广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·２ 有机磷农药残留量 的测定
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·２ 有机磷农药残留量 的测定
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·2 有机磷农药残留量的测定 7·2·1 定性检验 1·刚果红法 1)原理 本法是利用样液中的有机磷农药经嗅氧化后，与刚果红 作用，生成蓝色化合物，来鉴别样品是否存在有有机磷农 药。 2)操作步骤 取经粉碎的样品用苯浸泡、振摇，用滤纸过滤，取滤 液于蒸发皿上，加入100g/L甘油甲醇溶液1滴，沥干，加 lmL水混匀。将样液滴于定性滤纸上，挥发干。将滤纸置 于漠蒸气上熏5min，取出，在通气处将嗅挥发尽。滴人 5g/L刚果红乙醇溶液，置于滤纸的点样处，如果滤纸显示 出蓝紫色则表示样品中有有机磷存在。呈粉红色者则为嗅 的色泽
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·2 有机磷农药残留量的测定 7·2·1 定性检验 1·刚果红法 1)原理 本法是利用样液中的有机磷农药经嗅氧化后，与刚果红 作用，生成蓝色化合物，来鉴别样品是否存在有有机磷农 药。 2)操作步骤 取经粉碎的样品用苯浸泡、振摇，用滤纸过滤，取滤 液于蒸发皿上，加入100g/L甘油甲醇溶液1滴，沥干，加 lmL水混匀。将样液滴于定性滤纸上，挥发干。将滤纸置 于漠蒸气上熏5min，取出，在通气处将嗅挥发尽。滴人 5g/L刚果红乙醇溶液，置于滤纸的点样处，如果滤纸显示 出蓝紫色则表示样品中有有机磷存在。呈粉红色者则为嗅 的色泽
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2·纸上斑点法 1)原理 样液中的硫代磷酸醋类有机磷与2，6-二溴苯醌氯酰亚 胺，在漠蒸气作用下，形成各种有颜色的化合物，用以 鉴定是否存在有机磷及是哪一种有机磷。 2)操作步骤 (1)2，6-二溴苯醌氯酰亚胺试纸 称取0·05g 2，6-二溴 苯醌氯酰亚胺，溶于10mL95%(体积分数)乙醇中，将 定性滤纸浸湿，晾千备用。 (2)检验 吸取按刚果红法制备的样液滴，于2，6-二溴 苯醌氯酰亚胺试纸上，稍干，置于嗅蒸气上蒸熏片刻， 呈现出不同颜色的斑点，根据所显示斑点的颜色鉴别属 于哪种有机磷农药。试验时，为防止色素干扰，试纸要 临时配制。有机磷农药呈色反应如表所示
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2·纸上斑点法 1)原理 样液中的硫代磷酸醋类有机磷与2，6-二溴苯醌氯酰亚 胺，在漠蒸气作用下，形成各种有颜色的化合物，用以 鉴定是否存在有机磷及是哪一种有机磷。 2)操作步骤 (1)2，6-二溴苯醌氯酰亚胺试纸 称取0·05g 2，6-二溴 苯醌氯酰亚胺，溶于10mL95%(体积分数)乙醇中，将 定性滤纸浸湿，晾千备用。 (2)检验 吸取按刚果红法制备的样液滴，于2，6-二溴 苯醌氯酰亚胺试纸上，稍干，置于嗅蒸气上蒸熏片刻， 呈现出不同颜色的斑点，根据所显示斑点的颜色鉴别属 于哪种有机磷农药。试验时，为防止色素干扰，试纸要 临时配制。有机磷农药呈色反应如表所示
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 有机磷农药的呈色反应 农药种类 反应颜色 反应时间 农药种类 反应颜色 反应时间 3911 鲜黄，周 围较深 5s-3min 乐果 黄味橙黄 20s-5min 1605 淡黄斗紫 红 30s-3min M-74 淡土黄+暗 紫红 30s-5min 1059 鲜黄伞暗 黄 30s-3min 三硫磷 土黄斗杏 红 15s-5min 4049 黄+黄棕 30s-5min 1240 鲜黄+暗黄 30s-3min
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 有机磷农药的呈色反应 农药种类 反应颜色 反应时间 农药种类 反应颜色 反应时间 3911 鲜黄，周 围较深 5s-3min 乐果 黄味橙黄 20s-5min 1605 淡黄斗紫 红 30s-3min M-74 淡土黄+暗 紫红 30s-5min 1059 鲜黄伞暗 黄 30s-3min 三硫磷 土黄斗杏 红 15s-5min 4049 黄+黄棕 30s-5min 1240 鲜黄+暗黄 30s-3min
