晋中学院生物科学与技术系：《生物化学》实验课程教学大纲 Biochemistry Experiment.pdf_大学文库

课程目标1：巩固和加深对生物化学理论课基本知识的理解，了解生物化学的研究方法，提高应用理论知识初步进行生物化学研究的能力。（支撑毕业要求指标点3.1）课程目标2：掌握生物化学实验的基本原理和基本操作技能，能对生物体组成物质的结构、性质、功能有明确的认识。（支撑毕业要求指标点3.2）课程目标3：通过在实验过程中观察实验现象，如实记录实验数据，如实报告实验结果，培养良好的实验习惯，实事求是的科学态度严谨细致的业务素质和工匠精神。（支撑毕业要求指标点6.2）课程目标4：要有主动学习和探究性学习的能力，能够根据要求进行生物化学实验方案的设计与实施，能够分析实验中存在的问题并进行反思，具有基础科学研究能力和创新能力，同时培养学生的团队合作意识。（支撑毕业要求指标点7.2和8.1）三、课程目标与毕业要求指标点对应关系课程目标毕业要求毕业要求指标点课程目标1 学科素养（H） 3.1[学科基础]具有系统扎实的生物科学理论基础知识及基本技能，熟悉生物专业知识体系和架构，能综合运用生物学科知识和技能解释生命现象，科学地解决生活实际问题，服务社会。课程目标2 学科素养（H） 3.2[知识整合]关注生物学科发展前沿，掌握生物学科的思维和方法，了解生物科学与数学，化学，物理等学科之间的关联，具有环境保护与生态优先意识。 3.3[学习科学]了解学习科学的相关知识，科学探究生物学科学习的方法，具备一定的创新能力。课程目标3 综合育人（M） 6.2[学科育人]理解生物学科的育人内涵和意义，熟悉生物学科育人的途径与方法，利用生物学科中蕴含的工匠精神、人文精神、科学精神、爱国情感、文化自信、思辨能力等思政元素结合生物教学进行学科育人。课程目标4 学会反思（H） 7.2[反思创新]系统进行批判性思维方法和反思技能的训练，学会独立思考，掌握基本的反思方法与技能，创新性沟通合作（M）地解决专业学习及中学生物教育教学等过程中出现的相关问题，具有积极的教学反思体验。 8.1[团队协作]理解学习共同体在中学生物教育教学工作中的重要作用，明白团队至上、互敬互助的道理，具备团队合作意识，掌握团队协作的相关知识与技能，具有良好的团队协作精神。四、课程目标与教学内容和教学方法对应关系

课程目标 1：巩固和加深对生物化学理论课基本知识的理解，了解生物化学的研究方法，提高应用理论知识初步进行生物化学研究的能力。（支撑毕业要求指标点 3.1）课程目标 2：掌握生物化学实验的基本原理和基本操作技能，能对生物体组成物质的结构、性质、功能有明确的认识。（支撑毕业要求指标点 3.2）课程目标 3：通过在实验过程中观察实验现象，如实记录实验数据，如实报告实验结果，培养良好的实验习惯，实事求是的科学态度严谨细致的业务素质和工匠精神。（支撑毕业要求指标点 6.2）课程目标 4：要有主动学习和探究性学习的能力，能够根据要求进行生物化学实验方案的设计与实施，能够分析实验中存在的问题并进行反思，具有基础科学研究能力和创新能力，同时培养学生的团队合作意识。（支撑毕业要求指标点 7.2 和 8.1）三、课程目标与毕业要求指标点对应关系课程目标毕业要求毕业要求指标点课程目标 1 学科素养（H） 3.1 [学科基础] 具有系统扎实的生物科学理论基础知识及基本技能，熟悉生物专业知识体系和架构，能综合运用生物学科知识和技能解释生命现象，科学地解决生活实际问题，服务社会。课程目标 2 学科素养（H） 3.2 [知识整合] 关注生物学科发展前沿，掌握生物学科的思维和方法，了解生物科学与数学,化学,物理等学科之间的关联，具有环境保护与生态优先意识。 3.3 [学习科学] 了解学习科学的相关知识，科学探究生物学科学习的方法，具备一定的创新能力。课程目标 3 综合育人（M） 6.2[学科育人] 理解生物学科的育人内涵和意义，熟悉生物学科育人的途径与方法，利用生物学科中蕴含的工匠精神、人文精神、科学精神、爱国情感、文化自信、思辨能力等思政元素结合生物教学进行学科育人。课程目标 4 学会反思（H）沟通合作（M） 7.2[反思创新] 系统进行批判性思维方法和反思技能的训练，学会独立思考，掌握基本的反思方法与技能，创新性地解决专业学习及中学生物教育教学等过程中出现的相关问题，具有积极的教学反思体验。 8.1 [团队协作] 理解学习共同体在中学生物教育教学工作中的重要作用，明白团队至上、互敬互助的道理，具备团队合作意识，掌握团队协作的相关知识与技能，具有良好的团队协作精神。四、课程目标与教学内容和教学方法对应关系

