广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·1 有机氯农药残留量 的测定
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·1 有机氯农药残留量 的测定
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·1 有机氯农药残留量的测定 7·1 有机氯农药残留量的测定 7·1·1 定性检验 1·焰色法 1，原理 此法是利用样品中的有机氯受热分解为氯化氢， 它与铜勺表面的氧化铜作用，生成挥发性的氯化 铜，在无色火焰中呈绿色。用以鉴别样品提取液 中有机氯农药的存在
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·1 有机氯农药残留量的测定 7·1 有机氯农药残留量的测定 7·1·1 定性检验 1·焰色法 1，原理 此法是利用样品中的有机氯受热分解为氯化氢， 它与铜勺表面的氧化铜作用，生成挥发性的氯化 铜，在无色火焰中呈绿色。用以鉴别样品提取液 中有机氯农药的存在
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2)操作步骤 取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表 面覆盖一层黑色氧化铜为止。取少量怀疑污染有 机氯农药的食品，用乙醚浸渍振摇并过滤。将滤 液逐滴加在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧，呈绿 色火焰者，说明食品被有机氯农药 (包括DDT及 六六六)污染。若样品中农药含量很低，可将乙 醚提取液浓缩蒸干，用少量乙醇溶解残留物，然 后按上法检验，本法最低检出范围为1ug有机氯
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2)操作步骤 取铜小勺在煤气灯或酒精灯上灼烧，直至铜勺表 面覆盖一层黑色氧化铜为止。取少量怀疑污染有 机氯农药的食品，用乙醚浸渍振摇并过滤。将滤 液逐滴加在铜勺表面蒸发，然后进行灼烧，呈绿 色火焰者，说明食品被有机氯农药 (包括DDT及 六六六)污染。若样品中农药含量很低，可将乙 醚提取液浓缩蒸干，用少量乙醇溶解残留物，然 后按上法检验，本法最低检出范围为1ug有机氯
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2·亚铁氨化银试纸法 1)原理 此法是根据有机氯农药与碳酸钠灼烧生成氯化钠。与 硫酸作用生成氯化氢。 氯化氢与亚铁氰化银试纸反应，在硫酸铁存在下产生蓝色， 可鉴别有机氯的 存在。 · 2)操作步骤 (1)亚铁氰化银试纸 称取硝酸银2.5g、亚铁氰化钾1.3g， 分别溶于25mL水中。将硝酸银溶液缓慢加到亚铁氰化 钾溶液中，离心分离，将沉淀物反复用水洗涤至不含银 离子为止。在沉淀中加浓氨水25mL，摇匀后，将滤纸 浸人悬浮氨溶液中5min，取出试纸用热风吹干，备用
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2·亚铁氨化银试纸法 1)原理 此法是根据有机氯农药与碳酸钠灼烧生成氯化钠。与 硫酸作用生成氯化氢。 氯化氢与亚铁氰化银试纸反应，在硫酸铁存在下产生蓝色， 可鉴别有机氯的 存在。 · 2)操作步骤 (1)亚铁氰化银试纸 称取硝酸银2.5g、亚铁氰化钾1.3g， 分别溶于25mL水中。将硝酸银溶液缓慢加到亚铁氰化 钾溶液中，离心分离，将沉淀物反复用水洗涤至不含银 离子为止。在沉淀中加浓氨水25mL，摇匀后，将滤纸 浸人悬浮氨溶液中5min，取出试纸用热风吹干，备用
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (2)检测 取10·09左右待测磨碎样品，置于三角烧 瓶中，加入20mL乙醚，振摇后，分出乙醚层。 置水浴上挥发至0·4mL，移人小试管中，加入一 勺碳酸钠，在水浴上蒸干、冷却。 取亚铁氰化银试纸条，在Ig/L硫酸铁溶液中浸湿 后，悬挂于橡皮塞下。向试管内残渣小心滴人浓 硫酸2一3滴，迅速将挂有试纸的橡皮塞塞紧小试 管，将试管移入水浴内加热smin，如果试纸变 为蓝色，表示样品中有有机氯农药存在。试验中 应防止无机氯的干扰
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (2)检测 取10·09左右待测磨碎样品，置于三角烧 瓶中，加入20mL乙醚，振摇后，分出乙醚层。 置水浴上挥发至0·4mL，移人小试管中，加入一 勺碳酸钠，在水浴上蒸干、冷却。 取亚铁氰化银试纸条，在Ig/L硫酸铁溶液中浸湿 后，悬挂于橡皮塞下。向试管内残渣小心滴人浓 硫酸2一3滴，迅速将挂有试纸的橡皮塞塞紧小试 管，将试管移入水浴内加热smin，如果试纸变 为蓝色，表示样品中有有机氯农药存在。试验中 应防止无机氯的干扰
