模块七 检测新技术简介
检测新技术简介 模块七
毛细管电泳法 一、概述 (一)原理 毛细管电泳（CE)亦称为高效毛细管电泳法(HPCE),是一类高效 快速的分离分析方法。该法系以弹性毛细管为分离通道，以高压直流 电场为驱动力，依据样品中各组分的淌度（单位电场强度下的迁移速 度)和分配行为的差异而实现分离
一、毛细管电泳法 一、概述 （一）原理 毛细管电泳（CE）亦称为高效毛细管电泳法（HPCE），是一类高效 快速的分离分析方法。该法系以弹性 毛细管为分离通道，以高压直流 电场为驱动力，依据样品中各组分的 淌度（单位电场强度下的迁移速 度）和分配行为的差异而实现分离
毛细管电泳法 (二)特点 高效、低耗、快速、广谱。与HPLC比较有如下特点： 1.柱效更高，理论板数可达10510m-1,这主要是由于该法无固定 相，不存在传质差异，整个流体就像塞子似以的以均速向前流动。 2.分析速度更快，几十秒至十几分钟内即可完成一个试样的分析。 3溶剂和样品消耗极少，样品用量仅为 纳升()级。不需高压泵输液，毛细管价 98E * 格低廉， 因此工作成本更低。 4通过改变操作模式和缓冲溶液的成分， 该法有很大的选择性，可对各种成分进行有 高压 低压 效的分离
（二）特点 高效、低耗、快速、广谱。与HPLC比较有如下特点： 1.柱效更高，理论板数可达105-106m-1，这主要是由于该法无固定 相，不存在传质差异，整个流体就像塞子似的以均速向前流动。 2.分析速度更快，几十秒至十几分钟内即可完成一个试样的分析。 3.溶剂和样品消耗极少，样品用量仅为 纳升（nl）级。不需高压泵输液，毛细管价 格低廉，因此工作成本更低。 4.通过改变操作模式和缓冲溶液的成分， 该法有很大的选择性，可对各种成分进行有 效的分离。 一、毛细管电泳法
毛细管电泳法 (三)分离模式（共6种） 毛细管区带电泳(CZE) 胶束电动毛细管色谱(MEKC 或MECC) 毛细管凝胶电泳(CGE) 毛细管等速电泳(CITP) 毛细管等电聚焦电泳(CIEF) 毛细管电色谱(CEC)
（三）分离模式（共6种） 毛细管区带电泳（CZE） 胶束电动毛细管色谱（MEKC 或MECC） 毛细管凝胶电泳（CGE） 毛细管等速电泳（CITP） 毛细管等电聚焦电泳（CIEF） 毛细管电色谱（CEC） 一、毛细管电泳法
毛细管电泳法 二、山茱萸及六味地黄丸中没食子酸的含量测定 没食子酸为中药山茱萸的有效成分，山茱萸为六味地黄丸药味之 一。没食子酸在碱水中可电离成阴离子，故本法采用毛细管区带电泳 法（CZE),肉桂酸为内标物，测定二者中没食子酸的含量，以控制 其 HO 质量。 OH COOH 没食子酸 OH CH-CHCOOH ]肉桂酸
一、毛细管电泳法 二、山茱萸及六味地黄丸中没食子酸的含量测定 没食子酸为中药山茱萸的有效成分，山茱萸为六味地黄丸药味之 一。没食子酸在碱水中可电离成阴离子，故本法采用毛细管区带电泳 法（CZE），肉桂酸为内标物，测定二者中没食子酸的含量，以控制 其 质量。 HO OH OH COOH CH CH COOH 没食子酸 肉桂酸
毛细管电泳法 山茱萸(A)、六味地黄丸(B)和对照品(C)的电泳图谱 B 0 t/min C 2 t/min 1.肉桂酸，2没食子酸 6 (/min
一、毛细管电泳法 山茱萸（A）、六味地黄丸（B）和对照品（C）的电泳图谱 1.肉桂酸；2.没食子酸
二、中药指纹图谱 一、概述 (一)定义中药指纹图谱是指某些中药材或冲药制剂经适当处理 后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光 谱图。 (二)特点 ①一种综合的，可量化的鉴定手段。 ②适合评价中药及其制剂质量的真实性、优良性和稳定性。 ③基本属性为“整体性”和模糊性