实验项目名称支撑序号教学方法学时类型要求课程目标讲授法、课程目标讨论法、验证性选做 pH对酶活性的影响 15 2 1、2、3、4 演示法讲授法、唾液淀粉酶酶的活化课程目标讨论法、验证性必做 2 16 和抑制 1、2、3、4 演示法讲授法、课程目标讨论法、验证性酶的专一性 17 2 必做 1、2、3、4 演示法讲授法、果蔬中维生素C的定课程目标讨论法、综合性选做 4 18 量测定 1、2、3、4 演示法讲授法、小麦萌发前后淀粉酶课程目标讨论法、综合性选做 4 19 活力比较 1、2、3、4 演示法实验1.实验基础知识和常用仪器认识实验目的：学习生化实验的一些基本的理论知识：认识实验室常用仪器；了解实验室的基本要求。实验原理：生物化学实验是配合生物化学理论教学而设置的一门基础课程，主要实验设置为生化基础实验和部分综合实验，一般实验在2学时或4学时内完成。本课程要掌握比色、层析、电泳、离心等生物化学基本实验方法的原理和操作技能，学会选择正确的方法进行生物材料中多种物质的分离、提纯及鉴定。实验仪器：分光光度计、离心机、电热恒温水浴、酸度计、电泳仪、一些玻璃仪器等。实验安排：教师讲解此门课的性质和常用仪器的结构、原理与使用方法；每位学生了解熟悉各种常用仪器的使用。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，简述实验常用仪器的结构，工作原理与使用方法。实验2.糖类的颜色反应实验目的：了解糖类某些颜色反应原理；学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。实验原理：糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）的作用下，脱水生成糠醛及糠醛的衍生物，后者能与a萘酚生成紫红色物质。酸的作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚

序号实验项目名称教学方法学时类型要求支撑课程目标 15 pH 对酶活性的影响讲授法、讨论法、演示法 2 验证性选做课程目标 1、2、3、4 16 唾液淀粉酶酶的活化和抑制讲授法、讨论法、演示法 2 验证性必做课程目标 1、2、3、4 17 酶的专一性讲授法、讨论法、演示法 2 验证性必做课程目标 1、2、3、4 18 果蔬中维生素 C 的定量测定讲授法、讨论法、演示法 4 综合性选做课程目标 1、2、3、4 19 小麦萌发前后淀粉酶活力比较讲授法、讨论法、演示法 4 综合性选做课程目标 1、2、3、4 实验 1. 实验基础知识和常用仪器认识实验目的：学习生化实验的一些基本的理论知识；认识实验室常用仪器；了解实验室的基本要求。实验原理：生物化学实验是配合生物化学理论教学而设置的一门基础课程，主要实验设置为生化基础实验和部分综合实验，一般实验在 2 学时或 4 学时内完成。本课程要掌握比色、层析、电泳、离心等生物化学基本实验方法的原理和操作技能，学会选择正确的方法进行生物材料中多种物质的分离、提纯及鉴定。实验仪器：分光光度计、离心机、电热恒温水浴、酸度计、电泳仪、一些玻璃仪器等。实验安排：教师讲解此门课的性质和常用仪器的结构、原理与使用方法；每位学生了解熟悉各种常用仪器的使用。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，简述实验常用仪器的结构，工作原理与使用方法。实验 2. 糖类的颜色反应实验目的：了解糖类某些颜色反应原理；学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。实验原理：糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）的作用下，脱水生成糠醛及糠醛的衍生物，后者能与α萘酚生成紫红色物质。酸的作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚