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·1·2 定量检验 １、气相色谱法 (GB/T5009·19一1996) 1)原理 样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相 色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器 对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用 这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。 不同异构体和代谢物可同时分别测定。 出峰顺序:α-666、β666、μ-666、δ-666、 p.p'-DDE、α.p'-DDT、ρ.p'-DDD、ρ.ρ΄-DDT
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·1·2 定量检验 １、气相色谱法 (GB/T5009·19一1996) 1)原理 样品中六六六、滴滴涕经提取、净化后用气相 色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器 对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用 这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。 不同异构体和代谢物可同时分别测定。 出峰顺序:α-666、β666、μ-666、δ-666、 p.p'-DDE、α.p'-DDT、ρ.p'-DDD、ρ.ρ΄-DDT
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2)仪器和试剂 (1)仪器 小型粉碎机，小型绞肉机，组织捣碎机，电动振荡器，旋 转浓缩蒸发器，吹氮浓缩器，气相色谱仪:具有电子捕获检测器 (ECD)。 (2)试剂 ①丙酮。 ②正己烷; ③石油醚:沸程30一60℃ ④苯; ⑤硫酸; ⑥无水硫酸钠; ⑦硫酸钠溶液 (209/L); ⑧六六六、滴滴涕标准溶液:准确称取甲、乙、丙、丁六六六四 种异构体和p.p'-滴滴涕、p.p'-滴滴滴、p.p'-滴滴伊、α、β'-滴滴 涕 (α-666、β-666、μ-666、δ-666、p.p'-DDT、p.p'-DDD、 p.p'-DDE、α、β'-DDT)各10.0ug，溶于苯，分别移人100mL容 量瓶中，加苯至刻度，混匀，每毫升含农药100.0ug，作为储备 液存于冰箱中。 ⑨六六六、滴滴涕标准使用液:将上述标准储备液以己烷稀释至 适宜浓度，一般为0.01ulg/mL
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2)仪器和试剂 (1)仪器 小型粉碎机，小型绞肉机，组织捣碎机，电动振荡器，旋 转浓缩蒸发器，吹氮浓缩器，气相色谱仪:具有电子捕获检测器 (ECD)。 (2)试剂 ①丙酮。 ②正己烷; ③石油醚:沸程30一60℃ ④苯; ⑤硫酸; ⑥无水硫酸钠; ⑦硫酸钠溶液 (209/L); ⑧六六六、滴滴涕标准溶液:准确称取甲、乙、丙、丁六六六四 种异构体和p.p'-滴滴涕、p.p'-滴滴滴、p.p'-滴滴伊、α、β'-滴滴 涕 (α-666、β-666、μ-666、δ-666、p.p'-DDT、p.p'-DDD、 p.p'-DDE、α、β'-DDT)各10.0ug，溶于苯，分别移人100mL容 量瓶中，加苯至刻度，混匀，每毫升含农药100.0ug，作为储备 液存于冰箱中。 ⑨六六六、滴滴涕标准使用液:将上述标准储备液以己烷稀释至 适宜浓度，一般为0.01ulg/mL
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 3)操作步骤 (1)提取 ①称取具有代表性的样品(适用于生的及烹调加工过的 蔬菜、水果或谷类、豆类、肉类、蛋类)约2009，加适 量水，于捣碎机中捣碎，混匀。称取匀浆2.00~5.00g， 于50mL具塞三角瓶中，加10~I5mL丙酮，在振荡器上 振荡30min，过滤于100mL分液漏斗中，残渣用丙酮洗 涤4次，每次4mL，用少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并 滤液30~40mL，加石油醚20mL，摇动数次，放气。振 摇lmin，加20mL硫酸钠溶液 (20g/L)，振摇lmin，静 置分层，弃去下层水溶液。用滤纸擦千分液漏斗颈内外 的水，然后将石油醚液缓缓放出，经盛有约10g无水硫 酸钠的漏斗，滤入50mL三角瓶中。再以少量石油醚分 3次洗涤原分液漏斗、滤纸和漏斗，洗液并人滤液中， 将石油醚浓缩，移人l0mL具塞试管中，定容至5.0mL 或l0.0mL
