《分子生物学实验》实验教学大纲 课程名称：分子生物学实验 课程类别：专业主干课 适用专业：生物科学 所属实验室：分子生物学实验室 实验学时、学分：32学时1学分 一、实验教学目的 分子生物学是在分子水平上研究生命规律、揭示生命本质的科学。分子生物学实 验是生物科学、生物技术专业的必修基础课程之一。分子生物学实验技术，特别是基 因克隆重组技术已经成为现代生物技术的核心，已经渗透到生命科学的各个领域，并 促进了一批新学科的兴起和发展。本实验课程在本专业人才培养中具有重要的作用， 它是培养学生将来从事教学、科研及技术开发工作能力的不可缺少的实验教学环节。 本课程以分子生物学基础实验技术为主，开设验证、综合和设计三个类型实验项目。 通过本实验课程，使学生掌握分子生物学基础实验技术的基本原理和操作，培养学生 观察、思考、分析问题和解决问题的能力，以及实事求是、严肃认真的科学态度，为 今后的学习和工作奠定基础。 二、实验教学要求 开设分子生物学实验，旨在使学生掌握分子生物学实验的基本知识、原理、常用 技术和操作技能。培养学生分析问题、解决问题的能力和实事求是、严肃认真的科学 态度，为今后的学习深造或开展相关的研究、教学等工作莫定基础。 三、对学生的指导和要求 (一)在实验教学过程中，要求学生实验前认真预习实验讲义 (二)实验中亲自动手操作，善于观察，作好实验记录 (三)实验结束后详细整理、统计、分析实验结果，写出规范的实验报告 四、实验考核方式 考查 70%平时（包括习惯、结果、操作、实验报告)+20%笔试+10%开放实验室 五、实验教学内容 实验项目（一）分子生物学预备实验(4学时)： (1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性■验证性■设计性口综合性口 (3)项目主要目的要求： ①实验要求 通过介绍实验室规则，规范学生在实验室的行为： 讲解个相关仪器的名称，用途，简单原理和使用方法，让学生学会对它们的操作 方法。 ②实验内容 学习实验室规则：
《分子生物学实验》实验教学大纲 课程名称：分子生物学实验 课程类别： 专业主干课 适用专业：生物科学 所属实验室：分子生物学实验室 实验学时、学分：32学时 1学分 一、实验教学目的 分子生物学是在分子水平上研究生命规律、揭示生命本质的科学。分子生物学实 验是生物科学、生物技术专业的必修基础课程之一。分子生物学实验技术，特别是基 因克隆重组技术已经成为现代生物技术的核心，已经渗透到生命科学的各个领域，并 促进了一批新学科的兴起和发展。本实验课程在本专业人才培养中具有重要的作用， 它是培养学生将来从事教学、科研及技术开发工作能力的不可缺少的实验教学环节。 本课程以分子生物学基础实验技术为主，开设验证、综合和设计三个类型实验项目。 通过本实验课程，使学生掌握分子生物学基础实验技术的基本原理和操作，培养学生 观察、思考、分析问题和解决问题的能力，以及实事求是、严肃认真的科学态度，为 今后的学习和工作奠定基础。 二、实验教学要求 开设分子生物学实验，旨在使学生掌握分子生物学实验的基本知识、原理、常用 技术和操作技能。培养学生分析问题、解决问题的能力和实事求是、严肃认真的科学 态度，为今后的学习深造或开展相关的研究、教学等工作奠定基础。 三、对学生的指导和要求 （一）在实验教学过程中，要求学生实验前认真预习实验讲义 （二）实验中亲自动手操作，善于观察，作好实验记录 （三）实验结束后详细整理、统计、分析实验结果，写出规范的实验报告 四、实验考核方式 考查 70%平时（包括习惯、结果、操作、实验报告）+20%笔试+10%开放实验室 五、实验教学内容 实验项目(一) 分子生物学预备实验（4学时）： (1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性■ 验证性■ 设计性□ 综合性□ (3) 项目主要目的要求： ① 实验要求 通过介绍实验室规则，规范学生在实验室的行为； 讲解个相关仪器的名称，用途，简单原理和使用方法，让学生学会对它们的操作 方法。 ② 实验内容 学习实验室规则；
学习离心机的使用方法： 学习PCR仪的使用方法： 学习电泳仪的使用方法 学习紫外透射仪的使用方法： 学习微量加样器的使用方法： 学习紫外分光光度计的使用方法： 学习恒温摇床的使用方法： 学习电子天平的使用方法： 学习凝胶成像分析系统的使用方法。 (4)主要仪器： 离心机、PC仪、电泳仪、紫外透射仪、凝胶成像分析系统、微量加样器、紫外分 光光度计、电子天平、制冰机、烧杯、量筒、容量瓶、三角瓶、试剂瓶、高压灭菌 锅。 实验项目（二）基因组DNA提取(4学时)： (1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性■验证性■设计性口综合性口 (3)项目主要目的要求： ①实验要求 通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子量较大的DNA 的琼脂糖凝胶电泳技术。 ②实验内容 匀浆： 酶解细胞过夜。 酚/氟仿/异戊醇抽提： 无水乙醇抽提 冷乙醇洗涤： 缓冲液溶解： 电泳： 观察分析DNA。 (4)主要仪器： 玻璃匀浆器、台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、低温冰箱普 通冰箱、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪
