急性经口毒性实验 (Acute Oral Toxicity Test)
实验目的： ▣（一）通过本次实验掌握经口灌胃技术，半 数致死剂量的意义。 ▣（二）通过本次实验学习半数致死剂量的计 算及毒性判定
二、测定方法： 口本实验以灌胃方式测定敌敌畏DDV (80g/100ml)的半数致死量 (LD50)
(一)实验动物与分组： ▣首选健康成年小鼠(18g~25g)和大鼠 (180g220g) ▣实验前动物要在实验环境中适应3~5d时 间，以了解其正常活动情况和健康状况，并 淘汰不健康或体重不符合要求的动物。 日本次实验取体重18-25g的小鼠，实验时 将小鼠称体重、编号、按随机分组原则，将 实验动物分成5组，每组8只
(二)剂量选择： ▣首先查阅与受试化学物结构及理化性质相近似 的化学物的LD50,以此值作为受试化学物的预 期毒性中值，即中间剂量组，再上下各推1-2 个剂量组，进行预实验。 口各剂量组的间距可根据LD5o计算方法要求按等 比级数或等差级数安排。 口本实验用机率单位法计算LD5o,要求按等比级 数排列，常用1：0.8，如敌敌畏的最高剂量为 125mg/kg,其次剂量组为125mg/kg *0.8=100mg/kg,依次类推为80、64 和51.2mg/kg五个剂量组
（三)受试化学物配制与稀释 ▣1.溶剂： ■水溶性受试化学物以蒸馏水为溶剂配制成溶 液。 ■脂溶性受试化学物以吐温-80、二甲基亚砜、 植物油等配制
(三)受试化学物配制与稀释 ▣2.受试物的稀释 口等容量稀释法，各个剂量组的动物均给予相同单位 体重体积的受试化学物，按照事先设计的剂量分别 稀释配制为几种不同的浓度的受试物溶液。 口例如本次实验五个剂量组： ■各剂量组动物给予相同单位体重体积受试物均 为10ml/kg
等容量稀释法 ▣D:设计的染毒剂量，mg/kg ▣V:动物给药量（相同单位体重体积）均为 10ml/kg 口X:各组需配制的受试物溶液的浓度(mg/ml) X D ▣如：第一组染毒剂量D=51.2mg/kg,动物按 V=10ml/kg体重给药，配制的受试物浓度为 X=51.2mg/10ml
口依次类推：五个组所需配制的受试物浓度分别为 ■第一组：51.2mg/10ml ■第三组：64mg/10ml ■第三组：80mg/10ml ■第四组：100mg/10ml ■第五组：125mg/10ml 口各剂量组小鼠灌胃容量计算： 小鼠灌胃容量Vml=体重(g)×10ml/1000g 各剂量组小鼠染毒剂量： 小鼠染毒剂量=Vml×各组的受试物浓度(mg/10ml)
（四)灌胃方法： ▣小鼠灌胃法：左手拇指和食指捏住小鼠头部两耳后 皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手上，使小鼠腹 部向上，尽量使其体位垂直，注意使动物的上消化 道固定成一直线。右手持连着灌胃导针的注射器， 将灌胃针由动物口腔侧插入，避牙齿，沿咽后壁缓 缓滑人食管。若遇阻力，可轻轻上下滑动探索， 旦感觉阻力消失，即深人至胃部，一般进针深度小 鼠2.5~4cm,随后将受试物溶液注入。如遇动 物挣扎，应停止进针或将针拔出，千万不能强行插 入，以免穿破食管，甚至误入气管，导致动物立即 死亡。小鼠一次灌胃体积为10-20ml/kg