作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。实验仪器：试管、试管架、滴管。实验安排：教师讲解α-萘酚反应和间苯二酚反应的原理、方法、步骤与实验注意事项：学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，列表表示，实验结果分析要合理。实验3.糖类的还原作用实验目的：学习常用的鉴定糖的还原性的方法及其原理。实验原理：许多糖类由于其分子中含有自由的或潜在的醛基或酮基，故在碱性溶液中能将铜、铋、汞、铁、银等金属离子还原，同时糖类本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类的这种性质常被用于检测糖的还原性及还原糖的定量检测。本实验利用斐林试剂和本尼迪克特试剂进行糖的还原性的测定。它们都是含Cu2+的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身被还原成红色或黄色的CuO2沉淀。生成的CuO2沉淀的颜色由于在不同条件下产生的沉淀颗粒的大小而不同，颗粒也小呈黄色，颗粒越大呈红色，如有保护剂存在常呈黄色沉淀。实验仪器：试管、试管架、竹试管夹、恒温水浴锅、电热套、电子天平。实验安排：教师讲解斐林反应和本尼迪克特反应的原理、操作步骤及实验注意事项：学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果列表表示，实验结果进行分析，对两种鉴定糖的还原性的反应进行比较。实验4.总糖的测定（葱酮比色法）实验目的：学习葱酮比色法测定样品总糖含量的原理与方法；学习分光光度计的原理和操作方法。实验原理：葱酮比色法的是糖类在较高温度下被硫酸作用脱水生成糠醛或糠醛衍生物，与葱酮缩合呈蓝色化合物。溶液含糖量在150ug.mL以内，于葱酮反应生成的颜色深浅与糖量成正比，是测定样品总糖量的一个灵敏、快速、简便的方法。实验仪器：试管、试管架、移液管、天平、水浴锅、分光光度计。实验安排：教师讲解蕙酮比色法的原理、操作步骤及实验注意事项；学生以4人一组进行实验

作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。实验仪器：试管、试管架、滴管。实验安排：教师讲解α-萘酚反应和间苯二酚反应的原理、方法、步骤与实验注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，列表表示，实验结果分析要合理。实验 3. 糖类的还原作用实验目的：学习常用的鉴定糖的还原性的方法及其原理。实验原理：许多糖类由于其分子中含有自由的或潜在的醛基或酮基，故在碱性溶液中能将铜、铋、汞、铁、银等金属离子还原，同时糖类本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类的这种性质常被用于检测糖的还原性及还原糖的定量检测。本实验利用斐林试剂和本尼迪克特试剂进行糖的还原性的测定。它们都是含 Cu 2+ 的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身被还原成红色或黄色的 CuO2沉淀。生成的 CuO2沉淀的颜色由于在不同条件下产生的沉淀颗粒的大小而不同，颗粒也小呈黄色，颗粒越大呈红色，如有保护剂存在常呈黄色沉淀。实验仪器：试管、试管架、竹试管夹、恒温水浴锅、电热套、电子天平。实验安排：教师讲解斐林反应和本尼迪克特反应的原理、操作步骤及实验注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果列表表示，实验结果进行分析，对两种鉴定糖的还原性的反应进行比较。实验 4. 总糖的测定（蒽酮比色法）实验目的：学习蒽酮比色法测定样品总糖含量的原理与方法；学习分光光度计的原理和操作方法。实验原理：蒽酮比色法的是糖类在较高温度下被硫酸作用脱水生成糠醛或糠醛衍生物，与蒽酮缩合呈蓝色化合物。溶液含糖量在 150µg.mL -1 以内，于蒽酮反应生成的颜色深浅与糖量成正比，是测定样品总糖量的一个灵敏、快速、简便的方法。实验仪器：试管、试管架、移液管、天平、水浴锅、分光光度计。实验安排：教师讲解蒽酮比色法的原理、操作步骤及实验注意事项；学生以 4 人一组进行实验

