血素础稀释液(ml) 生理盐水(m 稀释度 0.1 0.9 1:100 2 0.1 1.1 1.:120 3 0.1 1.4 1:15s0 4 67 194 三 1:3000 8 01 34 1:3500 9 39 14000 0 4.9 1:5000 表10-2溶血素滴定表 溶血素 2.5%血红球 120补体 生理盐水 管号 稀释度 (ml) (ml) (ml) 1:00 0.5 1.0 1:120 1.0 、2 1:1500 0.5 1.0 000 0.5 0.5 1.0 9 1H0 05 005 12 0.5 13 0.5 2.0 三)溶南系补体滴定 溶菌系补体滴定时，所用补体量系从溶血系补体单位的前一管 开始。 设溶血系补体单位为1：20补体0.16ml,则滴定溶菌补体时从0.13ml开始，如溶菌 系补体滴定表10-4所示。 溶南系补体效价是在二单位溶血素存在的情况下，阳性血清加抗原的试管完全不溶 血，而阳性血清未加抗原及阴性血清不论有无抗原的试管发生完全溶血所需最少补体量，就 是所测溶菌系补体效价。如表10-4中第五管1：20稀释的补体0.25毫升即为工作量补体。按 下式计算，原补体在使用时应稀释的倍数： 补体稀释倍数（滴定时用的×使用时每管加入量=原补体稀释倍数 测得效价 按上公式计算为：0×05=40 20 即此批补体应作1：40稀释，每管加0.5毫升为一个补体单位
表 10-1 溶血素稀释表 管号 溶血素基础稀释液（ml） 生理盐水（ml） 稀释度 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.9 1.1 1.4 1.7 1.9 2.4 2.9 3.4 3.9 4.9 1:1000 1:1200 1:1500 1:1800 1:2000 1:2500 1:3000 1:3500 1:4000 1:5000 表 10-2 溶血素滴定表 管号 溶血素 2.5%血红球 （ml） 1:20 补体 （ml） 生理盐水 稀释度 ml （ml） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 1:1000 1:1200 1:1500 1:1800 1:2000 1:2500 1:3000 1:3500 1:4000 1:5000 1:100 — — 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — — 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — 0.5 — 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.5 1.5 2.0 （三）溶菌系补体滴定 溶菌系补体滴定时，所用补体量系从溶血系补体单位的前一管 开始。设溶血系补体单位为 1:20 补体 0.16ml，则滴定溶菌补体时从 0．13ml 开始，如溶菌 系补体滴定表 10-4 所示。 溶菌系补体效价 是在二单位溶血素存在的情况下，阳性血清加抗原的试管完全不溶 血，而阳性血清未加抗原及阴性血清不论有无抗原的试管发生完全溶血所需最少补体量，就 是所测溶菌系补体效价。如表 10-4 中第五管 1:20 稀释的补体 0.25 毫升即为工作量补体。按 下式计算，原补体在使用时应稀释的倍数： 补体稀释倍数（滴定时用的） 测得效价 按上公式计算为： 0.5 40 0.25 20 = 即此批补体应作 1：40 稀释，每管加 0.5 毫升为一个补体单位。 ×使用时每管加入量=原补体稀释倍数
(四)抗原滴定滴定抗原时需用灭能的鼻疽两个（强、弱）阳性血清与两个阴性血清 先将各种血清按血清稀释表分别做成1：10、1：25、1：50、1：75和1：100的稀释 每一份血清的每一稀释度，都要按抗原滴定表表实106所示进行操作 个抗原单位是在强阳性血清的最高稀释度中完全抑制溶血（即完全不溶血）入、在弱阳 性血清管中发生0%溶血，而在阴性血清管中完全溶血的最小抗原量。例如抗原滴定结果 记录表见表10-7，抗原的效价为1：150。 表10-3溶血系补体滴定表 管号 1:20补体 生理盐水 二单位溶血素 25%血红球 (ml) (ml) (ml) (ml) 0.10 1.40 0.5 0.5 137 3 0.16 134 05 0.19 131 0.s 02 125 9 > 1.22 89 10 0.37 1.13 0 0.5 0.40 12 05 13 1.50 0.5 14 0.5 表10-5血清稀释表 管号 血清(ml) 生理盐水(ml) 稀释度 1 90 1:10 0.4 125 、2 98 150 0.2或0.1 14.8或7.4 175 1H00 (五)正式试验正式试验需已知强阳性血清和已知阴性血清作对照。