维生素C的定量测定 一、原理： 维生素C又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还 原染料2,6—二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢 抗坏血酸，2,6—二氯酚靛酚的钠盐水溶液呈兰色， 在酸性溶液中呈玫瑰红色，当其被还原时就变为无 色，因此，可用2,6—二氯酚靛酚滴定样品中还原 型抗坏血酸，当抗坏血酸完全被氧化后，稍多加一 点染料，使滴定成淡红色，即为终点，如无其它杂 质干扰样品提取液所还原的标准染料量与样品中所 含的还原型抗坏血酸量成正比
维生素C的定量测定 一、原理： 维生素C又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还 原染料2,6—二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢 抗坏血酸，2,6—二氯酚靛酚的钠盐水溶液呈兰色， 在酸性溶液中呈玫瑰红色，当其被还原时就变为无 色，因此，可用2,6—二氯酚靛酚滴定样品中还原 型抗坏血酸，当抗坏血酸完全被氧化后，稍多加一 点染料，使滴定成淡红色，即为终点，如无其它杂 质干扰样品提取液所还原的标准染料量与样品中所 含的还原型抗坏血酸量成正比
维生素C的定量测定 • 二、试剂 • 1、偏磷酸醋酸溶液：取15克偏磷酸（用时研细） 溶于40毫升醋酸及20毫升之水混合液中，然后 用水稀释至500毫升，过滤后贮入玻塞品中。 • 2、标准2,6—二氯酚靛酚液：取0.25克2,6—二 氯酚靛酚溶于700毫升蒸馏水中（用力搅动）， 加入300毫升冷酸缓冲液（预先配制KH2PO4— 9.078克/升，Na2HPO4.2H2O—11.867克/升水 溶液，用时以KH2PO4/ Na2HPO4.2H2O=4/6的 比率将其混合。pH为6.9~7.0，日过滤，滤液贮 于有色瓶中，临用时，以标准抗坏血酸溶液标 定）
维生素C的定量测定 • 二、试剂 • 1、偏磷酸醋酸溶液：取15克偏磷酸（用时研细） 溶于40毫升醋酸及20毫升之水混合液中，然后 用水稀释至500毫升，过滤后贮入玻塞品中。 • 2、标准2,6—二氯酚靛酚液：取0.25克2,6—二 氯酚靛酚溶于700毫升蒸馏水中（用力搅动）， 加入300毫升冷酸缓冲液（预先配制KH2PO4— 9.078克/升，Na2HPO4.2H2O—11.867克/升水 溶液，用时以KH2PO4/ Na2HPO4.2H2O=4/6的 比率将其混合。pH为6.9~7.0，日过滤，滤液贮 于有色瓶中，临用时，以标准抗坏血酸溶液标 定）
维生素C的定量测定 • 3、2,6—二氯酚青定酚液标定： • 标准维生素C溶液（校准时再作），以少量偏磷酸溶液 溶解0.1克维生素C于100毫升容量瓶中，再以该液稀释 至刻度。 • 在三个100毫升锥形瓶中，各置5毫升偏磷酸醋酸液，再 各加2毫升标准维生素C溶液，摇匀。用上面所制2,6— 二氯酚靛酚滴定，呈玫瑰红色保持30秒钟不褪色为止。 记下所用2,6—二氯酚靛酚液平均值，再以同样方法作 一空白实验，取7毫升偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相 当于以上所用之2,6—二氯酚靛酚之滴定量），仍用 2,6—二氯酚靛酚滴定之。将第一次滴定的量减去空白 实验的量，即为标准维生素作用之量，求出1毫升之 2,6—二氯酚靛酚—若干毫克之维生素C
维生素C的定量测定 • 3、2,6—二氯酚青定酚液标定： • 标准维生素C溶液（校准时再作），以少量偏磷酸溶液 溶解0.1克维生素C于100毫升容量瓶中，再以该液稀释 至刻度。 • 在三个100毫升锥形瓶中，各置5毫升偏磷酸醋酸液，再 各加2毫升标准维生素C溶液，摇匀。用上面所制2,6— 二氯酚靛酚滴定，呈玫瑰红色保持30秒钟不褪色为止。 记下所用2,6—二氯酚靛酚液平均值，再以同样方法作 一空白实验，取7毫升偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相 当于以上所用之2,6—二氯酚靛酚之滴定量），仍用 2,6—二氯酚靛酚滴定之。将第一次滴定的量减去空白 实验的量，即为标准维生素作用之量，求出1毫升之 2,6—二氯酚靛酚—若干毫克之维生素C
维生素C的定量测定 • 三、操作： • 提取：用自来水冲洗检样，再以蒸馏水清洗，用纱布或 吸水纸吸干表面水份，然后称取20克，剪碎，在研钵中 形成浆状，倾入20—30毫升3%偏磷酸醋酸液，搅动， 抽气过滤液经漏斗流入100毫升容量瓶中，残渣再以20 毫升偏磷酸醋酸液提取三次，滤液及洗涤液皆流入该容 量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度，加塞摇匀。 • 滴定：吸取10毫升提取液注入一小三角瓶中，加5毫升 偏磷酸醋酸液，混合均匀，以2,6—二氯酚靛酚滴定， 并不断摇动，至溶液显玫瑰红色保持30秒钟不褪色为止。 • 吸取15毫升偏磷酸醋酸液，加水若干毫升（相当于以上 滴定所用2,6—二氯酚靛酚之量）作一空白试验，用同 样方法，以2,6—二氯酚靛酚滴定之
维生素C的定量测定 • 三、操作： • 提取：用自来水冲洗检样，再以蒸馏水清洗，用纱布或 吸水纸吸干表面水份，然后称取20克，剪碎，在研钵中 形成浆状，倾入20—30毫升3%偏磷酸醋酸液，搅动， 抽气过滤液经漏斗流入100毫升容量瓶中，残渣再以20 毫升偏磷酸醋酸液提取三次，滤液及洗涤液皆流入该容 量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度，加塞摇匀。 • 滴定：吸取10毫升提取液注入一小三角瓶中，加5毫升 偏磷酸醋酸液，混合均匀，以2,6—二氯酚靛酚滴定， 并不断摇动，至溶液显玫瑰红色保持30秒钟不褪色为止。 • 吸取15毫升偏磷酸醋酸液，加水若干毫升（相当于以上 滴定所用2,6—二氯酚靛酚之量）作一空白试验，用同 样方法，以2,6—二氯酚靛酚滴定之
维生素C的定量测定 • 四、结果计算： • VC% (mg/100g) = （VA —VB）×已知维生素C 毫克数×100 ×100/所用提取液毫升数×样品重 • 式中： VA—样品实验所用2,6—二氯酚靛酚 • VB—空白试验所用2,6—二氯酚靛酚 • 注：样品中某些杂质亦能还原2,6—二氯酚靛酚， 但速度均较抗坏血酸慢，故终点以淡红色存在30 秒钟为准
维生素C的定量测定 • 四、结果计算： • VC% (mg/100g) = （VA —VB）×已知维生素C 毫克数×100 ×100/所用提取液毫升数×样品重 • 式中： VA—样品实验所用2,6—二氯酚靛酚 • VB—空白试验所用2,6—二氯酚靛酚 • 注：样品中某些杂质亦能还原2,6—二氯酚靛酚， 但速度均较抗坏血酸慢，故终点以淡红色存在30 秒钟为准