实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验5.粗脂肪的提取和定量测定实验目的：通过实验掌握索氏提取器提取脂肪的原理与方法；学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。实验原理：利用脂质物质溶于有机溶剂的特性，在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的脂质物质进行提取。因提取的是脂质物质的混合物，故称粗脂肪。在索氏提取器中用沸程为低于30～60°C的石油醚提取样品中的脂质物质，此法为重量法，将由样品提出的粗脂肪，蒸去溶剂，干燥，称重，求出样品中粗脂肪的百分含量。实验仪器：索氏提取器（50mL）、电子天平、烧杯、烘箱、干燥器、恒温水浴锅。实验安排：教师讲解索氏提取法的原理、操作步骤及实验注意事项；讲解索氏提取器的原理及安装；学生以6人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验6.蛋白质含量的测定（考马斯亮兰染色法）实验目的：学习用考马斯亮兰染色法测定蛋白质的含量。实验原理：利用染色方法提高蛋白质消光系数，以提高分光光度法检测灵敏度。考马斯亮蓝G250与蛋白质结合后，染料的最大吸收从465nm变为595nm，用制定标准曲线的方法测595nm吸光度，用标准曲线计算蛋白质含量。实验仪器：分光光度计、电子天平、水浴锅、移液管、烧杯、试管、试管架。实验安排：教师讲解实验原理、操作步骤及实验注意事项；学生以4人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验7.氨基酸的分离鉴定（纸层析法）实验目的：学习纸层析法分离氨基酸的基本原理及操作方法。实验原理：纸层析法是用滤纸作为支持物的分配层析法。滤纸上吸附的水作为固定相，有机溶剂为有机相，有机溶剂流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。物质被分

实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 5. 粗脂肪的提取和定量测定实验目的：通过实验掌握索氏提取器提取脂肪的原理与方法；学习和掌握用重量分析法对粗脂肪进行定量测定。实验原理：利用脂质物质溶于有机溶剂的特性，在索氏提取器中用有机溶剂对样品中的脂质物质进行提取。因提取的是脂质物质的混合物，故称粗脂肪。在索氏提取器中用沸程为低于 30～60℃的石油醚提取样品中的脂质物质，此法为重量法，将由样品提出的粗脂肪，蒸去溶剂，干燥，称重，求出样品中粗脂肪的百分含量。实验仪器：索氏提取器（50mL）、电子天平、烧杯、烘箱、干燥器、恒温水浴锅。实验安排：教师讲解索氏提取法的原理、操作步骤及实验注意事项；讲解索氏提取器的原理及安装；学生以 6 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 6. 蛋白质含量的测定（考马斯亮兰染色法）实验目的：学习用考马斯亮兰染色法测定蛋白质的含量。实验原理：利用染色方法提高蛋白质消光系数，以提高分光光度法检测灵敏度。考马斯亮蓝 G250 与蛋白质结合后，染料的最大吸收从 465nm 变为 595nm，用制定标准曲线的方法测 595nm 吸光度，用标准曲线计算蛋白质含量。实验仪器：分光光度计、电子天平、水浴锅、移液管、烧杯、试管、试管架。实验安排：教师讲解实验原理、操作步骤及实验注意事项；学生以 4 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 7. 氨基酸的分离鉴定（纸层析法）实验目的：学习纸层析法分离氨基酸的基本原理及操作方法。实验原理：纸层析法是用滤纸作为支持物的分配层析法。滤纸上吸附的水作为固定相，有机溶剂为有机相，有机溶剂流经固定相时，物质在两相间不断分配而得到分离。物质被分