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·2·2 定量检测 1)原理 本法是利用含有机磷的样品在富氢焰上燃 烧，以HPO碎片的形式放射出526nm的特性光， 这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收， 转变成电信号，经放大器放大后，由记录仪记录 下色谱图，将样品的峰高或峰面积与标准品相比 较做定量分析。本法适用于水果、蔬菜、谷类的 检测。最低检出量为0.1一0.25ug
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 7·2·2 定量检测 1)原理 本法是利用含有机磷的样品在富氢焰上燃 烧，以HPO碎片的形式放射出526nm的特性光， 这种光通过滤光片选择后，由光电倍增管接收， 转变成电信号，经放大器放大后，由记录仪记录 下色谱图，将样品的峰高或峰面积与标准品相比 较做定量分析。本法适用于水果、蔬菜、谷类的 检测。最低检出量为0.1一0.25ug
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2)仪器和试剂 (1)仪器 组织捣碎机，粉碎机，旋转蒸发器，气相 色谱仪:附有火焰光度检测器 (FPD)。 (2)试剂 丙酮，二氯甲烷，氯化钠，无水硫酸钠， 助滤剂Celiee545，农药标准品:敌敌畏99%，速 灭磷顺式60%，反式40%，久效磷99%，甲拌磷 98%，巴胺磷99%，二臻农98%，乙噶硫磷97%， 甲基嘧啶硫磷99%，甲基对硫磷99%，稻瘟净 99%，水胺硫磷99%，氧化唾硫磷99%，稻丰散 99.6%，甲喹硫磷99.6%，克线磷99.9%，乙硫 磷95%，乐果99.0%，喹硫磷98.2%，对硫磷 99.0%，杀螟硫磷98.5%
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 2)仪器和试剂 (1)仪器 组织捣碎机，粉碎机，旋转蒸发器，气相 色谱仪:附有火焰光度检测器 (FPD)。 (2)试剂 丙酮，二氯甲烷，氯化钠，无水硫酸钠， 助滤剂Celiee545，农药标准品:敌敌畏99%，速 灭磷顺式60%，反式40%，久效磷99%，甲拌磷 98%，巴胺磷99%，二臻农98%，乙噶硫磷97%， 甲基嘧啶硫磷99%，甲基对硫磷99%，稻瘟净 99%，水胺硫磷99%，氧化唾硫磷99%，稻丰散 99.6%，甲喹硫磷99.6%，克线磷99.9%，乙硫 磷95%，乐果99.0%，喹硫磷98.2%，对硫磷 99.0%，杀螟硫磷98.5%
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 3)操作步骤 (1)标准溶液的配制 分别准确称取标准品，用二氯 甲烷为溶剂，分别配制成1.0mg/ml，的标准储 备液，储于冰箱 (4℃)中。使用时用二氯甲烷分 别稀释成1.0ug/mL的标准使用液。再根据各农 药品种的最小检测限，吸取不同量的标准储备液， 用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。 (2)试样制备 取粮食样品经粉碎机粉碎，过20目筛 制成粮食试样;取水果、蔬菜样品洗净，晾千， 去掉非可食部分后制成待测试样
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 3)操作步骤 (1)标准溶液的配制 分别准确称取标准品，用二氯 甲烷为溶剂，分别配制成1.0mg/ml，的标准储 备液，储于冰箱 (4℃)中。使用时用二氯甲烷分 别稀释成1.0ug/mL的标准使用液。再根据各农 药品种的最小检测限，吸取不同量的标准储备液， 用二氯甲烷稀释成混合标准使用液。 (2)试样制备 取粮食样品经粉碎机粉碎，过20目筛 制成粮食试样;取水果、蔬菜样品洗净，晾千， 去掉非可食部分后制成待测试样