被检血洁和溶血 素、对照血清均应灭能，按补体结合反应正式试验表表实10-8操作。从预备试验到正式试 验，所用的细胞、补体、抗原、己知阳性血清和已知阴性血清，都必须是同一批，决不能中 途更换另一批，所用补体若为新鲜的豚鼠血清，则从预备试验到正式试验必须在24小时内 做完，以免补体失效。 每一份被检血清要作三管（表中的1、2、3管），其中1是正式试验管，2、3为检验血 清对照管。结果见表10-9
（四）抗原滴定 滴定抗原时需用灭能的鼻疽两个（强、弱）阳性血清与两个阴性血清， 先将各种血清按血清稀释表分别做成 1：10、1：25、1：50、1：75 和 1：100 的稀释。 每一份血清的每一稀释度，都要按抗原滴定表表实 10-6 所示进行操作。 一个抗原单位是在强阳性血清的最高稀释度中完全抑制溶血（即完全不溶血）、在弱阳 性血清管中发生 50％溶血，而在阴性血清管中完全溶血的最小抗原量。例如抗原滴定结果 记录表见表 10-7，抗原的效价为 1:150。 表 10-3 溶血系补体滴定表 管号 1：20 补体 （ml） 生理盐水 （ml） 二单位溶血素 （ml） 2.5%血红球 （ml） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 0.10 0.13 0.16 0.19 0.22 0.25 0.28 0.31 0.34 0.37 0.40 1.00 — — 1.40 1.37 1.34 1.31 1.28 1.25 1.22 1.19 1.16 1.13 1.10 1.00 1.50 2.00 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — 0.5 — 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 表 10-5 血清稀释表 管号 血清（ml） 生理盐水（ml） 稀释度 1 2 3 4 5 1.0 0.4 0.2 0.2 或 0.1 0.1 9.0 9.6 9.8 14.8 或 7.4 9.9 1：10 1:25 1:50 1:75 1:100 （五）正式试验 正式试验需已知强阳性血清和已知阴性血清作对照。被检血清和溶血 素、对照血清均应灭能，按补体结合反应正式试验表表实 10-8 操作。从预备试验到正式试 验，所用的细胞、补体、抗原、已知阳性血清和已知阴性血清，都必须是同一批，决不能中 途更换另一批，所用补体若为新鲜的豚鼠血清，则从预备试验到正式试验必须在 24 小时内 做完，以免补体失效。 每一份被检血清要作三管（表中的 1、2、3 管），其中 1 是正式试验管，2、3 为检验血 清对照管。结果见表 10-9
表10-9正式试验结果记录表 溶血百分数 记录为 结果是 0-10% 10-409% 40-509% 弱阳性反应 50-70% 可凝反应 70-909% 可凝反应 90-1009 阴性反应 第二次加温完毕后，取出立即作第一次观察。对照管与下所述完全相符，可作为正式试 验的第一次观察。再置室温静置12小时后，作第二次检查，详细记录结果。为了正确判定 反应结果，按下述方法配制标准比色管，以断定溶血之程度 业伦汽淀的细胞125加入蒸馏水875m,使红细跑完全崩解再加入085g NaC1,制成1.25%生理盐水溶血液。 2.取离心沉淀的红细胞1.25毫升加入于Q.85%生理盐水98.75ml中，制成125%生理盐 红细胞悬浮液。 3.按表实10-10加入各成份，即成不同溶血百分串的标准溶血管，并与正式试验管同时 置室温12小时，然后与试验管比较。 表10-10标准溶血管的制备表 溶血百分率及 量 、管号 0% 10% 2 40% 8% 90% 109% 成分 1:10健马血清(ml 0 03 0. 0. 0. 05 抗原一个单位(ml) 《 0.5 0.5 溶血素二单位(ml) 0.5 0.5 0.5 0.5 1.25%生理盐水溶血液(ml 03 0.4 0.5 0.8 1.25%红细胞是浮液(ml) 04 0.3 02 0