离在纸层析图谱上的位置用R+值（比移）表示。 Rr值=原点到层析点中心的距离／原点到溶剂前沿距离实验仪器：层析缸、毛细管、喷雾器、培养血、层析滤纸。实验安排：教师讲解纸层析法分离氨基酸的原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理，报告单上附层析结果（滤纸）。实验8.蛋白质及氨基酸的呈色反应实验目的：掌握双缩脲反应、三酮反应、黄色反应原理和操作方法；利用这些反应了解蛋白质的基本结构及主要连接方式；利用这些反应鉴定蛋白质和氨基酸。实验原理：尿素加热至180°℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与Cu+结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子能发生此反应。除脯氨酸、羟脯氨酸和三酮反应产生黄色物之外，所有α-氨基酸及一切蛋白质都能和三酮反应生成蓝紫色化合物。含有苯环的氨基酸遇硝酸后可被硝化成黄色物质，该物质在碱性溶液中进一步形成橙黄色的邻硝醒酸钠。多数蛋白质含带苯环的氨基酸，所以有黄色反应。实验仪器：试管、试管架、吸管、酒精灯、滤纸。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。列表表示各颜色反应的现象及现象解释。实验9.蛋白质的沉淀反应实验目的：加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识：了解蛋白质沉淀的方法及其实践意义；了解蛋白质变性与沉淀的关系。实验原理：蛋白质在溶液中的稳定性受到外界因素的影响，任何影响蛋白质的带电性和水化作用的因素都会影响蛋白质溶液的稳定性，在适当条件下，蛋白质分子就会因失去电荷和脱水二从溶液中沉淀出来。蛋白质沉淀方法有可逆的等电点沉淀法、盐析法、低温下短时间的有机溶剂沉淀法，不可逆的加热沉淀法、重金属盐沉淀法、有机酸沉淀法、生物碱沉淀法等。实验仪器：电子天平、玻璃漏斗、量筒、试管与试管架、滴管、滤纸

离在纸层析图谱上的位置用 Rf值（比移）表示。 Rf值=原点到层析点中心的距离 / 原点到溶剂前沿距离实验仪器：层析缸、毛细管、喷雾器、培养皿、层析滤纸。实验安排：教师讲解纸层析法分离氨基酸的原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理，报告单上附层析结果（滤纸）。实验 8. 蛋白质及氨基酸的呈色反应实验目的：掌握双缩脲反应、茚三酮反应、黄色反应原理和操作方法；利用这些反应了解蛋白质的基本结构及主要连接方式；利用这些反应鉴定蛋白质和氨基酸。实验原理：尿素加热至 180℃左右，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与 Cu 2+ 结合生成紫红色化合物，此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子能发生此反应。除脯氨酸、羟脯氨酸和茚三酮反应产生黄色物之外，所有α-氨基酸及一切蛋白质都能和茚三酮反应生成蓝紫色化合物。含有苯环的氨基酸遇硝酸后可被硝化成黄色物质，该物质在碱性溶液中进一步形成橙黄色的邻硝醌酸钠。多数蛋白质含带苯环的氨基酸，所以有黄色反应。实验仪器：试管、试管架、吸管、酒精灯、滤纸。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。列表表示各颜色反应的现象及现象解释。实验 9. 蛋白质的沉淀反应实验目的：加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识；了解蛋白质沉淀的方法及其实践意义；了解蛋白质变性与沉淀的关系。实验原理：蛋白质在溶液中的稳定性受到外界因素的影响，任何影响蛋白质的带电性和水化作用的因素都会影响蛋白质溶液的稳定性，在适当条件下，蛋白质分子就会因失去电荷和脱水二从溶液中沉淀出来。蛋白质沉淀方法有可逆的等电点沉淀法、盐析法、低温下短时间的有机溶剂沉淀法，不可逆的加热沉淀法、重金属盐沉淀法、有机酸沉淀法、生物碱沉淀法等。实验仪器：电子天平、玻璃漏斗、量筒、试管与试管架、滴管、滤纸