学习离心机的使用方法； 学习PCR仪的使用方法； 学习电泳仪的使用方法； 学习紫外透射仪的使用方法； 学习微量加样器的使用方法； 学习紫外分光光度计的使用方法； 学习恒温摇床的使用方法； 学习电子天平的使用方法； 学习凝胶成像分析系统的使用方法。 (4) 主要仪器： 离心机、PCR仪、电泳仪、紫外透射仪、凝胶成像分析系统、微量加样器、紫外分 光光度计、电子天平、制冰机、烧杯、量筒、容量瓶、三角瓶、试剂瓶、高压灭菌 锅。 实验项目(二) 基因组DNA提取（4学时）： (1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性■ 验证性■ 设计性□ 综合性□ (3) 项目主要目的要求： ① 实验要求 通过本实验了解并掌握提取基因组DNA的原理和步骤，以及相对分子量较大的DNA 的琼脂糖凝胶电泳技术。 ② 实验内容 匀浆； 酶解细胞过夜。 酚/氯仿/异戊醇抽提； 无水乙醇抽提 冷乙醇洗涤； 缓冲液溶解； 电泳； 观察分析DNA。 (4) 主要仪器： 玻璃匀浆器、台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、低温冰箱普 通冰箱、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪
实验项目（二）聚合酶链式反应扩增(4学时)： (1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性■验证性■设计性☐综合性☐ (3)项目主要目的要求： ①实验要求 学会PCR反应的基本原理与实验技术。 ②实验内容 配制反应体系及设置PCR仪的各项参数； 利用特定引物，扩增目的DNA片段(MTHFR667位，点)： 琼脂糖凝胶电泳检测分析。 (4)主要仪器： 超净工作台（间）、高压灭菌锅、PC仪、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫 外线透射仪。 说明：1.以上项目为基本实验项目，实际授课过程中选做其中30学时。 2.有些实验在下表分配的学时内可能不能完成，需的情而定。 3.因学科的发展或其他原因，实际所上内容必定有所变动。 实验项目（三）质粒DNA的提取(4学时)： (1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性■验证性■设计性口综合性口 (3)项目主要目的要求： ①实验要求 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。 ②实验内容 提取质粒： 溶解保存： 酶切： 电泳、染色、检测质粒DNA。 (4)主要仪器： 台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼 脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。 实验项目（五）琼脂糖凝胶电泳检测DNA(4学时)：
实验项目(二) 聚合酶链式反应扩增（4学时）： (1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性■ 验证性■ 设计性□ 综合性□ (3) 项目主要目的要求： ① 实验要求 学会PCR反应的基本原理与实验技术。 ② 实验内容 配制反应体系及设置PCR仪的各项参数； 利用特定引物，扩增目的DNA片段（MTHFR 667位点）； 琼脂糖凝胶电泳检测分析。 (4) 主要仪器： 超净工作台（间）、高压灭菌锅、PCR仪、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫 外线透射仪。 说明：1. 以上项目为基本实验项目，实际授课过程中选做其中30学时。 2. 有些实验在下表分配的学时内可能不能完成，需酌情而定。 3. 因学科的发展或其他原因，实际所上内容必定有所变动。 实验项目(三) 质粒DNA的提取（4学时）： (1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性■ 验证性■ 设计性□ 综合性□ (3) 项目主要目的要求： ① 实验要求 通过本实验学习和掌握碱裂解法提取质粒。 ② 实验内容 提取质粒； 溶解保存； 酶切； 电泳、染色、检测质粒DNA。 (4) 主要仪器： 台式离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼 脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪。 实验项目(五) 琼脂糖凝胶电泳检测DNA（4学时）：
