薄层色谱和纸色谱
薄层色谱和纸色谱
实验目的>了解色谱分离的原理及其应用。>初步掌握薄层色谱的操作技能
➢了解色谱分离的原理及其应用。 ➢初步掌握薄层色谱的操作技能。 一、实验目的
二、色谱基本原理：色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（分配）的不同，或其亲和性的差异使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附或分配作用，从而使各组分分离
二、色谱基本原理： 色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的 重要方法之一。色谱法的基本原理是利用 混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解 性能（分配）的不同，或其亲和性的差异， 使混合物的溶液流经该种物质进行反复的 吸附或分配作用，从而使各组分分离
固定相与流动相：固定相：用于与样品发生吸附作用的固定不动的物质。在混合物样品流经固定相的过程中，由于各组分与固定相吸附力的不同，就产生了速度的差异，从而将混合物中的各组分分开。流动相：也称洗脱剂，在色谱过程中起到将吸附在固定相上的样品洗脱的作用
固定相与流动相： 固定相：用于与样品发生吸附作用的固定不动的物质。在 混合物样品流经固定相的过程中，由于各组分与固定相吸 附力的不同，就产生了速度的差异，从而将混合物中的各 组分分开。 流动相：也称洗脱剂，在色谱过程中起到将吸附在固定相 上的样品洗脱的作用
三、 色谱的应用：>分离混合物：一些结构类似、理化性质也相似的化合物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法分离，有时可得到满意的结果。>精制提纯化合物有机化合物中含有少量结构类似的杂质不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品>鉴定化合物：在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（R值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质>跟踪一些化学反应进程：可以利用薄层色谱或纸色谱观察原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否
三、色谱的应用： ➢分离混合物：一些结构类似、理化性质也相似的化合物组 成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应用色谱法 分离，有时可得到满意的结果。 ➢精制提纯化合物 有机化合物中含有少量结构类似的杂质， 不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯品。 ➢鉴定化合物：在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄 层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（Rf 值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性 质相似的化合物是否为同一物质。 ➢跟踪一些化学反应进程：可以利用薄层色谱或纸色谱观察 原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否
四、薄层色谱：薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还可用来“预试”跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种
四、薄层色谱： 薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离 和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸 附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于 少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方 面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样 品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而 不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还可用来 跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”
薄层色谱实验步骤：1、制薄层板固定相：SiO02+羧甲基纤维素钠（硬板，制三片）硬板制备：50mL烧杯中放置7gSi02，逐渐加入5%羧甲基纤维素钠（CMC）水溶液7mL，调成均匀的糊状。将其涂于一片玻璃板上，室温放置半小时后，放入烘箱中在110℃恒温半小时，即制得硬板
薄层色谱实验步骤： 1、制薄层板 固定相：SiO2 ＋羧甲基纤维素钠（硬板，制三片） 硬板制备：50 mL烧杯中放置7 g SiO2，逐渐加入5%羧甲 基纤维素钠（CMC）水溶液7 mL，调成均匀的糊状。将 其涂于一片玻璃板上，室温放置半小时后，放入烘箱中 在110℃恒温半小时，即制得硬板
2、点样及展开偶氮苯与对羟基偶氮苯的分离样品：偶氮苯；对羟基偶氮苯；混合样品展开剂：8：2石油醚/丙酮3.邻硝基苯胺和对硝基苯胺的分离样品：邻硝基苯胺；对硝基苯胺；混合样品展开剂：8：2石油醚/丙酮
2、点样及展开 偶氮苯与对羟基偶氮苯的分离 样品：偶氮苯；对羟基偶氮苯；混合样品 展开剂：8 : 2 石油醚/丙酮 3. 邻硝基苯胺和对硝基苯胺的分离 样品：邻硝基苯胺；对硝基苯胺；混合样品 展开剂： 8 : 2 石油醚/丙酮
薄层色谱示意图溶剂前浩10吸附剂薄层2分离的组分点样点1Cm(b)长方形盒式展开槽(a)物质移动距离Re-溶剂移动距离3.0厘米R（化合物1）==0.2512厘米8.4厘米Re（化合物2）=0.70-12厘米
4、薄层色谱示意图
点样及展开注意事项>软板点样需很轻，否则固定相会粘到点样管下方。一根点样管只能点一种样品，否则有交叉污染>样品点直径应不超过3mm，距离薄层板底部约1cm，样品点之间间距约11.5cm，展开时薄层板底部浸入展开剂的高度约0.5cm。注意样品点决不能浸到展开剂中。>展开剂离薄层板上缘约1cm时应停止走板，取出晾干。不可使展开剂走到板的尽头。板取出后要及时标记展开剂前沿，否则展开剂挥发后难以确定
点样及展开注意事项 ➢软板点样需很轻，否则固定相会粘到点样管下方。 ➢一根点样管只能点一种样品，否则有交叉污染。 ➢样品点直径应不超过3 mm，距离薄层板底部约1 cm，样品点之间间距约1~1.5 cm，展开时薄层板底部浸 入展开剂的高度约0.5 cm。注意样品点决不能浸到展开 剂中。 ➢展开剂离薄层板上缘约1 cm时应停止走板，取出晾 干。不可使展开剂走到板的尽头。板取出后要及时标记 展开剂前沿，否则展开剂挥发后难以确定