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 3)操作步骤 (1)提取 ①称取具有代表性的样品(适用于生的及烹调加工过的 蔬菜、水果或谷类、豆类、肉类、蛋类)约2009，加适 量水，于捣碎机中捣碎，混匀。称取匀浆2.00~5.00g， 于50mL具塞三角瓶中，加10~I5mL丙酮，在振荡器上 振荡30min，过滤于100mL分液漏斗中，残渣用丙酮洗 涤4次，每次4mL，用少许丙酮洗涤漏斗和滤纸，合并 滤液30~40mL，加石油醚20mL，摇动数次，放气。振 摇lmin，加20mL硫酸钠溶液 (20g/L)，振摇lmin，静 置分层，弃去下层水溶液。用滤纸擦千分液漏斗颈内外 的水，然后将石油醚液缓缓放出，经盛有约10g无水硫 酸钠的漏斗，滤入50mL三角瓶中。再以少量石油醚分 3次洗涤原分液漏斗、滤纸和漏斗，洗液并人滤液中， 将石油醚浓缩，移人l0mL具塞试管中，定容至5.0mL 或l0.0mL
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 ②称取具有代表性的乳样品2.00g，于l0mL具塞试管中， 加4mL丙酮，振摇lmin，加4mL石油醚,振摇lmin。静 置分层。将上层石油醚溶液移人另一25mL具塞试管中， 再加lmL石油醚于原试管中，不摇。取出上层石油醚合 并于25mL试管中，重复2次。再加与石油醚等体积的 硫酸钠溶液 (20g/L)，摇混，分层。将上层石油醚溶液 取出经无水硫酸钠滤人l0mL具塞试管中，再加lmL石油 醚于原25mL试管中，不摇。取出上层液合并于l0mL试 管中，重复两次。提取液定容至4.0mL。 ③称取具有代表性的均匀食用油样品0.50g以石油醚溶 解于10mL试管中，定容至10.0mL。 (2)净化5.0mL提取液加0.50mL浓硫酸，盖上试管塞。 振摇数次后，打开塞子放气，然后振摇0.5min，于 1600r/min，离心l5min，上层清液，供气相色谱法分 析用
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 ②称取具有代表性的乳样品2.00g，于l0mL具塞试管中， 加4mL丙酮，振摇lmin，加4mL石油醚,振摇lmin。静 置分层。将上层石油醚溶液移人另一25mL具塞试管中， 再加lmL石油醚于原试管中，不摇。取出上层石油醚合 并于25mL试管中，重复2次。再加与石油醚等体积的 硫酸钠溶液 (20g/L)，摇混，分层。将上层石油醚溶液 取出经无水硫酸钠滤人l0mL具塞试管中，再加lmL石油 醚于原25mL试管中，不摇。取出上层液合并于l0mL试 管中，重复两次。提取液定容至4.0mL。 ③称取具有代表性的均匀食用油样品0.50g以石油醚溶 解于10mL试管中，定容至10.0mL。 (2)净化5.0mL提取液加0.50mL浓硫酸，盖上试管塞。 振摇数次后，打开塞子放气，然后振摇0.5min，于 1600r/min，离心l5min，上层清液，供气相色谱法分 析用
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (3)测定 ①气相色谱参考条件 色谱柱:内径3~4mm，长1.2~2m的玻璃柱，内 装涂以OV-7(15g/L)和QF-1(20g/L)的混合固定 液的80~100目硅藻土。 ②Ni-电子捕获检测器:汽化室温度:215℃;色谱 柱温度;195℃;检测器温度:225℃;载气 (氮气)流 速:90mL/min;纸速:0.5cm/min。 ③电子捕获检测器的线性范围窄，为了便于定 量，选择样品进样量使之适合各组分的线性范围。 根据样品中六六六、滴滴涕存在形式，相应的制 备各组分的标准曲线，从而计算出样品中的含量
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (3)测定 ①气相色谱参考条件 色谱柱:内径3~4mm，长1.2~2m的玻璃柱，内 装涂以OV-7(15g/L)和QF-1(20g/L)的混合固定 液的80~100目硅藻土。 ②Ni-电子捕获检测器:汽化室温度:215℃;色谱 柱温度;195℃;检测器温度:225℃;载气 (氮气)流 速:90mL/min;纸速:0.5cm/min。 ③电子捕获检测器的线性范围窄，为了便于定 量，选择样品进样量使之适合各组分的线性范围。 根据样品中六六六、滴滴涕存在形式，相应的制 备各组分的标准曲线，从而计算出样品中的含量