第二章 菌种的扩大培养
第二章 菌种的扩大培养
◼ 定义：菌种的扩大培养就是把保藏 的菌种，即砂土管，冷冻干燥管中 处于休眠状态的生产菌种接入试管 斜面活化，再经过扁瓶或药瓶和种 子罐，逐级扩大培养后达到一定的 数量和质量的纯种培养过程。这些 纯种的培养物称为种子
◼ 定义：菌种的扩大培养就是把保藏 的菌种，即砂土管，冷冻干燥管中 处于休眠状态的生产菌种接入试管 斜面活化，再经过扁瓶或药瓶和种 子罐，逐级扩大培养后达到一定的 数量和质量的纯种培养过程。这些 纯种的培养物称为种子
种子必须具备的条件 ①菌种细胞的生长活力强，接种后在发酵罐 中能迅速生长 ②生理性状稳定 ③菌体总量和浓度能满足大容量发酵罐的要 求 ④无杂菌污染（不带杂菌） ⑤生产能力稳定
种子必须具备的条件 ①菌种细胞的生长活力强，接种后在发酵罐 中能迅速生长 ②生理性状稳定 ③菌体总量和浓度能满足大容量发酵罐的要 求 ④无杂菌污染（不带杂菌） ⑤生产能力稳定
种 子 制 备 过 程 ◼实验室种子制备阶段：琼脂 斜面至固体培养基扩大培养 （如茄子瓶斜面培养等或液 体摇瓶培养 ◼生产车间种子制备阶段：种 子罐扩大培养
种 子 制 备 过 程 ◼实验室种子制备阶段：琼脂 斜面至固体培养基扩大培养 （如茄子瓶斜面培养等或液 体摇瓶培养 ◼生产车间种子制备阶段：种 子罐扩大培养
砂土管（冷 冻干燥管） 斜 面 摇 瓶 固 体斜 面
砂土管（冷 冻干燥管） 斜 面 摇 瓶 固 体斜 面
摇 瓶 固 体 种 子 罐 发酵 罐
摇 瓶 固 体 种 子 罐 发酵 罐
斜 面 10ml 试 管 25 27o c 2 3d 500 1000ml 三角 瓶 (250ml 500ml麦 芽 汁) 25 2d 5 10 L 麦 芽 汁 15 20 3 5d 发酵 罐 o c o c
斜 面 10ml 试 管 25 27o c 2 3d 500 1000ml 三角 瓶 (250ml 500ml麦 芽 汁) 25 2d 5 10 L 麦 芽 汁 15 20 3 5d 发酵 罐 o c o c
实验室种子制备 ◼ 在砂土管或冷冻干燥管内保藏的菌种以 无菌的方式接至适合的斜面培养基上， 培养成熟后挑选正常的菌落再接一次试 管斜面并至摇瓶
实验室种子制备 ◼ 在砂土管或冷冻干燥管内保藏的菌种以 无菌的方式接至适合的斜面培养基上， 培养成熟后挑选正常的菌落再接一次试 管斜面并至摇瓶
生产车间种子制备 ◼ 实验室制备的孢子斜面或摇瓶种子移接 到种子罐进行扩大培养 ◼ 种子罐培养一方面使菌种获得足够的数 量，另一方面种子罐中的培养基更接近 发酵罐培养的醪液成分和培养条件，譬 如通无菌空气，搅拌形式等等，以使菌 体适应发酵环境
生产车间种子制备 ◼ 实验室制备的孢子斜面或摇瓶种子移接 到种子罐进行扩大培养 ◼ 种子罐培养一方面使菌种获得足够的数 量，另一方面种子罐中的培养基更接近 发酵罐培养的醪液成分和培养条件，譬 如通无菌空气，搅拌形式等等，以使菌 体适应发酵环境
种子罐级数的确定 ◼ 种子罐的级数是指制备种子需逐级扩大 培养的次数 ◼ 对于生长快的细胞，种子用量的比例少， 即需要的接种量少，所以相应的种子罐 也少
种子罐级数的确定 ◼ 种子罐的级数是指制备种子需逐级扩大 培养的次数 ◼ 对于生长快的细胞，种子用量的比例少， 即需要的接种量少，所以相应的种子罐 也少