陕西医学高等专科学校教案(基础课程) 病原生物学 课程名标|和免疫学 班级 专业,层次|临床、全科医学(大专) 授课方式 专业技 教师 (大,小班,大班/学 术职务 实习) 时/2学时 授课题目第二十六章病毒的感染与免疫 (章,节)第二十七章病毒感染的检查方法及防治原则 l《病原生物学和免疫学》(第五版),陈兴保主编人民卫生出版社北京20047 基本教棫或主要参 2《医学微生物学》本科教材(第六版),周正任主编人民卫生出版社北京2003.12 考书 3《医学免疫学》本科教材(第三版),陈慰峰主编.人民卫生出版社北京、20008 教学目的 掌握干扰素的概念、种类及其生物学活性。 2.熟悉病毒的感染方式与途径:病毒的感染类型:病毒的致病机制:抗病毒免疫 病毒标本的采集与送检原则:双份血清测定特异性抗体的临床意义:病毒感染的 特异性预防。 3.了解病毒感染的快速诊断:病毒的分离培养与鉴定 教学内容 1.病毒的致病机制 (30分钟) 2.病毒的感染方式和类型 (25分钟) 3.抗病毒免疫 (15分钟) 4.病毒感染的检查方法、免疫学防治 (25分钟) 教学方法:启发式教学 教具:多媒体、胶片 教学重点,难点: 重点:1病毒的致病机制 2.干扰素的概念、种类及其生物学活性。 难点:病毒的致病机制 教研室审阅意见 安排合理,同意实施。 姜凤良(教研室主任签名)
陕西医学高等专科学校教案（基础课程） 课程名称 病原生物学 和免疫学 班级 专业，层次 临床、全科医学（大专） 教 师 专业技 术职务 授课方式 （大，小班， 实习） 大班 学 时 2 学时 授课题目 （章，节） 第二十六章 病毒的感染与免疫 第二十七章 病毒感染的检查方法及防治原则 基本教材或主要参 考书 1.«病原生物学和免疫学»（第五版），陈兴保主编.人民卫生出版社.北京.2004.7 2.«医学微生物学»本科教材（第六版），周正任主编.人民卫生出版社.北京.2003.12 3.«医学免疫学»本科教材（第三版），陈慰峰主编.人民卫生出版社.北京.2000.8 教学目的： 1．掌握干扰素的概念、种类及其生物学活性。 2．熟悉病毒的感染方式与途径；病毒的感染类型；病毒的致病机制；抗病毒免疫； 病毒标本的采集与送检原则；双份血清测定特异性抗体的临床意义；病毒感染的 特异性预防。 3．了解病毒感染的快速诊断；病毒的分离培养与鉴定。 教学内容： 1．病毒的致病机制 （30 分钟） 2．病毒的感染方式和类型 （25 分钟） 3．抗病毒免疫 （15 分钟） 4．病毒感染的检查方法、免疫学防治 （25 分钟） 教学方法：启发式教学 教具：多媒体、胶片 教学重点，难点： 重点：1.病毒的致病机制； 2.干扰素的概念、种类及其生物学活性。 难点：病毒的致病机制。 教研室审阅意见 安排合理，同意实施。 姜凤良 （教研室主任签名） 年 月 日
1.病毒的致病机制。 小结 2.病毒的感染方式和类型。 (5分钟) 3.干扰素的概念、种类及其生物学活性。 4.病毒标本采集原则及检查方法 5.病毒感染特异性防治原则 1.试述病毒的致病机制。 复习思考题2.何谓干扰素,简述其生物学活性? 作业题 3.试述病毒标本采集原则。 教学后记 第二十九章病毒的感染与免疫 第一节感染的方式 水平传播:不同个体之间的传播 1.通过皮肤传播:创伤、叮咬 2.通过粘膜表面:呼吸道、肠道、接触
小 结 （5 分钟） 1．病毒的致病机制。 2．病毒的感染方式和类型。 3．干扰素的概念、种类及其生物学活性。 4．病毒标本采集原则及检查方法。 5．病毒感染特异性防治原则。 复习思考题 作业题 1． 试述病毒的致病机制。 2． 何谓干扰素，简述其生物学活性？ 3． 试述病毒标本采集原则。 教学后记 第二十九章 病毒的感染与免疫 第一节 感染的方式 一．水平传播：不同个体之间的传播 １．通过皮肤传播：创伤﹑叮咬. ２．通过粘膜表面：呼吸道﹑肠道﹑接触
