第二十章 毛细管电泳法 Capillary Flectrophoresis CR 第一节毛细管电泳的特点和分类 第二节毛细管电泳理论 第三节毛细管电泳的主要分离模式 第四节毛细管电泳仪
第二十章 毛细管电泳法 Capillary Electrophoresis,CE 第一节 毛细管电泳的特点和分类 第二节 毛细管电泳理论 第三节 毛细管电泳的主要分离模式 第四节 毛细管电泳仪
高效毛细管电泳仪器(1) 毛细管电冰仪
高效毛细管电泳仪器(1)
高效毛细管电泳仪器(2) 毛细营电泳仪
高效毛细管电泳仪器(2)
高效毛细管电泳仪器(3) 毛细管电冰仪以
高效毛细管电泳仪器(3)
概述 在电解质溶液中,位于电场中的带电粒子在电场的作用 下,以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现 象,称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同, 迁移速室不同可实现分离。 1.经典电泳分离法的不足 Detecto Capillary 所用分离柱的柱径大,柱 较短,分离效率不高(远低于 HPLC),温度影响大。 高效毛细管电泳在技术上采 Electrode 取了两项重要改进。 图20-1
概 述 在电解质溶液中,位于电场中的带电粒子在电场的作用 下,以不同的速度向其所带电荷相反的电极方向迁移的现 象,称之为电泳。由于不同离子所带电荷及性质的不同, 迁移速率不同可实现分离。 1.经典电泳分离法的不足 所用分离柱的柱径大,柱 较短,分离效率不高(远低于 HPLC),温度影响大。 高效毛细管电泳在技术上采 取了两项重要改进。 图 20-1
2.高效毛细管电泳技术上的重要突破 高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进: 集一是采用了0.05mm内径的毛细管; 毛细管的采用使产生的热量能够较快散发,大大减 小了温度效应,使电场电压可以很高; ↓二是采用了高达数千伏的电压。 电压升高,电场推动力大,又可进一步使柱径变小, 柱长增加; >高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱,理论 塔板数高达几十万块/米,特殊柱子可以达到数百万。 ?毛细管电泳法:是在散热效率很高的毛细管内进行的 电泳,可以应用高电压,极大改善了分离效果。 返 回
2.高效毛细管电泳技术上的重要突破 高效毛细管电泳在技术上采取了两项重要改进: 一是采用了0.05mm内径的毛细管; 毛细管的采用使产生的热量能够较快散发,大大减 小了温度效应,使电场电压可以很高; 二是采用了高达数千伏的电压。 电压升高,电场推动力大,又可进一步使柱径变小, 柱长增加; ➢ 高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱,理论 塔板数高达几十万块/米,特殊柱子可以达到数百万。 ❖ 毛细管电泳法:是在散热效率很高的毛细管内进行的 电 泳,可以应用高电压,极大改善了分离效果
3毛细管电泳的特点 电泳与色潜 分离原理不同 分离过程相同 流程相同
电泳与色谱 ➢ 分离原理不同 ➢ 分离过程相同 ➢ 流程相同 3 毛细管电泳的特点
1分离原理: 电泳一带电粒子在一定介质中因电场作用而发生定 向运动,因粒子所带的电荷数、形状、离解度等不 同,有不同的迁移速度而不同。 色谱一不同组分在两相中的分配系数不同而分离。 2分离过程: 差速迁移过程。名词、概念、基本理论均适用。 仪器流程: 3 进样、分离、检测、数据处理
1 分离原理: 电泳―带电粒子在一定介质中因电场作用而发生定 向运动,因粒子所带的电荷数、形状、离解度等不 同,有不同的迁移速度而不同。 色谱―不同组分在两相中的分配系数不同而分离。 2 分离过程: 差速迁移过程。名词、概念、基本理论均适用。 3 仪器流程: 进样、分离、检测、数据处理
毛细管电泳的特点 1. 高分辨室:理论塔板数高达数百万块,甚至数 千万块。 2. 高灵敏度:可检测出低至10-21mol/L浓度的物 质。 3. 高分析速度:可在3分钟内分离30种阴离子; 1.7分钟分离19种阳离子;4分钟可分离10种蛋 白质。 4. 试样用量少:仅需几nL(109L)的试样 5. 仪器简单,操作成本低,污染小:分析一个试 样仅需几毫升流动液 6. 应用广泛
1. 高分辨率:理论塔板数高达数百万块,甚至数 千万块。 2. 高灵敏度:可检测出低至10-21 mol/L浓度的物 质。 3. 高分析速度:可在3分钟内分离30种阴离子; 1.7分钟分离19种阳离子;4分钟可分离10种蛋 白质. 4. 试样用量少:仅需几nL(10-9 L)的试样 5. 仪器简单,操作成本低,污染小:分析一个试 样仅需几毫升流动液 6. 应用广泛 毛细管电泳的特点
第一节毛细管电泳理论 电渗和电渗率 电渗—— 是一种液体相对于带电的管壁移动的现象。 电渗的形成:石英毛细管内壁表面硅羟基在缓冲溶液中发 生电离,带负电,并吸引溶液中的阳离子,形成双电层, 在高电场的作用下引起柱中的阳离子向阴极运动。并携带 溶液整体向负极移动,形成电渗流。 电渗流:液体的整体流动。uos=uosE E为电场强度。 山os电渗率,山os=E50s/) 方 向:阳极→阴极
一、电渗和电渗率 电渗 —— 是一种液体相对于带电的管壁移动的现象。 电渗的形成:石英毛细管内壁表面硅羟基在缓冲溶液中发 生电离,带负电,并吸引溶液中的阳离子,形成双电层, 在高电场的作用下引起柱中的阳离子向阴极运动。并携带 溶液整体向负极移动,形成电渗流。 电渗流:液体的整体流动。uos=μos E E为电场强度。 μos电渗率,μos=ε ξos /η 方 向:阳极→阴极。 第一节 毛细管电泳理论