第二十三章流式细胞术 温州医学院检验医学院 临床免疫学检验教研室 林向阳
第二十三章 流式细胞术 温州医学院检验医学院 临床免疫学检验教研室 林向阳
内容提要 ■流式细胞仪的原理 ■数据的显示与分析 ·流式细胞仪免疫分析 ■流式细胞术在免疫中的应用
内容提要 n 流式细胞仪的原理 n 数据的显示与分析 n 流式细胞仪免疫分析 n 流式细胞术在免疫中的应用
EPICS XL流式细胞分析仪
EPICS XL 流式细胞分析仪
BD FACSAria流式细胞分析仪
BD FACSAria流式细胞分析仪
基本概念 可流式细胞仪(Flow Cytometer) 是集激光技术，计算机技术，细胞荧光化学， 单抗技术等为一体的高科技细胞分析仪。 口流式细胞术(Flow Cytometry,FcM) 一种能快速、精确对单个细胞（生物颗粒）的 理化和生物学特性进行多参数定量分析和分选 的新技术
基本概念 p流式细胞仪(Flow Cytometer) 是集激光技术，计算机技术，细胞荧光化学， 单抗技术等为一体的高科技细胞分析仪。 p流式细胞术(Flow Cytometry，FCM) 一种能快速、精确对单个细胞（生物颗粒）的 理化和生物学特性进行多参数定量分析和分选 的新技术
第一节FCM的原理(Principle of FCM) ■工作原理 荧光2充电信增竹 束成形系 90射完完电信州 机数据处理系练 光光 充电环 负高压 正高压 废液收集器 图23-1FCM原理示意图
第一节 FCM的原理(Principle of FCM) n 工作原理
基本结构 流动室与液流驱动系统：单细胞流技术 流动室 鞘液SHEATH 样本流SAMPLE单细胞悬液5*105~1*106个/ml 激发光与光束成形系统：单细胞照明技术 光源：激光（氩离子气体激光器）488nm 与通过的细胞聚焦在同一点上 滤片 光电倍增管(PMT) 细胞信号检测与分析处理系统：单细胞检测技术 A/D转换 计算机 细胞分选
基本结构 流动室与液流驱动系统：单细胞流技术 流动室 鞘液SHEATH 样本流SAMPLE 单细胞悬液5*10 5~1*10 6个/ml 激发光与光束成形系统：单细胞照明技术 光源:激光(氩离子气体激光器 ) 488nm 与通过的细胞聚焦在同一点上 滤片 光电倍增管（PMT) 细胞信号检测与分析处理系统：单细胞检测技术 A/D转换 计算机 细胞分选
Injector Tip Sheath Fluorescence signals Focused laser beam
Injector Tip Fluorescence signals Focused laser beam Sheath fluid
散射光信号测定 前向散射光(S) FS----Forward Scatter FS的强度与细胞的大小有关 FS常被用于设阈以排除样品中各种碎片对被测细胞的干扰
散射光信号测定 FS----Forward Scatter FS的强度与细胞的大小有关 FS常被用于设阈以排除样品中各种碎片对被测细胞的干扰。 前向散射光(FS)
前向散射光 Laser Large p article beam Detector Laser Small particle beam
前向散射光