(1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性■验证性■设计性口综合性口 (3)项目主要目的要求： ①实验要求 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术。 ②实验内容 胶板的制备： 加样： 电泳： 观察分析DNA。 (4)主要仪器： 琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪、微量加样器、台式离心机、高压灭菌锅、 恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射 仪。 实验项目（六）重组质粒的构建（4学时)： (1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性■验证性■设计性口综合性口 (3)项目主要目的要求： ①实验要求 通过实验掌握重组DNA连接的方法。 ②实验内容 制备重组DNA: (4)主要仪器 台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、徽 量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。 实验项目（七）大肠杆菌的遗传转化及筛选(4学时)： (1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性口验证性口设计性口综合性■ (3)项目主要目的要求： ①实验要求 通过实验掌握遗传转化及筛选重组子的方法。 ②实验内容 重组质粒的转化
(1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性■ 验证性■ 设计性□ 综合性□ (3) 项目主要目的要求： ① 实验要求 通过实验掌握琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术。 ② 实验内容 胶板的制备； 加样； 电泳； 观察分析DNA。 (4) 主要仪器： 琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射仪、微量加样器、台式离心机、高压灭菌锅、 恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微量加样器、琼脂糖凝胶电泳系统、紫外线透射 仪。 实验项目(六) 重组质粒的构建（4学时）： (1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性■ 验证性■ 设计性□ 综合性□ (3) 项目主要目的要求： ① 实验要求 通过实验掌握重组DNA连接的方法。 ② 实验内容 制备重组DNA； (4) 主要仪器： 台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微 量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。 实验项目(七)大肠杆菌的遗传转化及筛选（4学时）： (1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性□ 验证性□ 设计性□ 综合性■ (3) 项目主要目的要求： ① 实验要求 通过实验掌握遗传转化及筛选重组子的方法。 ② 实验内容 重组质粒的转化
(4)主要仪器： 台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微 量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。 实验项目（八）生物大分子遗传信息分析(4学时)： (1)项目类别：必做■选做口 (2)项目性质：演示性☐ 验证性口设计性■综合性■ 六、实验学时分配 序号 实验名称 实验类型 课时 1 分子生物学预备实验 验证 4 2 基因组DNA的提取 验证 4 3 聚合酶链式反应扩增 验证 4 4 质粒DNA的提取 验证 4 5 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 验证 4 6 重组质粒的构建 综合 4 7 大肠杆菌的遗传转化及筛选 综合 4 8 生物大分子遗传信息分析 设计 4 合计 32 七、推荐教材与辅助教学资料 《分子生物学实验指导》（第一版），魏群主编，高等教育出版社，2010年
(4) 主要仪器： 台式离心机、低温离心机、高压灭菌锅、恒温水浴锅、旋涡振荡器、电冰箱、微 量加样器、恒温培养箱、恒温摇床。 实验项目(八) 生物大分子遗传信息分析（4学时）： (1) 项目类别：必做■ 选做□ (2) 项目性质：演示性□ 验证性□ 设计性■ 综合性■ 六、实验学时分配 序号 实验名称 实验类型 课时 1 分子生物学预备实验 验证 4 2 基因组DNA的提取 验证 4 3 聚合酶链式反应扩增 验证 4 4 质粒DNA的提取 验证 4 5 琼脂糖凝胶电泳检测DNA 验证 4 6 重组质粒的构建 综合 4 7 大肠杆菌的遗传转化及筛选 综合 4 8 生物大分子遗传信息分析 设计 4 合计 32 七、推荐教材与辅助教学资料 《分子生物学实验指导》（第一版），魏群主编，高等教育出版社，2010年