放射免疫分析 (RIA) 总三碘甲腺原氨酸(TT3)
放射免疫分析 （RIA） 总三碘甲腺原氨酸(TT3 )
实验原理 *g(定望) *Ag Ab (B)+*Ag (F) *Ag Ab (B) 十也（适星，微球） 竞争 离心 g(侍测) 去上清 g凸+g Ag Ab 注：*放射性物质 ·*Ag与抗体的结合量与样本中待测Ag的含量在 一定的限度内是呈一定的函数关系，所以利用 这个原理去测定标本中待测抗原的量
实验原理 • *Ag与抗体的结合量与样本中待测Ag的含量在 一定的限度内是呈一定的函数关系，所以利用 这个原理去测定标本中待测抗原的量。 注：*放射性物质 竞争
主要的试剂和器材 1.1251-T3 2.抗T3微球 3.T3标准品(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ng/mL0 4.质控血清（高值2.42~5.02ng/ml,低值0.32~ 0.66ng/ml) 5.y-计数仪
主要的试剂和器材 1. 125I-T3 2. 抗T3微球 3. T3标准品（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ng/mL） 4. 质控血清（高值2.42～5.02ng/ml，低值0.32～ 0.66ng/ml） 5. γ-计数仪
实验步骤 1.试管编号(9只试管) 总T管编号为 下 6个标准管编号分别为B。,1,2,3,4,5 质控管编号为 高，低
实验步骤 1.试管编号（9只试管） 总T管编号为 T 6个标准管编号分别为 B0，1，2，3，4，5 质控管编号为 高，低
2.加样按照表格加试剂和操作（μ！) 试管编号 标准 标准 高 低 所加物 B 15 T3标准品 25 25 质挖品 25 25 1251-T3 100 100 100 100 100 抗T,微球 100 100 100 100 37℃温育60min 除T管外，各管离心3000rpm*15mim, 弃上清，测定各管沉淀部分的放射性计数率
2.加样 按照表格加试剂和操作（μι）
实验结果 实验数据 NO. POS TIME DOSE COUNT CPM S TOTLE 1 30 1800 3600 Bo 2 0 1200 2400 1 3 0.5 2250 2 4 1.0 2000 5 2.0 1600 4 6 4.0 800 7 8.0 0
实验结果 实验数据 NO. POS TIME DOSE COUNT S CPM TOTLE 1 30 1800 3600 B0 2 0 1200 2400 1 3 0.5 2250 2 4 1.0 2000 3 5 2.0 1600 4 6 4.0 800 5 7 8.0 0
标准曲线 IgTT3 ng/ml
标准曲线Logit B/B 0 lgTT3 ng/ml 0
计算高值和低值的浓度 NO. POS TIME COUNTS CPM Conc. 1 8 30 ? 2 9 30
计算高值和低值的浓度 NO. POS TIME COUNTS CPM Conc. 1 8 30 ? ? ? 2 9 30 ? ? ?
注意事项 加样的顺序要严格按照操作顺序表。 加抗体微球前，要将试剂充分混匀。 加125工-T3和抗T3微球后，都要将试管中的液体摇匀。 。 离心后弃上清的方法为将上清倒掉后，马上将试管倒 扣在吸水纸上，静置5min。不能拍打试管。 注意T管的操作与其他管不一样
注意事项 • 加样的顺序要严格按照操作顺序表。 • 加抗体微球前，要将试剂充分混匀。 • 加125I-T3和抗T3微球后，都要将试管中的液体摇匀。 • 离心后弃上清的方法为将上清倒掉后，马上将试管倒 扣在吸水纸上，静置5min。不能拍打试管。 • 注意T管的操作与其他管不一样
方法学评价 。 RIA敏感度高，能测到ug/儿，甚至ng/儿或 pg儿水平，交叉反应少，特异性强，重复性好 用血量少。 ·缺点是存在放射性污染以及放射性标记物不稳 定，试剂有效期短
方法学评价 • RIA敏感度高，能测到μg/L，甚至ng/L或 pg/L水平，交叉反应少，特异性强，重复性好， 用血量少。 • 缺点是存在放射性污染以及放射性标记物不稳 定，试剂有效期短