二、中药指纹图谱 一、概述 （一）定义 中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理 后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光 谱图。 （二）特点 ①一种综合的，可量化的鉴定手段。 ②适合评价中药及其制剂质量的真实性、优良性和稳定性。 ③基本属性为“整体性”和“模糊性”
二、中药指纹图谱 (三)意义中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质 量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药 指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与 数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。这也正好符合中医药整 体学说。 (四)现状中药指纹图谱技术已涉及众多方法，包括TLCS、HPLC GC和HPCE等色谱法以及UV、IR、MS、NMR和X射线衍射法等光 谱法。 其中色谱方法为主流方法
（三）意义 中药及其制剂均为多组分复杂体系，因此评价其质 量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，建立中药 指纹图谱将能较为全面地反映中药及其制剂中所含化学成分的种类与 数量，进而对药品质量进行整体描述和评价。这也正好符合中医药整 体学说。 （四）现状 中药指纹图谱技术已涉及众多方法，包括TLCS、HPLC、 GC和HPCE等色谱法以及UV、IR、MS、NMR和X—射线衍射法等光 谱法。 其中色谱方法为主流方法。 二、中药指纹图谱
二、中药指纹图谱 二、中药指纹图谱建立的原则和步骤 (一)原则 ①系统性指纹图谱中反映的化学成分应包括该中药有效部所含大 部分成分，或指标性成分的全部 ②特征性指纹图谱中反映的化学信息（如保留时间）应具有较 强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征性地区分中药的真伪与 优劣，成为中药自身的"化学条码”。 ③稳定性是指所建立的指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用 程度，以体现其通用性和实用性
二、中药指纹图谱建立的原则和步骤 （一）原则 ①系统性 指纹图谱中反映的化学成分应包括该中药有效部所含大 部分成分，或指标性成分的全部 ②特征性 指纹图谱中反映的化学信息（如保留时间）应具有较 强的选择性，这些信息的综合结果，将能特征性地区分中药的真伪与 优劣，成为中药自身的“化学条码” 。 ③稳定性 是指所建立的指纹图谱在规定的方法、条件下的耐用 程度，以体现其通用性和实用性 二、中药指纹图谱
二、中药指纹图谱 (二)步骤 1.样品的收集具有代表性不少于10个批次样品。 2.样品溶液的制备选用适宜的溶剂和提取方法，尽量使其成分较 多地在指纹图谱中反映出来，并达到较好的分离效果。 3.实验方法和条件的选择根据分析试样中所含化学成分的理化 性质，选择适宜的测定方法。实验条件应能满足指纹图谱的需要 4.指纹图谱的建立 ①测得的大量色谱数据需经分析和数据处理，才能获得标准指纹 图谱（拟合指纹图谱）及其技术参数。 ②技术参数主要包括总峰面积、共有峰序号、参照峰(S)、共有峰 相对保留时间(RRT、共有峰峰面积比值(RA)和非共峰面积等
（二）步骤 1.样品的收集 具有代表性不少于10个批次样品。 2.样品溶液的制备 选用适宜的溶剂和提取方法，尽量使其成分较 多地在指纹图谱中反映出来，并达到较好的分离效果。 3.实验方法和条件的选择 根据分析试样中所含化学成分的理化 性质，选择适宜的测定方法。实验条件应能满足指纹图谱的需要 4.指纹图谱的建立 ①测得的大量色谱数据需经分析和数据处理，才能获得标准指纹 图谱(拟合指纹图谱)及其技术参数。 ②技术参数主要包括总峰面积、共有峰序号、参照峰(S)、共有峰 相对保留时间(RRT)、共有峰峰面积比值(RA)和非共峰面积等。 二、中药指纹图谱