天然生物成分分离实验指导 实验须知 天然生物成分分离实验教学是天然生物成分分离技术课程的重要组成部分，是使学生 进一步理论联系实际，掌握天然产物有效成分提取、分离和检定的基本操作技能，提高学生 分析和解决问题能力。养成严密科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节。为此，提出 下列实验须知： 1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、 漏水等事故的发生。若发生事故应立即报告指导教师。 2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划， 争取准时结束。实验过程应养成及时记录的习惯。凡是观察到的现象和结果及有关的重量、 体积、温度或其他数据，应立即如实记录，实验完毕后，认真总结，写好报告，提取纯化所 得单体产物包好，贴上标签（日期、样品名称、纯度、mp、bp、TLC、重量）交给老师。 3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应 保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸 内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。 4．公用仪器及药品用完后立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。节 约用水、用电、药用试剂。严格药品用量。 5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实 验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。 实验一 薄层板的制备、活度测定及应用 一、目的要求 1．掌握薄层板的制备及薄层层析的操作方法 2．掌握吸附剂活度测定的原理及方法 3．应用薄层层析法检测识中草药化学成分 二、薄层板的制备 1．不加粘合剂的薄层涂布法 （1）氧化铝薄层 将吸附剂置于薄层涂布器中，调节涂布器的高度，向前推动，即得均匀薄层。本实验 主要用下述简易操作涂布薄层，取表面光滑，直径统一的玻璃一支，依据所制备薄层的宽度
厚度要求，在玻璃棒两端套上厚度为 0.3~1mm 的塑料圈或金属环，并在玻璃棒一端一定距 离处套上较厚的塑料圈或金属环，以使玻璃棒向前推动时能保持平行方向，操作时，将氧化 铝粉均均地铺在玻璃板上，匀速向前推动。 （2）纤维素薄层 一般取纤维素粉 1 份加水约 5 份，在烧杯中混合均匀后，倒在玻璃板上，轻轻振动， 使涂布均匀，水平放置，待水分蒸发至近干，于 100±2℃干燥 30~60 分钟即得。 （3）聚酰胺薄层 取锦纶丝（无色干净废丝即可）用乙醇加热浸泡 2~3 次，除去腊质等。称取洗净的锦 纶丝 1 克，加 85%甲酸 ml，在水浴上加热使溶，再加 70%乙醇 6ml。继续加热使完全溶解 成透明胶状溶液。将此溶液适量倒在水平放置的，用清洁液洗净的玻璃片上，并自然向周围 推匀，厚度约 0.3mm，薄层太厚时，干后会裂开。将铺好的薄层水平放在盛温水的盘上， 使盘中的水蒸汽能熏湿薄层，盘子加玻璃板盖严密，薄板放置约 1 小时完全固化变不透明白 色，再放数小时后，泡在流水中洗去甲酸，先在空气中晾干，后在烘箱中 0℃恒温加热活化 15 分钟，冷后置干燥器中贮存备用。 2．加粘合剂薄层的涂布法 （1）硅胶 G 薄层 取硅胶 G 或硅胶 GF 一份，置烧杯中加水约 5 份混合均匀，放置 片刻，随即用药匙取一定量，分别倒在一定大小的玻璃片上（或倒入涂布器中，推动涂布）， 均匀涂布成 0.25~0.5mm 厚度，轻轻振动玻璃板，使薄层面平整均匀，在水平位置放置，待 薄层发白近干，于烘箱中 100℃活化 0.5~1 小时，冷后贮于干燥器内备用。