实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验10.蛋白质等电点的测定实验目的：了解蛋白质两性解离性质；学习测定蛋白质等电点的一种方法。实验原理：当溶液的pH达到一定数值时，蛋白质所带的正电荷与负电荷的数目相等，净电荷为零，此时溶液的pH称该蛋白质的等电点。等电点时，蛋白质具有一些特殊的理化性质，例如在电场中保持静止：溶解度最低，易聚集沉淀，可利用这些性质沉淀蛋白质的等电点。最简单的实用的方法是测蛋白质溶解度最低是的溶液的pH，作为该蛋白质的等电点。本实验通过观察在不同pH溶液中酪蛋白的沉淀情况，以测定酪蛋白等电点。用醋酸与醋酸钠配制不同pH的缓冲液，向各缓冲液中加酪蛋白，观察沉淀情况，沉淀出现最多的缓冲液的pH即为酪蛋白的等电点。实验仪器：恒温水浴锅、电子天平、100mL容量瓶、试管及试管架、研钵、温度计、量筒、200mL锥形瓶、移液管。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验11.SDS-PAGE电泳法测定蛋白质分子量实验目的：掌握SDS-PAGE检测蛋白质分子量原理和方法。掌握垂直板电泳的操作方法。实验原理：十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是以聚丙烯酰胺作为支持介质的电泳方法。蛋白质样品可根据其分子大小、形状以及所带电荷多少等因素造成的电泳迁移率的差别而得到分离。SDS是一种强阴离子型去污剂，能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。在样品和凝胶中加入SDS和还原剂后，强还原剂如巯基乙醇和二硫苏糖醇能使二硫键断裂，通过加热使蛋白质解离，解离后的氨基酸侧链与SDS结合形成带负电荷的蛋白质-SDS复合物，在达到饱和的状态下，每克蛋白质约结合1.4gSDS。由于SDS带有大量负电荷，当它与蛋白质结合时，所带的负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差异

实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 10. 蛋白质等电点的测定实验目的：了解蛋白质两性解离性质；学习测定蛋白质等电点的一种方法。实验原理：当溶液的 pH 达到一定数值时，蛋白质所带的正电荷与负电荷的数目相等，净电荷为零，此时溶液的 pH 称该蛋白质的等电点。等电点时，蛋白质具有一些特殊的理化性质，例如在电场中保持静止；溶解度最低，易聚集沉淀，可利用这些性质沉淀蛋白质的等电点。最简单的实用的方法是测蛋白质溶解度最低是的溶液的 pH，作为该蛋白质的等电点。本实验通过观察在不同 pH 溶液中酪蛋白的沉淀情况，以测定酪蛋白等电点。用醋酸与醋酸钠配制不同 pH 的缓冲液，向各缓冲液中加酪蛋白，观察沉淀情况，沉淀出现最多的缓冲液的 pH 即为酪蛋白的等电点。实验仪器：恒温水浴锅、电子天平、100mL 容量瓶、试管及试管架、研钵、温度计、量筒、200mL 锥形瓶、移液管。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 11. SDS-PAGE 电泳法测定蛋白质分子量实验目的：掌握 SDS-PAGE 检测蛋白质分子量原理和方法。掌握垂直板电泳的操作方法。实验原理：十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是以聚丙烯酰胺作为支持介质的电泳方法。蛋白质样品可根据其分子大小、形状以及所带电荷多少等因素造成的电泳迁移率的差别而得到分离。SDS 是一种强阴离子型去污剂，能断裂分子内和分子间的氢键，使分子去折叠，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。在样品和凝胶中加入 SDS 和还原剂后，强还原剂如巯基乙醇和二硫苏糖醇能使二硫键断裂，通过加热使蛋白质解离，解离后的氨基酸侧链与 SDS 结合形成带负电荷的蛋白质-SDS 复合物，在达到饱和的状态下，每克蛋白质约结合 1.4 g SDS。由于 SDS 带有大量负电荷，当它与蛋白质结合时，所带的负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同种类蛋白质间原有的电荷差异

