第十九章平面色谱法 Plane chromatography 第一节分类和原理 第二节薄层色谱 第三节纸色谱法 20243/12
2024/3/12 第一节 分类和原理 第二节 薄层色谱 第三节 纸色谱法 第十九章 平面色谱法 Plane chromatography
第一节分类和原理 一、分类 1.薄层色谱法； 2.纸色谱法； 3.薄层电泳法； 层析室 层 纸 组份麻点 展开剂 展开剂 层析板 纸层析装置 薄层层析装置 2024/3/12
2024/3/12 一、分类 1. 薄层色谱法； 2. 纸色谱法; 3. 薄层电泳法； 第一节 分类和原理
层析室 层析 份 点 展开剂 展开刺 层析板 纸层析装置 薄层层析装置 纸层析和薄层层析也属于色谱分析法。但与其 它色谱方法不同的是在分离过程中一般不使用 动力源。纸层析和薄层层析流动相的移动是依 靠毛细作用。 2024/3/12
2024/3/12 纸层析和薄层层析也属于色谱分析法。但与其 它色谱方法不同的是在分离过程中一般不使用 动力源。纸层析和薄层层析流动相的移动是依 靠毛细作用
层析室 层折 组份麻 展开剂 展开剂 层折板 纸层析装置 薄层层析装置 将试样点在色谱滤纸或层析板的一端，并 将该端浸在作为流动相的溶剂（常称之为 展开剂)中，随着溶剂向上的移动，经过 试样点时，带动试样向上运动。原理与柱 色谱相同。 2024/3/12
2024/3/12 将试样点在色谱滤纸或层析板的一端，并 将该端浸在作为流动相的溶剂（常称之为 展开剂）中，随着溶剂向上的移动，经过 试样点时，带动试样向上运动。原理与柱 色谱相同
二、参数 (一)定性参数： ◆此移值：溶质移动距离与流动相移动距离之比 斑点中心移动的距离 RE 溶剂前沿移动的距离 0 0 REL/L R值在0.2-0.8之间一般，在0.3-0.5之间最佳 ◆相对比移值 R,=R(i)/R(s)=L/Ls 2024/3/12
2024/3/12 二、参 数 Rf=L/Lo Rf值在0.2－0.8之间一般，在0.3－0.5之间最佳 (一）定性参数： 比移值 :溶质移动距离与流动相移动距离之比 原 点 前 沿 相对比移值 Rr= Rf (i)/ Rf (s)=Li /Ls
(二)相平衡参数一一分配系数和容量因子 ·R’一流动相中停留的时间分数，单位时间内 一个分子在流动相中出现的几率。 (1-R')/R'=X:/Xm=CV:/(CmVm)=KV:/Vm=k R'=1/八1+k) ·R’也可表示组分分子在面上移动的速度。 R=L/儿o=ut/=R'=1/八1+k) 2024/3/12
2024/3/12 （二）相平衡参数——分配系数和容量因子 • R’—— 流动相中停留的时间分数，单位时间内 一个分子在流动相中出现的几率。 • R’也可表示组分分子在面上移动的速度。 (1- R’)/R’=Xs /Xm=CsVs /(CmVm)=KVs /Vm =k R’=1/(1+k) Rf ＝L/L0=ut/u0 t= R’=1/(1+k)
(三)面效参数： 理论塔板数n=16(LW)2 塔板高度 H=Lo/n (四)分离参数： 分离度：R=(L2l1/IW1+W2/2]=2d/W1+W2)>1 分离数SN:(R=1.177时)R=0到R=1容纳斑点数 SN=Lo/(bo+b)-1 Rf0时组分的半峰宽 Rf=1时组分的半峰宽 bo和b1是通过测定其它组分的R值和半峰宽，二者在一定 点样量范围内成直线关系，用回归方程求得。 2024/3/12
2024/3/12 （三）面效参数： 理论塔板数 n=16(L/W)2 塔板高度 H=L0 /n （四）分离参数： 分离度：R=(L2 -L1 )/[(W1+W2 )/2]=2d/(W1+W2 )＞1 分离数SN: (R＝1.177时）Rf=0到Rf=1容纳斑点数 SN=L0 /(b0+b1 ) -1 b0和b1是通过测定其它组分的Rf值和半峰宽，二者在一定 点样量范围内成直线关系，用回归方程求得。 Rf=0时组分的半峰宽 Rf=1时组分的半峰宽
第二节薄晏色增 一、类型：吸附色谱、分配色谱 1、吸附色谱：固定相为吸附剂。A、B两组分在 薄层板上经过一一一 吸附 解 吸 再吸附 再解吸 由于两组分在固定相的吸附能力不同，展开剂对 两组的溶解能力的不同，即吸附系数不同，移动 速度不同。极性大的组分迁移速度慢，R小。 2024/3/12
2024/3/12 一、类型：吸附色谱、分配色谱 1、吸附色谱：固定相为吸附剂。A、B两组分在 薄层板上经过－－－ 第二节 薄层色谱 吸附 解 吸 再吸附 再解吸 由于两组分在固定相的吸附能力不同，展开剂对 两组的溶解能力的不同，即吸附系数不同，移动 速度不同。极性大的组分迁移速度慢，Rf小
2、分配色谱： 利用试样中各组分在固定相与流动相之间的分配系数的 不同，各组分在板上的迁移速度不同而获得分离的薄层 色谱法。 ■正相色谱：流动相的极性比固定相的极性小。 例：Si-OH表面吸附17%水为固定相， 极性较强，流动相用弱极性溶剂正相分配色谱。 极性大的组分R小。 ■反相色谱：流动相的极性比固定相的极性大。 极性大的组分R大。 2024/3/12
2024/3/12 2、分配色谱： 利用试样中各组分在固定相与流动相之间的分配系数的 不同，各组分在板上的迁移速度不同而获得分离的薄层 色谱法。 正相色谱：流动相的极性比固定相的极性小。 例： Si-OH表面吸附17％水为固定相， 极性较强，流动相用弱极性溶剂正相分配色谱。 极性大的组分Rf小。 反相色谱：流动相的极性比固定相的极性大。 极性大的组分Rf大
二、吸附剂，展开剂 (一)吸附剂层析板)：吸附色谱固定相， 用专门的涂布器把浆状的吸附剂（硅胶或氧化铝， 10~401m)均匀地涂在长条形玻璃板上（厚度0.15~ 0.5mm),千燥活化后即可使用。 夏附中心 1 硅胶：表面带有硅醇基 ∈Si一O—H 氢键 极性基团 各组分的极性基团与硅醇基形 成氢键的能力不同而被分离 2024/3/12
2024/3/12 二、吸附剂，展开剂 （一） 吸附剂(层析板): 吸附色谱固定相， 用专门的涂布器把浆状的吸附剂（硅胶或氧化铝， 10～40µm）均匀地涂在长条形玻璃板上（厚度0.15～ 0.5mm），干燥活化后即可使用。 1 硅胶： 表面带有 硅醇基 ≡Si—O—H 极性基团 各组分的极性基团与硅醇基形 成氢键的能力不同而被分离 氢键 吸附中心