活化温度和时间 可依需要调整，一般检识水溶性成分或一些极性大的成分时，所用薄层板只在空气中自然干 燥，不经活化即可贮存备用。 （2）硅胶（H）羧甲基纤维钠（CMC-Na）薄层 取羧甲基纤维素 0.2g，溶于 25ml 水中，在水浴上加热搅拌使完全溶解，倒入烧杯中，加薄层层析用硅胶（颗粒度 10~40μm 的约 6~8g）。激光照排系统混成均匀的稀糊，按照硅胶 G 薄层涂布法制备薄层，或取 0.8% 羧甲基纤维纳 10ml，倒入广口瓶（高约 10~12cm）中，然后逐步加入薄层层析用硅胶 3.3 克，不断振摇成均匀的稀糊，把两块载玻片面对面结合在一起，这样每片只有一面与硅胶糊 接触，使薄片浸入硅胶稀糊中，然后慢慢取出，分开二块薄片，将未粘附硅胶糊的那一面水 平放在一张清洁的纸上，让其自然阴干，100℃下烘 30 分钟。冷后于干燥器内备用。未消耗 的硅胶稀糊可贮存在广口瓶内，以供再用。 氧化铝薄层，氧化铝羧甲基纤维钠薄层的制备方法同上，一般所需要氧化铝比硅胶稍 多。 目前国内外市场有预先制好的薄层板，底板用玻璃、塑料、铝片等。可按需要用玻璃 刀划割，也有用剪刀剪成所要的大小，使用方便，价格贵些。 3．特殊薄层的制备
根据分离工作的特殊需要，可制成以下几种特制薄层。 （1）酸、碱薄层和 pH 缓冲薄层 为了改变吸附剂的酸碱性，以改进分离效果，可在吸附剂中加入稀酸溶液（如 0.1~0.5N 草酸溶液）代替水制成酸性氧化铅薄层使用，硅胶微呈酸性，可在铺层时用稀碱溶液（如 0.1~0.5N 氢氧化钠溶液）代替水制成碱性的硅胶薄层。当用醋酸钠、磷酸盐等不同 pH 的缓 冲液代替水铺层，制成一定 pH 缓冲的薄层。 羧甲基纤维素钠的溶液一般用 0.5~1%浓度，宜预先配制后静置，取其上层澄清溶液应 用，则所制备的薄层表面较为细腻平滑。常用 0.8%浓度。CMC-Na 系中粘度。300~500 厘 泊（粘度单位）。CMC-Na 系碳水化合物，调制时应在水浴上进行。活化温度不应过高，防 止碳化。 （2）络合薄层 硝酸银薄层的制法，可在吸附剂中加入 5~25%硝酸银水溶液代替水制成均匀糊状，再 按常法铺成薄层，制成薄层避光阴干，于 105℃活化半小时后避光贮存，制成的薄层以不变 成灰色为好，在三天内应用。也可先把硝酸银用少量水溶解，再用甲醇稀释成 10%溶液， 把预先制好的硅胶 G 薄层浸入此溶液中约 1 分钟，取出避光阴干，按上法活化，贮存。 三、吸附剂的活度测定 1．氧化铝活度的测定 一般可用 4~5 种偶氮染料以薄层层析法进行测定。 染料试剂的配制：取偶氮苯（Azobenzene）50mg，对甲氧基偶氮苯（P-Methoxyuzobenzene）, 苏丹黄（Sudan I, Benzeneazo-β-naphthol），苏丹红（Sudan Ⅲ Tetrazobenzol-β-naphthol），对 氨基偶氮苯（P-Aminoazobenzene）各 20mg，分别溶于 50ml 重蒸馏的四氯化碳（经氢氧化 钠干燥）中。 常法制备不含粘合剂氧化铝薄层，以铅笔尖或毛细管尖在薄层板一端 2~3 cm 处间隔 1cm 左右轻轻点上 5 个可以看清的小点，各吸取约 0.02ml 染料试剂分别点滴于原点上，以 四氯化碳为展开剂，展开时薄层板与容器底部交角为 10~40°之间，展开后测出各斑点的 Rf 值，从表 1 确定氧化铝的活度（一般高活性氧化铝Ⅰ~Ⅲ级活度使用本法时，结果往往偏低）。 另取不含粘合剂氧化铝薄层板一块，置于水蒸汽饱和容器内，2~3 小时后取出，按上述 方法测定活度。观察有无变化。 表 1 氧化铝活度与偶氮染料外值关系 偶氮染料 氧化铝活度级 Rf 值 二级 三级 四级 五级 偶氮苯 0.59 0.72 0.85 0.95 对甲氧基偶氮 苯 0.16 0.45 0.69 0.89