SDS与蛋白质结合后，还引起了蛋白质构象的改变，使其在水溶液中形状近似于长椭圆棒。不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度一样，而长轴则随蛋白质相对分子量的大小呈正相关关系。因此，根据电泳迁移率的大小可测定蛋白质的分子量。实验仪器：常压电泳仪、垂直电泳槽、20微升微量移液器、Tip头、烧杯、水浴锅实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项：学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验12.酪蛋白的制备实验目的：学习从牛奶中提取酪蛋白的原理和方法。实验原理：牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，含量为35g/L，等电点为4.7.利用等电点时溶解度最低的原理，将牛奶的pH调至4.7，酪蛋白就会沉淀析出。利用醋酸一醋酸钠缓冲液调牛奶的pH至4.7，就有酪蛋白沉淀析出，离心得酪蛋白粗制品。酪蛋白不溶于乙醇、乙醚等溶剂，因此用乙醇和乙醚洗涤沉淀物，出去脂质，得到纯度较高的酪蛋白。实验仪器：离心机、抽滤装置、天平、精密pH试纸、表面皿、烧杯、温度计、量筒实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以4人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验13.酵母核糖核酸的分离及组分鉴定实验目的：通过实验了解核酸的组分，并掌握鉴定核酸组分的方法。实验原理：酵母核酸中RNA含量较多。RNA可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由此得到RNA粗制品。核糖核酸含核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸，加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在；氢氧化钠溶液加热处理酵母，离心后在酸性乙醇溶液沉淀得到核糖核酸粗制品，乙醚洗涤，抽滤，的纯度高的核糖核酸：硫酸溶液中加热得核糖核酸水解液；浓氨水中硝酸银检测嘌呤碱的存在：三氯化铁盐酸溶液中，苔黑酚检测核糖的存在；定磷试剂测磷酸的存在。实验仪器：离心机、抽滤装置、研钵、150mL锥形瓶、水浴锅、量筒、试管及试管架、烧杯、漏斗、滴管。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项：学生以4人一组进行实验

SDS 与蛋白质结合后，还引起了蛋白质构象的改变，使其在水溶液中形状近似于长椭圆棒。不同蛋白质的 SDS 复合物的短轴长度一样，而长轴则随蛋白质相对分子量的大小呈正相关关系。因此，根据电泳迁移率的大小可测定蛋白质的分子量。实验仪器：常压电泳仪、垂直电泳槽、20 微升微量移液器、Tip 头、烧杯、水浴锅实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 12. 酪蛋白的制备实验目的：学习从牛奶中提取酪蛋白的原理和方法。实验原理：牛奶中主要的蛋白质是酪蛋白，含量为 35g/L，等电点为 4.7.利用等电点时溶解度最低的原理，将牛奶的 pH 调至 4.7，酪蛋白就会沉淀析出。利用醋酸—醋酸钠缓冲液调牛奶的 pH 至 4.7，就有酪蛋白沉淀析出，离心得酪蛋白粗制品。酪蛋白不溶于乙醇、乙醚等溶剂，因此用乙醇和乙醚洗涤沉淀物，出去脂质，得到纯度较高的酪蛋白。实验仪器：离心机、抽滤装置、天平、精密 pH 试纸、表面皿、烧杯、温度计、量筒实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 4 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 13. 酵母核糖核酸的分离及组分鉴定实验目的：通过实验了解核酸的组分，并掌握鉴定核酸组分的方法。实验原理：酵母核酸中 RNA 含量较多。RNA 可溶于碱性溶液，在碱提取液中加入酸性乙醇溶液可以使解聚的核糖核酸沉淀，由此得到 RNA 粗制品。核糖核酸含核糖、嘌呤碱、嘧啶碱和磷酸，加硫酸煮沸可使其水解，从水解液中可以测出上述组分的存在；氢氧化钠溶液加热处理酵母，离心后在酸性乙醇溶液沉淀得到核糖核酸粗制品，乙醚洗涤，抽滤，的纯度高的核糖核酸；硫酸溶液中加热得核糖核酸水解液；浓氨水中硝酸银检测嘌呤碱的存在；三氯化铁盐酸溶液中，苔黑酚检测核糖的存在；定磷试剂测磷酸的存在。实验仪器：离心机、抽滤装置、研钵、150mL 锥形瓶、水浴锅、量筒、试管及试管架、烧杯、漏斗、滴管。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 4 人一组进行实验