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (3)提取 ①称取50·00g水果、蔬菜试样，置于300mL烧杯中，加 入50mL水和100mL丙酮 (总体积150mL)。用组织捣碎 机捣1~2min。匀浆液经铺有两层滤纸和约 10gCelite545的布氏漏斗，减压抽滤。从滤液中分取 100mL，移至500mL分液漏斗中。 ②称取25.00g谷物试样，置于300mL烧杯中，加入 50mL水和100mL丙酮，以下同上一步骤。 (4)净化 向以上两种滤液中，加入10~15g氯化钠，使呈 饱和状态。猛烈振摇2~3min，静置10min，使丙酮从 水相中盐析出来，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再 静置分层。 将丙酮与二氯甲烷提取液合并，并经装有20一30g无水硫 酸钠的玻璃漏斗脱水，滤人250mL圆底烧瓶中。再以 约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，洗涤 液也并人烧瓶中。用旋转蒸发器浓缩至约2mL，浓缩液 定量转移至5~25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (3)提取 ①称取50·00g水果、蔬菜试样，置于300mL烧杯中，加 入50mL水和100mL丙酮 (总体积150mL)。用组织捣碎 机捣1~2min。匀浆液经铺有两层滤纸和约 10gCelite545的布氏漏斗，减压抽滤。从滤液中分取 100mL，移至500mL分液漏斗中。 ②称取25.00g谷物试样，置于300mL烧杯中，加入 50mL水和100mL丙酮，以下同上一步骤。 (4)净化 向以上两种滤液中，加入10~15g氯化钠，使呈 饱和状态。猛烈振摇2~3min，静置10min，使丙酮从 水相中盐析出来，水相用50mL二氯甲烷振摇2min，再 静置分层。 将丙酮与二氯甲烷提取液合并，并经装有20一30g无水硫 酸钠的玻璃漏斗脱水，滤人250mL圆底烧瓶中。再以 约40mL二氯甲烷分数次洗涤容器和无水硫酸钠，洗涤 液也并人烧瓶中。用旋转蒸发器浓缩至约2mL，浓缩液 定量转移至5~25mL容量瓶中，加二氯甲烷定容至刻度
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (5)测定 ①气相色谱条件; 色谱柱:a·玻璃柱2.6m×3mm(i.d)，填装涂有4.5% (质量 分数)DC200十2.5%(质量分数)OV-I7的 ChromosorbWAWDMCS(80~100目)的担体。b·玻璃 柱2.6m×3mm(i·d)，填装涂有1.5%(质量分数):DCOEl的ChromosorbWAWDMCS (60一80目)。 气体速度:氮气(N，)50nll/Min,氢气(H2)100ml/min、空 气50mL/min。 温度:柱温240℃，汽化室260℃，检测器270℃。 ②测定。吸取2~5uL混合标准液及样品净化液，注人色 谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标 准比较定量
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 (5)测定 ①气相色谱条件; 色谱柱:a·玻璃柱2.6m×3mm(i.d)，填装涂有4.5% (质量 分数)DC200十2.5%(质量分数)OV-I7的 ChromosorbWAWDMCS(80~100目)的担体。b·玻璃 柱2.6m×3mm(i·d)，填装涂有1.5%(质量分数):DCOEl的ChromosorbWAWDMCS (60一80目)。 气体速度:氮气(N，)50nll/Min,氢气(H2)100ml/min、空 气50mL/min。 温度:柱温240℃，汽化室260℃，检测器270℃。 ②测定。吸取2~5uL混合标准液及样品净化液，注人色 谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标 准比较定量
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 4)结果计算 式中:xi一一i组分有机磷农药的含量，mg/kg; Ai一一试样中i组分的峰面积，积分单位; Asi一一混合标准液中i组分的峰面积，积分单位; V1一一试样提取液的总体积，mL; V2一一净化用提取液的总体积，mL V3一一浓缩后的定容体积，mL; V4一一迸样体积，mL; Esi一一进入色谱仪中的i标准组分的质量，ng; m一一样品的质量，g. 结果:以算出平均值的二位有效数字来表达，相对误差≤15%
广西工商职业技术学院精品课程 《食品分析与检验》 4)结果计算 式中:xi一一i组分有机磷农药的含量，mg/kg; Ai一一试样中i组分的峰面积，积分单位; Asi一一混合标准液中i组分的峰面积，积分单位; V1一一试样提取液的总体积，mL; V2一一净化用提取液的总体积，mL V3一一浓缩后的定容体积，mL; V4一一迸样体积，mL; Esi一一进入色谱仪中的i标准组分的质量，ng; m一一样品的质量，g. 结果:以算出平均值的二位有效数字来表达，相对误差≤15%