苏丹黄 0.02 0.25 0.87 0.98 苏丹红 0.00 0.10 0.35 0.50 对氨基偶氮苯 0.00 0.05 0.08 0.19 2．硅胶活度的测定 一般选用三种染料的薄层层析法进行测定。 欧洲药典 1969 年记载用 0.01%二甲基黄（Dimethy-yellow. P-Dimethylaminoazobenzene）。 苏丹红（Sudan Ⅲ），靛酚蓝（Indophenol blue 4-Tapnthoquinone-4-dimethyl aminoaniline）的 苯溶液各 10μl 点滴于硅胶 G 或硅胶 H 薄层上，以苯为展开剂，展开 10cm（约 20 分钟）， 三种染料应明显分离，靛酚蓝斑点接近于起始线。二甲基黄斑点在薄层的当中。苏丹红斑点 与二甲基黄斑点之间，则认为薄层板活性符合要求。 国内青岛海洋化工厂出售薄层层析用的硅胶在吸附剂名称之后加几个字标明的意思是： 硅胶 G（G 是 Gypsum 石膏的缩写。表示加了石膏），硅胶 H（H 表示不加石膏），硅胶 GF254 （F254 表示加石膏和波长 254 显绿色荧光的硅酸锌锰）。硅胶 GF365（表示加石膏和波长 365nm 显黄色荧光的硫化锌镉）。氧化铝则类推。 四、薄层层析的应用 薄层层析法在天然产物化学成分的研究中，主要应用于化学成分的预试、化学成分的鉴 定及探索柱层分离的条件。用薄层层析进行中草药化学成分检识，可依据各类成分性质及熟 知的条件有针对性地进行。由于在薄层上展开后，可将一些杂质分离，选择性高，可使预试 结果更为可靠，不仅可通过显色获知成分类型，而且可初步了解主要成分的数目及其极性大 小。 例一：湖北贝母生物碱成分的 TLC 检识 吸附剂：硅胶 CMC- Na 薄层 样品：湖北贝母总生物碱氯仿溶液 展开剂：C6H5-EtoAc-NHEt2（6：4：1） 显色剂：改良碘化铋钾喷雾 例二：丹参色素的 TLC 检识 吸附剂：硅胶 G-CMc-Na 板 样品：丹参乙醚提取液 展开剂：石油醚-醋酸乙酯（9：1） 记录 TLC 结果
实验二 粉防己生物碱的提取分离与鉴定 汉防己为防己科千金藤属物 Stephania tetrandra S. Mcore 的根，是祛风解热镇痛药物， 其有效成分为生物碱。主要是汉防己甲素和汉防已乙素。临床上除用作治疗高血压、神经性 疼痛、抗阿米巴原虫外，还将粉防已生物碱的碘甲基、或溴甲基化合物作为肌肉松弛剂应用， 此外汉防已甲素在动物实验中有抗癌和扩张血管的作用。 一、目的要求 通过汉防己中几种生物碱的提取分离和鉴定，要求掌握下列知识和技能。 1． 生物碱的一般提取方法。 2． 用低压柱层析分离，纯化单体的方法及薄层层析鉴定 二、已知生物碱的结构和性质 汉防已根中总生物碱含量为 1.5~2.3%，主要为汉防已甲素，含 量约 1%，汉防已乙素，含量约 0.5%；轮环藤酚碱，含量为 0.2%； 以及其它数种微量生物碱。 1．汉防已甲素（Tetrandrine， 汉防已碱，粉防已碱） 无色针晶，不溶于水和石油 醚，易溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、 乙醚和氯仿等有机溶剂及稀酸水中，可溶于苯，mp 216℃，有双熔点现象，自丙酮中结晶者， 150℃左右熔后加热又固化，至 213℃复熔。 2．汉防已乙素（Fangchinoline, 又称防已诺林碱，去甲粉防已碱） 溶解行为与汉防已甲素相似，因有一个酚羟基，故极性较汉防已甲素稍高，在苯中的 溶解度小于汉防已甲素而在乙醇中又大于汉防已甲素。籍此可以相互分离，用不同溶剂重结 昌时，其晶形和溶点不同： 乙醇 细棒状结晶 mp 245~40℃ 甲醇 细棒状结晶 mp177~9℃ 丙酮 六面粒状晶 mp134℃ 吡啶-甲醇 mp 121~2℃ 环已烷-EtocAc mp 156℃ 3．轮环藤酚碱（Cylanoline） 为水溶性季铵生物碱，不溶于极性溶剂，氯化物为无 色，八面体状结昌，mp 214~6℃，碘化物为无色绢丝状结 N OH OCH3 CH3O HO OH CH3 N OCH3 OR OCH3 O CH3O N CH3 CH3 H H R=CH3 R=H 汉防己甲素 汉防己乙素 O
