TLC在生药鉴定中的应用
TLC在生药鉴定中的应用
实验目的 1.熟悉薄层色谱(TLC)的操作方法及注意事项； 2.以黄连与黄柏为例，了解TLC鉴别在生药中 的应用
实验目的 1. 熟悉薄层色谱(TLC)的操作方法及注意事项; 2. 以黄连与黄柏为例，了解TLC鉴别在生药中 的应用
预习要点 ■实验材料的基源原、部位、主成分、药效？ ■TLC分离原理？硅胶G、H、GF254? ■对照物质种类？适用范围？ ■CRS纯度要求？
预习要点 实验材料的基源原、部位、主成分、药效？ TLC分离原理？硅胶G、H、GF254？ 对照物质种类？适用范围？ CRS纯度要求？
TLC要素 >固定相：Stationary phase-类型 >展开剂：Developing phase-配制/选择 >样品制备：Sample preparation-前处理 >点样：Sample application-点状/条状 >展开：Developing-.展开缸/饱和/展距 >定位/显色：Derivatization/Staining-日光/荧光/显色剂
TLC要素 固定相：Stationary phase-类型 展开剂：Developing phase-配制/选择 样品制备：Sample preparation-前处理 点样：Sample application-点状/条状 展开：Developing-展开缸/饱和/展距 定位/显色：Derivatization/Staining-日光/ 荧光/显色剂
实验材料 市售的黄连和黄柏药材、黄连和黄柏的对照药材（中检所)、 盐酸小檗碱对照品（中检所）。 黄连 黄柏 Coptidis Rhizoma Phellodendri Chinensis Cortex 黄连、三角叶黄连、云连 黄皮树 清热燥湿，泻火解毒 清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮 小檗碱、黄连碱、甲基黄连碱、 小檗碱、黄柏碱、木兰碱、掌叶 巴马汀等 防己碱 盐酸小檗碱 TLC如何鉴别？ 黄连？黄柏？ 对照药材
实验材料 黄连 黄柏 Coptidis Rhizoma Phellodendri Chinensis Cortex 黄连、三角叶黄连、云连 黄皮树 清热燥湿，泻火解毒 清热燥湿、泻火除蒸、解毒疗疮 小檗碱、黄连碱、甲基黄连碱、 巴马汀等 小檗碱、黄柏碱、木兰碱、掌叶 防己碱 TLC如何鉴别？ 盐酸小檗碱 对照药材 市售的黄连和黄柏药材、黄连和黄柏的对照药材（中检所）、 盐酸小檗碱对照品（中检所）。 黄连？黄柏？
实验步骤 1.供试品溶液的制备 两种药材粉 甲醇 水浴50℃ 过滤 末各0.1g 供试品溶液 5 mL 10 min 2.对照溶液的制备 对照药材溶液的制备：同法制备（已制好） 盐酸小檗碱对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱适量，加甲醇制 成每1mL含0.5mg的溶液（已制好)
实验步骤 两种药材粉 末各0.1 g 甲醇 5 mL 水浴50℃ 10 min 过滤 1. 供试品溶液的制备 供试品溶液 对照药材溶液的制备：同法制备 （已制好） 盐酸小檗碱对照品溶液的制备：取盐酸小檗碱适量，加甲醇制 成每1 mL含0.5 mg的溶液 （已制好） 2. 对照溶液的制备
实验步骤 3.展开剂的配制 A:正丁醇-冰醋酸-水(7：1：2) 先将冰醋酸和水混合，再加入正丁醇 B:环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水-三乙胺 3:3.5:1:1.5:0.5:1)
实验步骤 3. 展开剂的配制 A：正丁醇-冰醋酸-水 (7:1:2) B：环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水-三乙胺 (3:3.5:1:1.5:0.5:1) 先将冰醋酸和水混合，再加入正丁醇
4.点样 √取管口平整的毛细管分别吸取上述溶液各约5uL； √点于同一硅胶G预制高效薄层板上，2份： 每个TLC板上5个点，分别为黄连对照药材溶液、市售黄连 药材供试品溶液、盐酸小檗碱对照品溶液、黄柏对照药材溶 液、市售黄柏药材供试品溶液。 直径<2mm, 5点要平齐 点与点的间距， 点与边缘的距离 00000 1cm 重复点样：待溶剂挥散后再点 粉小粉对 药
4. 点样 取管口平整的毛细管分别吸取上述溶液各约5 L； 点于同一硅胶G预制高效薄层板上，2份； 每个TLC板上5个点，分别为黄连对照药材溶液、市售黄连 药材供试品溶液、盐酸小檗碱对照品溶液、黄柏对照药材溶 液、市售黄柏药材供试品溶液
5.展开 >取两个展开缸，分别加入AB两种展开剂； >预饱和5min,将已点样的薄层板放入缸内，展开，结束后 取出，立即标记前沿，晾干。 TLC板 TLC板 涂层 ◆涂层 溶液 溶液
5. 展开 取两个展开缸，分别加入A/B两种展开剂； 预饱和5 min, 将已点样的薄层板放入缸内，展开，结束后 取出，立即标记前沿，晾干
6.定位 在紫外光灯(365nm)下检视，用铅笔画出所有荧光斑点； oC0
6. 定位 在紫外光灯(365nm)下检视，用铅笔画出所有荧光斑点；