第二十一章化学发光免疫技术 温州医学院检验医学院 临床免疫学检验教研室 张文辉
第二十一章 化学发光免疫技术 温州医学院检验医学院 临床免疫学检验教研室 张文辉
发光免疫分析： 是将发光分析和免疫反应相结合而 建立起来的一种新的检测微量抗原或 抗体的新型标记免疫分析技术。 ·特点： ·特异性高、敏感性高、分离简便、 快速、试剂无毒、安全稳定、 可自动化
发光免疫分析: 是将发光分析和免疫反应相结合而 建立起来的一种新的检测微量抗原或 抗体的新型标记免疫分析技术。 ▪ 特点： ▪ 特异性高、敏感性高、分离简便、 ▪ 快速、试剂无毒、安全稳定、 ▪ 可自动化
第一节概述 发光：是指分子或原子中的电子吸收能量后， 由基态（较低能级）跃迁到激发态（较高 能级)，然后再返回到基态，并释放光子 的过程。 ·根据形成激发态分子的能量来源不同可分 为 ·光照发光、生物发光、化学发光等
第一节 概 述 ▪ 发光:是指分子或原子中的电子吸收能量后， 由基态（较低能级）跃迁到激发态（较高 能级），然后再返回到基态，并释放光子 的过程。 ▪ 根据形成激发态分子的能量来源不同可分 为: ▪ 光照发光、生物发光、化学发光等
光照发光(photoluminescence) 指发光剂（荧光素）经短波长的 入射光照射后，电子吸收能量跃 迁到激发态，在其回复至基态时， 发射出较长波长的可见光（荧 光)
光照发光（photoluminescence） 指发光剂（荧光素）经短波长的 入射光照射后，电子吸收能量跃 迁到激发态，在其回复至基态时， 发射出较长波长的可见光（荧 光）
生物发光(bioluminescence). 萤火虫荧光素 荧光素酶 ATP;O2;Mg2+ +AMP+0,+C0,+ 氧化萤火虫荧光素
生物发光（bioluminescence） 萤火虫荧光素 荧光素酶 ATP；O2；Mg2+ 氧化萤火虫荧光素 光 + AMP+ O2 + CO2 +
化学发光(chemiluminescence) 指伴随化学反应过程所产生的光的 发射现象。某些物质（发光剂在化学 反应时，吸收了反应过程中所产生的 化学能，使反应的产物分子或反应的 中间态分子中的电子跃迁到激发态， 当电子从激发态回复到基态时，以发 射光子的形式释放出能量，这一现象 称为化学发光
化学发光（chemiluminescence） 指伴随化学反应过程所产生的光的 发射现象。某些物质(发光剂)在化学 反应时，吸收了反应过程中所产生的 化学能，使反应的产物分子或反应的 中间态分子中的电子跃迁到激发态， 当电子从激发态回复到基态时，以发 射光子的形式释放出能量，这一现象 称为化学发光
一些化学反应能释放足够 的能量把参加反应的物质激 发到能发射光的电子激发态， 若被激发的是一个反应产物 分子，则这种反应过程叫直 接化学发光。反应过程可简单地描述如下： A十B C兴 C* C+hY 其中y为光子，C*表示C处于单线激发态
一些化学反应能释放足够 的能量把参加反应的物质激 发到能发射光的电子激发态， 若被激发的是一个反应产物 分子，则这种反应过程叫直 接化学发光。反应过程可简单地描述如下： A十B C* C* C＋ h·γ 其中γ为光子，C*表示C处于单线激发态
若激发能传递到另一个未参加化学反应 的分子D上，使D分子激发到电子激发态， D分子从激发态回到基态时发光，这种过 程叫间接化学发光。 反应过程可表示如下： A十B C* C*十D C十D* D* D十hy
若激发能传递到另一个未参加化学反应 的分子D上，使D分子激发到电子激发态， D分子从激发态回到基态时发光，这种过 程叫间接化学发光。 反应过程可表示如下： A十B C* C*十D C十D* D* D十h·γ
二、化学发光效率 化学发光效率决定于生成激发态产 物分子的化学激发效率（φCE)和 激发态分子的发射效率(pEM)。 化学发光反应的发光效率、光辐射 的能量大小以及光谱范围，完全由 发光物质的性质所决定，每一个发 光反应都具有其特征性的化学发光 光谱和不同的化学发光效率
二、化学发光效率 化学发光效率决定于生成激发态产 物分子的化学激发效率（φCE）和 激发态分子的发射效率（φEM）。 化学发光反应的发光效率、光辐射 的能量大小以及光谱范围，完全由 发光物质的性质所决定，每一个发 光反应都具有其特征性的化学发光 光谱和不同的化学发光效率
第二节化学发光剂和标记技术
第二节 化学发光剂和标记技术