表 10-9 正式试验结果记录表 溶血百分数 记录为 结果是 0—10% 10—40% 40—50% 50—70% 70—90% 90—100% ++++ +++ ++ + ± - 强阳性反应 阳性反应 弱阳性反应 可凝反应 可凝反应 阴性反应 第二次加温完毕后，取出立即作第一次观察。对照管与下所述完全相符，可作为正式试 验的第一次观察。再置室温静置 12 小时后，作第二次检查，详细记录结果。为了正确判定 反应结果，按下述方法配制标准比色管，以断定溶血之程度。 标准比色管的制备 1.取离心沉淀的红细胞 1.25ml，加入蒸馏水 98.75ml，使红细胞完全崩解，再加入 0.85g NaCl，制成 1.25％生理盐水溶血液。 2.取离心沉淀的红细胞 1.25 毫升加入于 0.85％生理盐水 98.75ml 中，制成 l.25％生理盐 红细胞悬浮液。 3.按表实 10-10 加入各成份，即成不同溶血百分串的标准溶血管，并与正式试验管同时 置室温 12 小时，然后与试验管比较。 表 10-10 标准溶血管的制备表 溶血百分率及 量 管号 成分 0% 1 10% 2 20% 3 30% 4 40% 5 50% 6 60% 7 70% 8 80% 9 90% 10 100% 11 1：10 健马血清（ml） 抗原一个单位（ml） 溶血素二单位（ml） 1.25%生理盐水溶血液（ml） 1.25%红细胞悬浮液（ml） 0.5 0.5 0.5 — — 0.5 0.5 0.5 0.1 0.9 0.5 0.5 0.5 0.2 0.8 0.5 0.5 0.5 0.3 0.7 0.5 0.5 0.5 0.4 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.6 0.4 0.5 0.5 0.5 0.7 0.3 0.5 0.5 0.5 0.8 0.2 0.5 0.5 0.5 0.9 0.1 0.5 0.5 0.5 1.0 —
表10-4溶菌系补体滴定表 用 各列的试验管 血清对照管 共同对照管 量 号 3 6 8 91 9 .3.7 .64 9 228 282 .4.c 0510 第一列 8 85 83 83 8 阳性血清 3 8 8 一 第三列 8 83 83 83 8 二 二 阴性血情 3 88 88 置37℃水浴锅中20分钟 面索二单位 83 83 g g 置37℃水浴锅 20分钟 # 血清第列 注：不溶血，++：75%溶血：+：23%溶血，一：完全溶血
表 10-4 溶菌系补体滴定表 管 用 量 号 成 分 各列的试验管 血清对照管 共同对照管 1 2 3 4 5 6 7 8 91 92 93 94 1 2 3 4 5 各列 的试 验管 均加 1:20 补体 （ml ） 生理 盐水 （ml ） 0.1 3 0.3 7 0.1 6 0.3 4 0.1 9 0.3 1 0.2 2 0.2 8 0.2 5 0.2 5 0.2 8 0.2 2 0.3 4 0.1 9 0.3 4 0.1 6 — 1. 0 — 1. 0 — 1. 0 — 1. 0 — 1. 0 0. 5 1. 5 — 1. 5 — 2. 0 0. 5 1. 0 阳 性 血 清 第 一 列 1:10 血清 （ml ） 抗原 （工 作 量） （ml ） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 1. 0 — — — — — — — — 1. 0 — — — — — — — — 第 二 列 1:10 血清 （ml ） 生理 盐水 （ml ） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — — — — — — — — — — — — — — — — — — 阴 性 血 情 第 三 列 1:10 血清 （ml ） 抗原 （工 作 量） （ml ） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — — — — 1. 0 — — — — — — — — — — — — — 第 四 列 1:10 补体 （ml ） 生理 盐水 （ml ） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — — — — — — — — — — — — — — — — — — 置 37℃水浴锅中 20 分钟 溶血素二单位 （ml） 2.5%绵羊红血 球（ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — 0. 5 — 0. 5 — 0. 5 — 0. 5 — 0. 5 — 0. 5 0. 5 0. 5 — 0. 5 — 0. 5 置 37℃水浴锅中 20 分钟，观察结果 阳性 第一列 有抗原 血清 第二列 无抗原 # ++ + # ++ # + # — # — # — # — # — # — # — # — # — # — # — # — # — # — 阴性 第三列 有抗原 血清 第四列 无抗原 # # ++ + ++ + ++ ++ + + — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — — 注：#：不溶血，+++：75%溶血；+：25%溶血，—：完全溶血
