分光光度法 第五章
分光光度法 第五章
第一节 紫外-可见分光光度法 根据物质对波长为200～760 nm 波长范围的光吸收特性所建立的一种 定性、定量和结构分析的方法
第一节 紫外-可见分光光度法 根据物质对波长为200～760 nm 波长范围的光吸收特性所建立的一种 定性、定量和结构分析的方法
紫外-可见吸收光谱 分子的价电子吸收了光的能量， 由低能量的基态跃迁到高能量的激 发态，在相应波长位置出现吸收带 形成的光谱，称为紫外-可见吸收光 谱
紫外-可见吸收光谱 分子的价电子吸收了光的能量， 由低能量的基态跃迁到高能量的激 发态，在相应波长位置出现吸收带 形成的光谱，称为紫外-可见吸收光 谱
一、基本原理 （一） Lambert -Beer定律 物质对单色光吸收特性与 浓度、液层厚度关系定律 ECL I I A l gT l g 0 = − = − =
一、基本原理 （一） Lambert -Beer定律 物质对单色光吸收特性与 浓度、液层厚度关系定律 ECL I I A l gT l g 0 = − = − =
A = Ecl El A c% = 摩尔吸收系数ε 百分吸收系数 1% E1cm C= 1mol/L l= 1cm C=1%(g/100ml) l= 1cm
A = Ecl El A c% = 摩尔吸收系数ε 百分吸收系数 1% E1cm C= 1mol/L l= 1cm C=1%(g/100ml) l= 1cm
二、紫外-可见分光光度计 1、光源 紫外区 氢灯或氘灯 可见区 钨灯或卤钨灯 2、单色器 棱镜或光栅 3、吸收池 石英或玻璃 4、检测器 光电池、光电管、光电 倍增管、光二极管阵列检测器
二、紫外-可见分光光度计 1、光源 紫外区 氢灯或氘灯 可见区 钨灯或卤钨灯 2、单色器 棱镜或光栅 3、吸收池 石英或玻璃 4、检测器 光电池、光电管、光电 倍增管、光二极管阵列检测器
紫外-可见分光光度计的校正 波长 汞灯、氘灯、钬玻璃 吸收度 重铬酸钾的硫酸溶液 杂散光 碘化钠和亚硝酸钠溶液 吸收池误差
紫外-可见分光光度计的校正 波长 汞灯、氘灯、钬玻璃 吸收度 重铬酸钾的硫酸溶液 杂散光 碘化钠和亚硝酸钠溶液 吸收池误差
三、紫外-可见吸收光谱与结构的关系 （一） 紫外-可见吸收光谱 以波长为横坐标，以吸收度 为纵坐标所绘制的曲线
三、紫外-可见吸收光谱与结构的关系 （一） 紫外-可见吸收光谱 以波长为横坐标，以吸收度 为纵坐标所绘制的曲线
3 min 入h 入ani的 图12-4 吸收光谱示意图 1.吸收峰2.谷3.肩蜂4.末端吸收
特征参数 （1）最大吸收波长（max） （2）最大吸收波长处的吸收系数 1% E1cm （3）最小吸收波长（ min） （4）末端吸收
特征参数 （1）最大吸收波长（max） （2）最大吸收波长处的吸收系数 1% E1cm （3）最小吸收波长（ min） （4）末端吸收