晶，mp185℃；苦味酸盐为黄色结晶，mp154~6℃。 三、生物碱的提取分离 1．总生物碱的提取和亲脂性与亲水性生物碱的分离 注一：将汉防已粗粉加适 量酸水液，以能将生药粉末润 湿为度（约 150ml），充分拌 匀，放置半小时，均匀而致密 地装入渗筒内，用锥形瓶底部 或其它平底工具压紧，供渗漉 用，流速约 1.5ml/分。 注二：净砂必须事前洗净 烘干，拌和量最好不要超过 120g，以免索氏提取器一次装 不下或装得过多。提不尽生物 碱。 注三：检查生物碱是否提 尽的方法，是取最后一次乙醚提取液约数滴，挥去乙醚，残渣加 5%HCl 0.5ml 溶解后，加 改良碘化铋钾试剂一滴，无沉淀折出或明显浑浊时，表明生物碱已提尽，或基本提尽。反之， 应继续提取。 注四：先将提取器内滤纸筒取出。然后将提取玻筒内最后一次乙醚提取液倾出（另器贮 存），再将提取玻筒安装好，继续加热，回收烧瓶中乙醚于玻筒中，至烧瓶内的乙醚提取液 体积较小时，停止回收，将烧瓶中乙醚提取液倾出。 2．低压柱层析分离汉防已甲素和乙素 低压柱层析在低压下（0.5~3kg/cm2，一般 0.3~1.2 kg/cm2）采用颗粒直径介于经典柱层 析（100~200μm）和 HPLC（~37μm）之间的薄层层析用硅胶（或氧化铝）H 或 G（50~75μm） 作为填充剂的一种柱层析柱，其基本原理与 HPLC 相同，分离效果也介于经典柱与 HPLC 之间，用减压干法装柱，铺层紧密均匀，层析带分布集中整齐，同时薄层层析的最佳分离溶 剂系统可以直接用于低压柱层析，它是一种分离效果较好，设备简单，操作方便，快速的方 法。适宜和于天然产物的常量制备性分离。 （1）装柱 减压干法装法，层析柱规格：柱长 30cm，内径 2cm，共装硅胶约 30g（高 约 22cm）。 （2）拌样加样 取汉防已碱约 150mg，加少量丙酮热溶（刚溶为度）用滴管加到 1.5g 汉防己药材粗粉100g 0.5%H2SO4液渗漉（注一） 酸水渗漉液（为原料的3~10倍量V/V） 加新鲜石灰乳调pH9~10，静置，抽滤 泥黄色沉淀 碱水液 （水溶性季铵碱及水溶性杂质） 将沉淀与静砂拌匀（注二） 80℃烘干，置索氏提取器中用乙醚（约180ml）提取至 提尽生物碱（注三） 回收乙醚（注四） 乙醚提取物 用95%乙醇40~60ml回流热溶后 倾入500ml水中，加30gNaCl盐析 水溶上加热至凝结，静置 抽滤 白色沉淀（亲脂性叔铵总碱，以汉防己甲素、乙素为主）
硅胶上，仔细拌匀，水浴上蒸干，碾细，通过一个长颈漏斗小心加在柱顶，轻轻垂直顿击， 待样品表面平整不拌动时，上面再盖约 1~2cm 高的空白硅胶，再加盖一园形滤纸片，压紧。 （3）洗脱 先检查从空压机至层析柱各阀门管道是否正常，关紧各个阀门，开动空压 机至额定压力（5.8kg/cm2）待用。用滴管顺层析柱柱壁仔细加入少量洗脱剂（环已烷-惭酸 乙酯-二乙胺/6：2：0.8），当液面达到一定高度时，再一次加入其余洗脱剂（共约 250ml）， 迅速在柱顶上装上玻璃标口塞接头，用铁夹压紧（防加压时接头冲开），小心开启空压机阀 门，再开针形阀和空气过滤减压器，（注意：压力过大。玻璃柱会炸，一般 2kg 是安全的， 必要时可戴防护面罩）调动所需压力，0.6~1.2kg/cm2，约 40 分钟后流出，控制流速 1ml/分， 每 10 分钟左右一管，收 12~15 份，洗脱全过程约 3 小时。 （4）检查 各流份分别移入小玻璃蒸发器中，于水浴上浓缩，分别通过 TLC 检查，吸 附剂：硅胶 G，展开剂：环已烷-乙酸乙酯-二乙胺/6：3：1，改良碘化铋钾试剂喷雾显色， 以汉防已甲素、乙素为标准品对照，合并相同组分，分别获得甲、乙素粗品，用丙酮重结晶， 测定 mp。 四、鉴定方法 1．衍生物制备 取汉防已甲素 0.2g，溶于 2ml（丙酮中，滴加苦味酸饱和水溶液至不再折出黄色沉淀为 止，抽滤收集沉淀，顺次以少量水乙醚洗涤，乙醇重结晶，得汉防已甲素苦味酸盐，mp 235~242℃（dc）。 2．有机胺碱的 TLC 吸附剂：青岛海洋化工厂薄层层析硅胶 G，用 0.3%CMC-Na 水液制板，110℃活化 1 小 时。 样品：分出的汉防已甲素①、乙素②、总碱③ 展开剂：环己烷- EtoAc-NHEt2（6：2：1） 显色剂：改良碘化铋钾试剂（展开后用电吹风吹干再喷显色剂，以免二乙胺干扰） 现象：甲素显色后呈淡棕色，2 小时左右就褪色，而乙素呈棕色，久置不褪色，可帮助 其辨认
实验三 掌叶防己碱的提取与分离及延胡索乙素制备 掌叶防已碱又称巴马汀（palmatine），硫酸延胡索乙素又称消旋四氢巴马汀硫酸盐 （dltetrahydro palmatine sulphate）。 延胡索乙素（Corydalis B）为镇静安定药，用于缓解胃系统的疾病所引起的疼痛，临产 阵痛、头痛、失眠等。 中药延胡索（元胡，Corydalis yanhusuo W.T. Wang 的块根）中含延胡索乙素的量很少， 而其脱氢化合物巴马汀在某些植物中含量却很高。在中国华南一带的防已科植物黄藤 （Fibreursa recisa paerre）的根茎中含巴马汀，再经氢化反应，制备延胡索乙素。 黄藤曾列入《本草纲目》，李时珍谓“藤生生岭南，状若防已，但人常服此藤，纵饮食有 毒，亦自然不发”。现代民间作为清热消炎药。常用于外伤感染、扁桃体炎、咽喉炎、结膜 炎、热痢及黄疸等。 一、实验的目的要求： 1．掌握季铵生物碱的一种提取方法。 2．掌握生物碱的一般理化性质及其结构与性质的关系。 3．了解黄藤生物碱的结构与性质的关系。 4．熟悉生物碱沉淀反应的条件和方法。 5．掌握制备生物碱结晶性盐的方法和精制。 6．掌握四氢巴马汀的制备方法。 二、黄藤中已知成分的理化性质： 黄藤根茎及根中所含成分主为巴马汀。尚含少量药根碱、黄藤素甲、黄藤素乙、内脂 及甾醇。又谓在根茎、根及树皮中含小檗碱。 1． 掌叶防已碱（巴马汀，Palmatine） 本品系季铵生物碱，溶于水、乙醇，几乎不溶于氯 仿、乙醚、苯等溶剂，掌叶防已碱盐酸盐即氯化巴马汀 （palmation Chloride）C21H22O4N ·Cl·3H2O 为黄色针状 结晶，熔点 205℃（分解）。其理化性质与盐酸小檗碱类 似。巴马汀氢碘酸盐（palmatine icdide）C21H22O4N·I·2H2O 为橙黄色针状结晶，熔点 241℃ （分解）。 2．药根碱（雅托碱·Jatrorrhizine） 本品系具酚羟基季铵盐，其理化性质与巴马汀类似，但较 易溶于苛性碱液中，其盐酸在水中的溶解度亦比盐酸巴马汀为 大，可籍此性质予以分离。药根碱盐酸盐（Jatrorrhizine Chloride ） C20H20O4N·Cl·H2O 为 铜 色 针 状 结 晶 ， 溶 点 3 OH OCH3 OCH N CH3O CH3O 2 1 N HO CH3O OCH OCH3 3 OH 1
