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郑州职业技术学院:《病原生物与免疫学基础》实验六 细菌各论试验(一)

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一、实验目的 1.观察病原性球菌与肠道杆菌形态和培养物。 2.说出血浆凝固酶试验、抗链球菌溶血素O试验的原理、结果判断及意义。
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课时授课计划 审签 编号20 授课时间及单元 授课专业及班级 组织教学:考勤、填写教学日志 基本课题:实验六细菌各论试验(一) 教学目标:1.能初步辨认并画出示教细菌的镜下形态。 2.观察和记录血浆凝固试验、抗链“O”试验、肥达氏 试验的结果,并对结果作出解释。(重点、难点) 3.能初步进程脓汁标本涂片检査及粪便肠道病原菌分离 鉴定 教学内容 教学设计 时间(分) 复习旧课: 怎样鉴别肠道致病菌与非致病菌。 实验六细菌各论试验(一) 、实验目的 实验内容 (一)常见球菌、肠道杆菌 请同学边观察边画图。25 形态及培养物观察 (二)脓汁标本革兰氏染色 仔细观察,提出疑问。10 及病原体分离鉴定 (三)血浆凝固酶试验 教师示教,学生观察。10

课 时 授 课 计 划 审签 编号 20 授课时间及单元 授课专业及班级 组织教学:考勤、填写教学日志 1 基本课题:实验六 细菌各论试验(一) 教学目标:1.能初步辨认并画出示教细菌的镜下形态。 2.观察和记录血浆凝固试验、抗链“O”试验、肥达氏 试验的结果,并对结果作出解释。(重点、难点) 3.能初步进程脓汁标本涂片检查及粪便肠道病原菌分离 鉴定。 教学内容 教学设计 时间(分) 复习旧课: 4 怎样鉴别肠道致病菌与非致病菌。 实验六 细菌各论试验(一) 一、实验目的 二、实验内容 (一)常见球菌、肠道杆菌 请同学边观察边画图。 25 形态及培养物观察 (二)脓汁标本革兰氏染色 仔细观察,提出疑问。 10 及病原体分离鉴定 (三)血浆凝固酶试验 教师示教,学生观察。 10

(四)抗链球菌溶血素O 教师示教,学生观察。15 试验乳胶法 (五)肥达反应 1.认真巡视、仔细观察。30 2.强调滴管的使用及注 意无菌操作 小结:总结实验中问题。 4 布置作业与预习 作业:实验报告。 预习:第三节第四节第五节 课后分析

(四)抗链球菌溶血素 O 教师示教,学生观察。 15 试验-乳胶法 (五)肥达反应 1.认真巡视、仔细观察。30 2.强调滴管的使用及注 意无菌操作。 小结 :总结实验中问题。 4 布置作业与预习 1 作业:实验报告。 预习:第三节 第四节 第五节 课后分析

实验六细菌各论试验(一) 、实验目的 观察病原性球菌与肠道杄菌形态和培养物 2.说出血浆凝固酶试验、抗链球菌溶血素O试验的原理、结果判断及 意义。 3.学会脓汁标本的染色,知道其病原体的鉴定步骤。 4.判断肥达反应结果,分析其临床意义。 、实验内容 (一)常见球菌、肠道杆菌形态和培养物观察。 1.形态观察:葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈色氏菌及淋病 奈色氏菌、大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌的革兰氏染色标本片, 观察形态、排列及染色性。 2.菌落特征观察 (1)葡萄球菌在普通琼脂平板、血平板上的生长情况。 (2)链球菌在血液琼脂平板上的的生长情况。 (3)肺炎链球菌在血液琼脂平板上的的生长情况 (4)大肠杄菌、志贺氏菌、沙门氏菌、变形杄菌在血平板及肠道选择性 培养基的生长情况。 3.肠道杆菌的生化反应观察:大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆

实验六 细菌各论试验(一) 一、实验目的 1.观察病原性球菌与肠道杆菌形态和培养物。 2.说出血浆凝固酶试验、抗链球菌溶血素 O 试验的原理、结果判断及 意义。 3.学会脓汁标本的染色,知道其病原体的鉴定步骤。 4.判断肥达反应结果,分析其临床意义。 二、实验内容 (一)常见球菌、肠道杆菌形态和培养物观察。 1.形态观察:葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌、脑膜炎奈色氏菌及淋病 奈色氏菌、大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌的革兰氏染色标本片, 观察形态、排列及染色性。 2.菌落特征观察 (1)葡萄球菌在普通琼脂平板、血平板上的生长情况。 (2)链球菌在血液琼脂平板上的的生长情况。 (3)肺炎链球菌在血液琼脂平板上的的生长情况。 (4)大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆菌在血平板及肠道选择性 培养基的生长情况。 3.肠道杆菌的生化反应观察:大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、变形杆

菌在KIA、半固体上的生长现象以及硫化氢、靛基质的产生。 (二)脓汁标本革兰氏染色、病原体分离鉴定。 对混有葡萄球菌的脓汁标本进行革兰氏染色,并进一步了解细菌鉴定的 一般程序:直接涂片一分离培养一生化反应鉴定一药敏实验一结果报告 (三)血浆凝固酶试验 取未稀释的兔血浆和盐水各一滴分别滴于载玻片上,挑取试验菌分别与 它们混匀,立即观察结果。 四)抗链球菌溶血素O试验一胶乳法 1.血清标本用生理盐水1:50稀释。56度灭活30分钟。 2.在反应板各格子上分别滴加稀释灭活血清以及阳性和阴性对照血清1 滴,各再滴加溶血素“O”溶液1滴,轻轻摇动2分钟。 3.滴加抗链球菌溶血素O胶乳试剂1滴,轻轻摇动8分钟。 有清晰凝集者为阳性。 (五)肥达反应 病人血清 将各排待检血清 各排分别加入伤寒杆菌 分成四排 进行倍比稀释 H、“O”菌液、甲 乙型副伤寒菌液 7℃24h 观察结果

菌在 KIA、半固体上的生长现象以及硫化氢、靛基质的产生。 (二)脓汁标本革兰氏染色、病原体分离鉴定。 对混有葡萄球菌的脓汁标本进行革兰氏染色,并进一步了解细菌鉴定的 一般程序:直接涂片—分离培养—生化反应鉴定—药敏实验—结果报告。 (三)血浆凝固酶试验 取未稀释的兔血浆和盐水各一滴分别滴于载玻片上,挑取试验菌分别与 它们混匀,立即观察结果。 (四)抗链球菌溶血素 O 试验—胶乳法 1.血清标本用生理盐水 1:50 稀释。56 度灭活 30 分钟。 2.在反应板各格子上分别滴加稀释灭活血清以及阳性和阴性对照血清 1 滴,各再滴加溶血素“O”溶液 1 滴,轻轻摇动 2 分钟。 3.滴加抗链球菌溶血素 O 胶乳试剂 1 滴,轻轻摇动 8 分钟。 4.有清晰凝集者为阳性。 (五)肥达反应 病人血清 将各排待检血清 各排分别加入伤寒杆菌 分成四排 进行倍比稀释 “H”、“O”菌液、甲、 乙型副伤寒菌液 观察结果 37℃24h

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