实验十三、凝集反应
实验十三、凝集反应
目的要求 熟悉直接和间接凝集反应操作技术和结果判定。 二、材料 玻璃板、微量移液器、蜡笔、鸡白痢有色平板 抗原、鸡白痢阳性血清、阴性血清、被检血清、 生理盐水、火柴、96孔微量反应板、猪瘟间接凝 集试验抗原、被检血清、稀释液等
一、目的要求 熟悉直接和间接凝集反应操作技术和结果判定。 二、材料 玻璃板、微量移液器、蜡笔、鸡白痢有色平板 抗原、鸡白痢阳性血清、阴性血清、被检血清、 生理盐水、火柴、96孔微量反应板、猪瘟间接凝 集试验抗原、被检血清、稀释液等
三、方法步骤 (一)鸡白痢沙门氏菌平板凝集 1、蜡笔打格子，单个格子为2cm×2cm,横为6个。 2、用吸管按80ul、40ul、20ul、10ul量加入前4格， 第5格加阳性血清，第6格加阴性血清。 3、各格中加30u鸡白痢沙门氏菌平板凝集抗原。 4、用火柴棒将抗原和相应液体血清混匀。 5、3-5分观察结果
三、方法步骤 （一）鸡白痢沙门氏菌平板凝集 1、蜡笔打格子，单个格子为2cm×2cm，横为6个。 2、用吸管按80ul、40ul、20ul、10ul 量加入前4格， 第5格加阳性血清，第6格加阴性血清。 3、各格中加30ul鸡白痢沙门氏菌平板凝集抗原。 4、用火柴棒将抗原和相应液体血清混匀。 5、3-5分观察结果
被检血清 阳性对照 阴性对照 平板凝集反应（鸡白痢杆菌）】
(二)猪瘟间接凝集试验 1、在96孔微量反应板一排1-8孔内加50ul稀释液。 2、第1孔加50ul被检血清，倍比稀释为1：2，混匀， 在此孔吸50ul到第2孔，混匀为1：4，以此类推，到 第7孔混匀后，弃去50ul,第8孔为阴性对照。 3、用移液器各吸25u1猪瘟间接诊断抗原，加入1-8孔 内。 4、把微量反应板放微量振荡器上摇2分，后置37湿盒 内作用20分左右。 5、观察血凝结果，不凝集的孔，红细胞沉入孔底尖 部，凝集时，红细胞铺满孔底
（二）猪瘟间接凝集试验 1、在96孔微量反应板一排1-8孔内加50ul稀释液。 2、第1孔加50ul被检血清，倍比稀释为1：2，混匀， 在此孔吸50ul到第2孔，混匀为1：4，以此类推，到 第7孔混匀后，弃去50ul，第8孔为阴性对照。 3、用移液器各吸25ul猪瘟间接诊断抗原，加入1-8孔 内。 4、把微量反应板放微量振荡器上摇2分，后置37湿盒 内作用20分左右。 5、观察血凝结果，不凝集的孔，红细胞沉入孔底尖 部，凝集时，红细胞铺满孔底
四、思考题 1、血清学反应为何要设阳性、阴性对照？ 2、如何确定其凝集价？
四、思考题 1、血清学反应为何要设阳性、阴性对照？ 2、如何确定其凝集价？