204~206℃，其苦味酸盐（Jatrorrizine picrate）C20H20O4N·C6H2O7N2 为橙黄色柱状结晶，溶 点 217~220℃（分解）。 3．小檗碱（黄连素 Berberine） 本品系季铵生物碱，其游离碱为黄色长针状结晶，C20H18O4N·OH·5 2 1 H2O，溶点 145℃， 在 100℃干燥，失去结晶水转为棕黄色。小檗碱能缓缓溶于水（1：20），乙醇（1：100）， 较易溶于热水、热乙醇、微溶于丙酮、氯仿、苯、几乎不溶于石油醚中，小檗碱与氯仿、丙 酮、苯均能形成加成物。小檗碱盐酸盐（Berberine Chloride） C20H16O4N·Cl2H2O，熔点 205℃（分解），微溶于冷水，较 易溶于沸水，其硝酸盐及氢碘酸盐，极难溶于水（冷水约 1：2000）。小檗碱的中性硫酸盐、磷酸盐、醋酸盐在水中 溶解度较大，小檗碱的盐类在水中的溶解度： 盐酸小檗碱 1：500 硫酸小檗碱 1：30（酸性盐 1：100） 枸橼酸小檗碱 1：125 磷酸小檗碱 1：15 4．四氢巴马汀（Tetrahydropalmatine）: 延胡索乙素为消旋四氢巴马汀，系叔胺碱，其游离碱 C21H25O4N 溶点 146~148℃，不溶 于水，能溶于热乙醇（在冷乙醇中溶解度较小），易溶于氯仿、 苯、乙醚中，延胡索乙素的酸性硫酸盐为无色针状结晶，溶点 245~246℃，在冷水中溶解度较小，在热水中较大，其中性硫酸 盐为长柱状结晶，熔点 220℃，在水中溶解度较酸性硫酸盐为大， 其盐酸盐难溶于水。 左旋四氢巴马汀即颅痛定（Rotundine）熔点 141~142℃[α]D16 -257.5℃（C=1.1 氯仿）。 本品在华千金藤（Stephania sinica Diels）及圆叶千金藤（S. rotundalour）的块根（山乌龟） 中含量较多。 5．黄藤素甲 本品为制备氯化巴马汀的乙醇母液中的少量成分，为季铵碱盐的盐酸盐 C26H29O7N·HCl·H2O 熔点 196~198℃。[α] 15 D +273.3°（C=1，乙醇），其还原物为白色针状结 晶，熔点 134~186℃[α] 15 D +146.6℃（C=1，酸）。 6．黄藤素乙 本品系粗制巴马汀氢化、碱化分去四氯巴马汀后；母液中的微量物质，溶于氯仿。以 氯仿一乙醇重结晶得黄色结晶，熔点 192~193℃，[α] 15 D +233.3℃（C=1，氯仿）。 N o o OCH OCH3 OH 3 3 OCH3 OCH N CH3O CH3O
7．黄藤内酯 本品得自粗氯化巴马汀重结晶进的不溶于水物质中，反复以酒精、丙酮重结晶，得光 亮棱状结晶，C27H23O9，熔点 273℃，[α] 15 D +36.60 ℃(C=1，乙醇)。 8．黄藤甾醇 本品得制备氯化巴马汀的乙醇母液中，分出的少量油层经 10%KOH 皂化得到的白色针 晶，熔点 136~137℃，[α] 15 D +24.51 ℃(C=1，氯仿)。 三、巴马汀提取及延胡索素制备的方法 巴马汀为季铵生物碱，溶于水和极性大的有机溶剂（如甲醇、乙醇等）所以可用甲醇、 乙醇或水进行提取。然后通过盐析，降低其在水中的溶解度而沉淀，与其它杂质分离。巴马 汀是有机碱，尽管它带正电荷，但和水的亲和力仍小于 NaCl，NaCl 和水的强亲和力，降低 了巴马汀在水中的溶解度，使它被“挤”出。 巴马汀盐酸在冷水中溶解度小（比盐酸小檗碱略大）可以利用此性质进行分离。 方法：（一） 1.流程 2 . 2．工艺 （1）浸出：取黄藤粗粉 100g，用 1%醋酸冷浸（以浸没原料为度，约 500ml）1~2 天， 尼龙布过滤，药渣再加 15 醋酸冷浸一天，合并滤液（留取 1ml 作生物碱定性反应）。 黄藤粗粉 （浸出） 1%HAc 浸出液 NaOH NaCl 巴马汀 （精制） 80%乙醇热溶后加盐酸 （中和，盐析） 3 OCH3 氢化 Zn.H2SO4 .100 N CH3O OCH OCH OCH3 3 3 H HSO4 OCH N CH3O OCH3 HCL 氯化巴马汀 四氢巴马汀酸性硫酸盐 游离 NH4OH N CH3O OCH OCH OCH3 3 3 成盐 H2SO4 N CH3O OCH OCH OCH 3 3 3 1/2 H2SO4 四氢巴马汀 延胡索乙素中性硫酸盐