实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验14.温度对酶活性的影响实验目的：通过实验加深理解温度对酶活性影响。实验原理：酶的催化作用受温度的影响，最适温度下，酶的反应速度最高。温度对酶的稳定性与其存在形式有关，有些没的干制剂加热到100°℃，其活性并无影响，但100℃以下溶液中很快失去活性。高温使酶变性失活，低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。淀粉遇碘显蓝色。设置不同温度，用碘液检测唾液淀粉酶对淀粉的颜色反应，反映淀粉的水解情况。实验仪器：烧杯、量筒、试管、试管架、恒温水浴锅。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验15.pH对酶活性的影响实验目的：通过实验加深理解pH对酶活性的影响。实验原理：酶活性受环境pH的影响极为显著。不同酶的最适pH不同，体现了酶易变性失活的特点。在磷酸氢二钠—柠檬酸制备的不同pH的缓冲液中观察唾液淀粉酶对淀粉的水解程度。实验仪器：烧杯、量筒、试管及试管架、50mL锥形瓶、滴管、移液管、恒温水浴锅。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以2人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。列表表示不同pH缓冲液中淀粉水解现象并解释现象。实验16.唾液淀粉酶的活化和抑制实验目的：通过实验了解激活剂、抑制剂对唾液淀粉酶的作用。实验原理：酶的活性除了受温度、pH的影响外，还受活化剂和抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂，比较唾液淀粉酶在氯化钠、硫酸铜、硫酸钠

实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 14. 温度对酶活性的影响实验目的：通过实验加深理解温度对酶活性影响。实验原理：酶的催化作用受温度的影响，最适温度下，酶的反应速度最高。温度对酶的稳定性与其存在形式有关，有些没的干制剂加热到 100℃，其活性并无影响，但 100℃以下溶液中很快失去活性。高温使酶变性失活，低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。淀粉遇碘显蓝色。设置不同温度，用碘液检测唾液淀粉酶对淀粉的颜色反应，反映淀粉的水解情况。实验仪器：烧杯、量筒、试管、试管架、恒温水浴锅。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。实验 15. pH 对酶活性的影响实验目的：通过实验加深理解 pH 对酶活性的影响。实验原理：酶活性受环境 pH 的影响极为显著。不同酶的最适 pH 不同，体现了酶易变性失活的特点。在磷酸氢二钠—柠檬酸制备的不同 pH 的缓冲液中观察唾液淀粉酶对淀粉的水解程度。实验仪器：烧杯、量筒、试管及试管架、50mL 锥形瓶、滴管、移液管、恒温水浴锅。实验安排：教师讲解实验原理、实验操作步骤及注意事项；学生以 2 人一组进行实验。实验场所：生物化学实验室。实验报告要求：按照实验报告单上要求的内容书写，特别是实验步骤要简洁明了准确，实验结果要真实，实验结果分析要合理。列表表示不同 pH 缓冲液中淀粉水解现象并解释现象。实验 16. 唾液淀粉酶的活化和抑制实验目的：通过实验了解激活剂、抑制剂对唾液淀粉酶的作用。实验原理：酶的活性除了受温度、pH 的影响外，还受活化剂和抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂，比较唾液淀粉酶在氯化钠、硫酸铜、硫酸钠