表106抗原滴定表 抗原滴定（每一血清的各个稀释度都要做） 共同对照管（只共同微 成 4 5 6 8 (9 (10 1 234 6 稀释 0品 0.5 05 0.5 05 0. 0.5 0.5 0.5 0 0 0 0.5 0.5 0.5 0.5 -o 生理盐水 1.0 置37℃水浴锅中20分钟 云单 0.5 0.50.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 05 05 05 05 05 (ml) 生理盐水 0.5 0.5 置37℃水锅中20分钟，取出检查，并记录结 活用试管数：抗原滴定管：有8个抗原稀释度，4个血清，每个血清有5个稀释度，共需8×4×5=160管 血清树照管：有2管4个血清，每个血清只用1个稀和度，共需2×4×1感管。 以上共需174管
表 10-6 抗原滴定表 管 用 量 号 成 分 抗原滴定（每一血清的各个稀释度都要做） 血清对照管 （每一血清 只做一个 1： 10 的稀释 度） 共同对照管（只共同做一 套） 1 2 3 4 5 6 7 8 （9 ） （10 ） 1 2 3 4 5 6 抗 原 稀释 度 （ml ） 1:1 0 1:5 0 1:1 00 1:1 50 1:2 00 1:3 00 1:1 00 1:5 00 — — 1： 10 1： 10 — — — — 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — — 0. 5 0. 5 — — — — 稀释血清 （ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — — — — — — 一个溶菌 系补体单 位（ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — 0.5 — 0. 5 0. 5 — 1. 0 — 生理盐水 — — — — — — — — 1.0 0.5 0. 5 0. 5 1. 0 1. 0 0. 5 1. 5 置 37℃水浴锅中 20 分钟 二单溶血 素（ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — 0.5 — 0. 5 0. 5 1. 0 — — 2.5%绵羊 红血球 （ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0. 5 0. 5 0. 5 0. 5 0. 5 0. 5 生理盐水 — — — — — 0.5 — — 0.5 — 0. 5 — — — 0. 5 0. 5 置 37℃水浴锅中 20 分钟，取出检查，并记录结果 需用试管数：抗原滴定管：有 8 个抗原稀释度，4 个血清，每个血清有 5 个稀释度，共需 8×4×5=160 管。 血清对照管：有 2 管 4 个血清，每个血清只用 1 个稀释度，共需 2×4×1=8 管。 共同对照管：6 管 以上共需 174 管
表10-7抗原滴定结果记录 抗原滴定（每一血清的各个稀释度都要做） 血清对照组 共同对照管 12345678 (9)(10)1234 56 0 0 460 # 血清阳性血清两个阴 说明抗原 说明抗原天 说明溶血系 说明溶血素 说明补 抗补体 (无补体时) 性 血清阳性血清两个阴性血清造 况明血清本身不溶中 不抗补体 过阳性
