HBSAg测定的方法学评价
HBsAg测定的方法学评价
问题1 ■测定HBsAg的方法有哪些？
问题 1 ◼ 测定HBsAg的方法有哪些？
问题2 ■简述各测定方法的原理？
问题 2 ◼ 简述各测定方法的原理？
讨论 ■评价各测定方法的优缺点。 ■评价各测定方法的灵敏度与精密度
讨 论 ◼ 评价各测定方法的优缺点。 ◼ 评价各测定方法的灵敏度与精密度
几种常用的方法 ■CLIA(化学发光免疫分析) ■ELISA(酶联免疫吸附试验) ■DICA(斑点金免疫层析试验)
几种常用的方法 ◼ CLIA（化学发光免疫分析） ◼ ELISA（酶联免疫吸附试验） ◼ DICA（斑点金免疫层析试验）
CLIA(化学发光免疫分析) ARCHITECT'i2000sR ■方法学：CLIA ■标记物：吖啶酯 ■固相载体：磁性微粒子 ■底物：Pre-trigger (双氧水)/trigger （氢氧化钠) ·分离：磁石 your workflow solutions
一、 CLIA（化学发光免疫分析） ◼ 方法学：CLIA ◼ 标记物：吖啶酯 ◼ 固相载体：磁性微粒子 ◼ 底物： Pre-trigger （双氧水）/trigger （氢氧化钠） ◼ 分离：磁石
原理一双抗体夹心法 抗缕被的 吖啶酯 标记抗体 洗涤清除 2+H,0+OH +H,0 氧化剂P州纠正液 吖啶酯发光
原理－双抗体夹心法
方法学评价 ■灵敏度高、特异性好，重复性好； ■自动化程度高，快速、简便； ■试剂有效期长、没有放射性污染； ■仪器贵重，难于普及
方法学评价 ◼ 灵敏度高、特异性好，重复性好； ◼ 自动化程度高，快速、简便； ◼ 试剂有效期长、没有放射性污染； ◼ 仪器贵重，难于普及
酶联免疫吸附试验（ELISA) 方法类型 ■测定对象：抗原或抗体； ■试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记 的抗原或抗体，③酶作用的底物。 ■类型：双抗体夹心法、双位点一步法、 间接法、竞争法、捕获法
二、酶联免疫吸附试验（ELISA） 方法类型 ◼ 测定对象：抗原或抗体 ； ◼ 试剂：①固相的抗原或抗体，②酶标记 的抗原或抗体，③酶作用的底物。 ◼ 类型 ：双抗体夹心法 、双位点一步法 、 间接法 、竞争法 、捕获法
双位点一步法 应用两个单克隆抗体，特异性高 标本 (含抗原) AOE S 网 M相抗A E 酶标抗B 双位点一步法示意图 钩状效应(hook effect)
双位点一步法 应用两个单克隆抗体，特异性高 钩状效应（hook effect）