第十二章固相膜免疫测定
第十二章 固相膜免疫测定
第一节概述
第一节 概述
标记免疫测定 放射免疫测定1960 酶免疫测定 1970 荧光免疫测定1980′-1990′ 化学发光免疫测定1990 膜固相免疫测定1990′
放射免疫测定 1960’ 酶免疫测定 1970’ 荧光免疫测定 1980’－1990’ 化学发光免疫测定 1990’－ 膜固相免疫测定 1990’－ 标记免疫测定
免疫测定分类 免疫浊度测定 Aa + Ab Agab Ab 标记免疫测定 Ag Ab*Ag Ab*+ Ab* (B)(F)
免疫浊度测定 Ag + Ab AgAb + Ab 标记免疫测定 Ag + Ab* Ag Ab* + Ab* （B） （F） 免疫测定分类
免疫测定原理 利用抗原抗体反应检测标本中微量物质 抗原+抗体—抗原抗体复合物 Aa +Ab Ag* Ab
利用抗原抗体反应检测标本中微量物质 抗原+抗体 抗原抗体复合物 Ag +Ab Ag * Ab 免疫测定原理
固相免疫测定 B与F分离 Ab* Ab* g t Ag Ab
Ab* Ab* Ag + Ag + Ab* Ab Ab 固相免疫测定 B与F分离
固相膜的特点 >多孔性 毛细管作用 >非共价键高度吸附抗体或抗原高度敏感性 >易于漂洗 操作简便
➢多孔性 毛细管作用 ➢非共价键高度吸附抗体或抗原 高度敏感性 ➢易于漂洗 操作简便 固相膜的特点
常用的固相膜 玻璃纤维素 fiberglass膜 尼龙(nyon)膜 聚偏氟乙稀( polyvinylidene fluoride,PVDF膜 硝酸纤维素( nitrocellulose,NC)膜
玻璃纤维素(fiberglass)膜 尼龙(nylon)膜 聚偏氟乙稀( polyvinylidene fluoride ，PVDF)膜 硝酸纤维素（nitrocellulose，NC）膜 常用的固相膜
固相膜的技术要求 孔径:02-0.6m 流速:以m/cm2/min表示 蛋白质结合力:吸附力很强,以g/cm2表示 均一性
固相膜的技术要求 孔径：0.2~0.6 μm 流速：以ml/cm2/min表示 蛋白质结合力：吸附力很强，以μg/cm2表示 均一性
固相NC膜 SCANNING ELECTRON MICROGRAPH。F NITROCELLULOSE MEMBRANE Belt side view (SNHF, 990X)
固相NC膜