表 10-7 抗原滴定结果记录 抗原滴定（每一血清的各个稀释度都要做） 血清对照组 共同对照管 管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 （9） （10） 1 2 3 4 5 6 抗 原 稀 释 度 1： 10 1： 50 1： 100 1： 150 1： 200 1： 300 1： 400 1： 500 1： 10 强 阳 性 血 清 — — — + + ++ ++ + ++ + — # — # # — — — 弱 阳 性 血 清 ++ ++ ++ ++ + ++ + # # # — # 说 明 抗 原 不 溶 血 说 明 抗 原 不 抗 补 体 说 明 溶 血 系 健 全 说 明 溶 血 素 无 补 体 时 不 溶 血 说 明 补 体 无 溶 血 素 时 不 溶 血 说 明 盐 水 不 溶 血 两 个 阴 性 血 清 # # # # # # # # — # 1： 25 强 阳 性 血 清 — — — — + ++ # # 说 明 血 清 本 身 不 溶 血 说 明 血 清 不 抗 补 体 弱 阳 性 血 清 ++ ++ ++ ++ ++ + # # # 两 个 阴 性 血 清 # # # # # # # # 1： 50 强 阳 性 血 清 — — + + ++ ++ + # # 弱 阳 性 血 清 ++ ++ ++ + ++ + # # # # 两 个 阴 性 血 清 # # # # # # # # 1： 75 强 阳 性 血 清 + + ++ ++ + ++ + # # # 弱 阳 性 血 清 ++ ++ + # # # # # # 两 个 阴 性 血 清 # # # # # # # # ( 无 溶 血 素 时) ( 无 补 体 时)
强阳性血清阳性血清 个阴性 注
1： 10 0 强 阳 性 血 清 ++ ++ ++ + # # # # # 弱 阳 性 血 清 ++ + # # # # # # # 两 个 阴 性 血 清 # # # # # # # # 注：“—”完全不溶血，“+”25%溶血，“+++”75%溶血，“#”100%溶血
表10-8补体结合反应正式试验表 号及用 被检血清 各项对照管（无论是多少个被检血清都只做一套） 用量 阳性血清对照 阴性血清对照 其他对昭的 2 45 789101 213 15 1:10血消0.51.01.00.51.01.0051.01.0- 一一一 (mD) 05- 0.5- 05- -1.01.0- -个抗原0.505-0505-0505-0.505-1.0- 系补体单 0.5 0.5 0.51.0 0.50.51.5 1.0 位(ml) 生理盐小 (ml) 置37℃水浴锅中20分钟 二单位溶 0.50.5 0305 0.50.5 1.0 血素(ml 0.5 0.57 0.5 0.5 0.5 0.5 050.5 050.50.5 0.50.50.5 0.5 2.5%绵主 红血球 (mD) 0 0.5 生理盐水 (ml) 置37℃水溶锅中20分钟，取出检查，并记录结果 各对照鹤 应有结果 (ml) 溶血 不 全不 一完全溶血 完 一完 全 全 全 不 完全溶血 不 全溶血 完全溶血 不 完全不 浴血 溶 血 血 血 血 溶
表 10-8 补体结合反应正式试验表 管号及用 途 用量 成 分 被检血清 各项对照管（无论是多少个被检血清都只做一套） 正式 试验 管 被检血清 对照管 阳性血清对照 阴性血清对照 其他对照管 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 1：10 血清 （ml） 一个抗原 单位（ml） 一个溶菌 系补体单 位（ml） 生理盐水 （ml） 0.5 1.0 1.0 0.5 1.0 1.0 0.5 1.0 1.0 — — — — — — 0.5 — — 0.5 — — 0.5 — — — 1.0 1.0 — — — 0.5 0.5 — 0.5 0.5 — 0.5 0.5 — 0.5 0.5 — 1.0 — — — — 0.5 — — 0.5 — — 0.5 1.0 — 0.5 0.5 1.5 1.0 置 37℃水浴锅中 20 分钟 二单位溶 血素（ml） 2.5% 绵 羊 红血球 （ml） 生理盐水 （ml） 0.5 0.5 — 0.5 0.5 — 0.5 0.5 — 0.5 0.5 — — — 1.0 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 — — 0.5 — — 0.5 — — 0.5 — — 0.5 0.5 0.5 — 置 37℃水浴锅中 20 分钟，取出检查，并记录结果 各对照管 应有结果 （ml） — 完 全 溶 血 # 完 全 不 溶 血 # 完 全 不 溶 血 — 完 全 溶 血 # 完 全 不 溶 血 — 完 全 溶 血 — 完 全 溶 血 # 完 全 不 溶 血 — 完 全 溶 血 — 完 全 溶 血 # 完 全 不 溶 血 # 完 全 不 溶 血 # 完 全 不 溶 血 # 完 全 不 溶 血