第十一章 细胞增殖及其调控
• 细胞增殖是生命的基本特征，种族繁衍、个体发育、机 体修复等都离不开细胞增殖。 – 初生婴儿有1012个细胞，成人1014个，约200种类型。 – 成人体内每秒钟有数百万新细胞产生，以补偿衰老和死亡的细胞。 – 一个大肠杆菌若按20分钟分裂一次，并保持这一速度，则两天即可超过 地球的重量
• 细胞增殖是生命的基本特征，种族繁衍、个体发育、机 体修复等都离不开细胞增殖。 – 初生婴儿有1012个细胞，成人1014个，约200种类型。 – 成人体内每秒钟有数百万新细胞产生，以补偿衰老和死亡的细胞。 – 一个大肠杆菌若按20分钟分裂一次，并保持这一速度，则两天即可超过 地球的重量
第一节 基本概念
第一节 基本概念
一、什么是细胞周期 • 由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，叫 细胞周期。分为4个期： – G1期(gap1)，指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间。 – S期(synthesis phase)，指DNA复制的时期。 – G2期(gap2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间。 – M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束
一、什么是细胞周期 • 由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，叫 细胞周期。分为4个期： – G1期(gap1)，指从有丝分裂完成到期DNA复制之前的间隙时间。 – S期(synthesis phase)，指DNA复制的时期。 – G2期(gap2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间。 – M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束
Eucaryotic Cell Cycle A typical mammalian cell has a cell cycle time of 24 hours, with 12 hr G1 , 6-8 hr S, 3-4 hr G2 , and 1 hr M
Eucaryotic Cell Cycle A typical mammalian cell has a cell cycle time of 24 hours, with 12 hr G1 , 6-8 hr S, 3-4 hr G2 , and 1 hr M
• 从增殖的角度来看，可将高等动物的细胞分为三类： – ①连续分裂细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 – ②休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期， 称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 – ③不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又 称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等
• 从增殖的角度来看，可将高等动物的细胞分为三类： – ①连续分裂细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 – ②休眠细胞暂不分裂，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期， 称G0期细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 – ③不分裂细胞，指不可逆地脱离细胞周期，不再分裂的细胞，又 称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞等
• 细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关。通常G1期持 续时间差异较大，M期最短约0.5～4.5小时。 • 标记有丝分裂百分率法（percentage labeled mitoses， PLM）：对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射 自显影技术显示标记细胞，通过统计标记有丝分裂细胞百 分数的办法来测定细胞周期。放射标记物为3H或者14C标 记的TDR。 二、细胞周期时间的测定
• 细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关。通常G1期持 续时间差异较大，M期最短约0.5～4.5小时。 • 标记有丝分裂百分率法（percentage labeled mitoses， PLM）：对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射 自显影技术显示标记细胞，通过统计标记有丝分裂细胞百 分数的办法来测定细胞周期。放射标记物为3H或者14C标 记的TDR。 二、细胞周期时间的测定
50 100 TG2 0 TM Ts Tc TG2 +1/2TM T PLM 常以（TG2+1/2TM）-TG2的方式求出TM
50 100 TG2 0 TM Ts Tc TG2 +1/2TM T PLM 常以（TG2+1/2TM）-TG2的方式求出TM
• 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经 人为处理造成的细胞周期同步化。 • （一）自然同步化 • 1、多核体：如：粘菌、疟原虫。 • 2、某些水生动物的受精卵：如海胆、海参、两栖类。 • 3、增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入 适宜环境后，它们一起发芽，同步分裂。 三、细胞同步化
• 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经 人为处理造成的细胞周期同步化。 • （一）自然同步化 • 1、多核体：如：粘菌、疟原虫。 • 2、某些水生动物的受精卵：如海胆、海参、两栖类。 • 3、增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入 适宜环境后，它们一起发芽，同步分裂。 三、细胞同步化
• 1、选择同步化 • 1）有丝分裂选择法：M期细胞与培养皿的附着性低，振荡 脱离器壁收集。 – 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。 – 缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%） 。 • 2）细胞沉降分离法： M期细胞体积大，可用离心分离。 – 优点：可用于任何悬浮培养的细胞。 – 缺点：同步化程度较低。 （二）人工同步化
• 1、选择同步化 • 1）有丝分裂选择法：M期细胞与培养皿的附着性低，振荡 脱离器壁收集。 – 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。 – 缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%） 。 • 2）细胞沉降分离法： M期细胞体积大，可用离心分离。 – 优点：可用于任何悬浮培养的细胞。 – 缺点：同步化程度较低。 （二）人工同步化