第十六章沉淀反应 Precipitation 温州医学院检验医学院 临床免疫学检验教研室 陈占国
第十六章 沉淀反应 Precipitation 温州医学院检验医学院 临床免疫学检验教研室 陈占国
沉淀反应原理及特点 沉淀反应(precipitation)是指可溶性 抗原与相应抗体在适当条件下发生特 异性结合而出现的沉淀现象，其特性与 经典的抗原抗体反应相同
沉淀反应原理及特点 沉淀反应（precipitation）是指可溶性 抗原与相应抗体在适当条件下发生特 异性结合而出现的沉淀现象,其特性与 经典的抗原抗体反应相同
沉淀反应分两个阶段 第一阶段 第二阶段 抗原抗体特异性结合，快形成肉眼可见的大的免疫 速但不可见。免疫比浊法 复合物。沉淀线或沉淀环 中的速率法就是利用此阶 的观察以及免疫比浊法中 段测定免疫复合物形成的 的终点法就是测定此阶段 速率。 形成的复合物
形成肉眼可见的大的免疫 复合物。沉淀线或沉淀环 的观察以及免疫比浊法中 的终点法就是测定此阶段 形成的复合物 第一阶段 第二阶段 沉淀反应分两个阶段 抗原抗体特异性结合，快 速但不可见。免疫比浊法 中的速率法就是利用此阶 段测定免疫复合物形成的 速率
沉淀反应可分三类 液体内沉淀 凝胶内沉淀 凝胶免疫电 试验 试验 泳技术 免疫 单向 浊度 扩散 对流免疫电泳 试验 火箭免疫电泳 絮状 双向 免疫电泳 沉 扩散 免疫固定电泳 验 试验
免疫 浊度 测定 絮状 沉淀 试验 单向 扩散 试验 双向 扩散 试验 对流免疫电泳 火箭免疫电泳 免疫电泳 免疫固定电泳 液体内沉淀 试验 凝胶内沉淀 试验 凝胶免疫电 泳技术 沉淀反应可分三类
第一节 液相沉淀试验
第一节 液相沉淀试验
絮状沉淀试验 •絮状沉淀试验是将抗原与相应抗体混合 在电解质存在的条件下，抗原抗体结合 形成肉眼可见的絮状沉淀物。 ·方法受抗原抗体比例的影响非常明显 •应用于测定抗原抗体反应的最适比例 (三种类型)
•絮状沉淀试验是将抗原与相应抗体混合， 在电解质存在的条件下，抗原抗体结合 形成肉眼可见的絮状沉淀物。 •方法受抗原抗体比例的影响非常明显 •应用于测定抗原抗体反应的最适比例 (三种类型) 一、 絮状沉淀试验
絮状沉淀试验 抗原稀释法：抗原最适比例 抗体稀释法：抗体最适比例 方阵滴定法：抗原抗体最适比例
抗原稀释法：抗原最适比例 抗体稀释法：抗体最适比例 方阵滴定法：抗原抗体最适比例 絮状沉淀试验
表6-1最适比方阵测定法 抗原稀释度 1/101/201/401/801/1601/3201/640对期 1/5 1/10 1/20 1/40 1/80
表6-1 最适比方阵测定法 抗体 稀释度 抗原稀释度 1/10 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 对照 1/5 + + + + + + + + + + + + ± — 1/10 + + + + + + + + + + + + + — 1/20 + + + + + + + + + + + + + — 1/40 — ± + + + + + + + + + — 1/80 — — — — + + + —
二、 环状沉淀试验 ·将抗原溶液加在细小玻璃管中抗体溶液上面， 抗原与抗体在两液交界面处特异性结合，形 成白色沉淀环 ●操作简便、快速，灵敏度低。 ●临床意义：鉴定血迹、诊断炭疽
二、环状沉淀试验 ⚫将抗原溶液加在细小玻璃管中抗体溶液上面， 抗原与抗体在两液交界面处特异性结合，形 成白色沉淀环 ⚫操作简便、快速，灵敏度低。 ⚫临床意义：鉴定血迹、诊断炭疽
操作步骤 环状沉淀示意图 沉淀管内径1.5~2mm Ag 1~5min出现沉淀环为阳性 Ab 30min不出现沉淀环为阴性
Ab Ag 环 状 沉 淀 示 意 图 •沉淀管内径1.5～2mm •1～5min出现沉淀环为阳性 •30min不出现沉淀环为阴性 操作步骤