3.医源性传播:经注射、输血、拔牙等传播 二.垂直传播:亲代直接传给子代 1.胎盘 2.产道传播 第二节病毒致病机制 病毒对宿主细胞的直接作用 1.影响细胞的生命活力 杀细胞感染机制: 阻断细胞大分子合成 病毒蛋白的毒性作用 使溶酶体酶释放,细胞自溶 ●对细胞的直接损伤 非杀细胞感染:细胞可多次出芽释放病毒,但最终仍不免死亡. 绕 细胞融合:形成多核巨细胞,寿命缩短 胞融合 2.包涵体形成:有些病毒感染细胞,在光镜下可见胞浆或胞核内有嗜酸性、嗜碱性的圆 形或不规则团块结构,称为包涵体 3.细胞转化:病毒核酸整合到细胞核酸中,使细胞遗传特性改变而导致肿瘤发生 4.细胞凋亡 病毒引起的免疫病理损伤 1.体液免疫病理作用:通过I、Ⅲ型超敏反应引起组织损伤,如登革热病毒、乙肝病 毒等 2.细胞免疫病理作用:通过ⅣⅤ型超敏反应引起组织损伤,如乙型肝炎病毒等。 3.病毒直接损伤淋巴细胞或淋巴器官,如HV。 第三节感染类型 隐性感染: 病毒在宿主细胞内增殖但不引起临床症状者,称为隐性感染或亚临床感染. 显性感染(急性感染与持续性感染): 病毒在宿主细胞内增殖,引起明显临床症状者,称为显性感染. (一)急性感染 感染时间短,宿主一般能将病毒彻底消灭而恢复 (二)持续感染: 病毒在宿主体内持续存在较长时间,甚至终生者,称为持续感染 1.慢性感染: 病毒间歇性增殖并排出体外,病程长,如乙肝 潜伏感染: 原发感染后长时间潜伏,若干年后开始增殖,出现临床症状.如单纯疱疹 3.迟发性感染:慢发病毒感染 潜伏期长,亚急性进行性经过,预后不良.如麻疹病毒急性感染后,经若干年后慢慢 出现的亚急性硬化性全脑炎 第四节抗病毒免疫
３．医源性传播：经注射﹑输血﹑拔牙等传播． 二．垂直传播：亲代直接传给子代 １．胎盘． ２．产道传播． 第二节 病毒致病机制 一．病毒对宿主细胞的直接作用 1．影响细胞的生命活力 杀细胞感染机制： ⚫ 阻断细胞大分子合成 ⚫ 病毒蛋白的毒性作用 ⚫ 使溶酶体酶释放，细胞自溶． ⚫ 对细胞的直接损伤． 非杀细胞感染：细胞可多次出芽释放病毒，但最终仍不免死亡． 细胞融合：形成多核巨细胞，寿命缩短． 细 胞融合 2．包涵体形成：有些病毒感染细胞，在光镜下可见胞浆或胞核内有嗜酸性、嗜碱性的圆 形或不规则团块结构，称为包涵体． 3．细胞转化：病毒核酸整合到细胞核酸中，使细胞遗传特性改变而导致肿瘤发生． 4．细胞凋亡． 二．病毒引起的免疫病理损伤 １．体液免疫病理作用：通过 II、III 型超敏反应引起组织损伤，如登革热病毒、乙肝病 毒等。 ２．细胞免疫病理作用：通过 IV 型超敏反应引起组织损伤，如乙型肝炎病毒等。 ３．病毒直接损伤淋巴细胞或淋巴器官，如 HIV。 第三节 感染类型 一．隐性感染： 病毒在宿主细胞内增殖但不引起临床症状者，称为隐性感染或亚临床感染． 二．显性感染（急性感染与持续性感染）： 病毒在宿主细胞内增殖，引起明显临床症状者，称为显性感染． （一）急性感染： 感染时间短，宿主一般能将病毒彻底消灭而恢复． （二）持续感染： 病毒在宿主体内持续存在较长时间，甚至终生者，称为持续感染． 1. 慢性感染： 病毒间歇性增殖并排出体外，病程长，如乙肝． 2. 潜伏感染： 原发感染后长时间潜伏，若干年后开始增殖，出现临床症状．如单纯疱疹。 3. 迟发性感染：慢发病毒感染 潜伏期长，亚急性进行性经过，预后不良．如麻疹病毒急性感染后，经若干年后慢慢 出现的亚急性硬化性全脑炎． 第四节 抗病毒免疫
体液免疫的保护作用 (一)中和抗体:由病毒的表面抗原刺激机体产生,可与表面抗原结合,阻止病毒吸附和穿 入易感细胞,保护细胞免受病毒感染 1.IgM:出现早 2.lgG:主要抗体。 3.IgA:SlgA局部抗病毒. 二)补体结合抗体:抗体结合病毒抗原或细胞膜表面病毒抗原后,通过活化补体,类似溶 细胞作用破坏有胞膜病毒或溶解病毒寄生的宿主细胞 二.细胞免疫 由Tc和Tm细胞发挥作用。 三.干扰素的抗病毒作用 (一)干扰素(FN) 是由病毒或其它干扰素诱生剂刺激单核吞噬细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等产生的糖蛋白, 具有高度活性及多种功能 (二)种类 1.白细胞——a-FN 2成纤维细胞—BIFN 3致敏T细胞—yIFN (三)产生机理 诱生剂一细胞一产生特异性因子结合抑制蛋甘千扰素基因解抑 IFN基因活化转录出干扰素mRNA 翻译蛋白质 (四)抗病毒机理 1.诱生剂与抑制蛋白结合 /利毒林因物质 人8“一-面 串/病毒基因物质 2.干扰素基因活化,干扰素产生并释放。 4.诱导细胞产生抗病毒蛋白。 新的基因物质 毒紧殖被抑布 蛋白 素前体 干扰素 干扰素激 感染细胞 十扰素作用过的佃胞 IFN的产生及其 抗病毒机制 (五)生物学活性: 1.抗病毒作用:出现早,限制病毒扩散(a-IFN、β-IFN活性较γ-IFN强) 2.免疫调节:y-FN活化NK、Tc细胞增强杀伤能力 抗肿瘤作用:yIFN调节癌基因表达,抑制细胞分裂 第三十章病毒感染的检查方法与防治原则 第一节检查方法 标本的采集与送检
一．体液免疫的保护作用 （一）中和抗体：由病毒的表面抗原刺激机体产生，可与表面抗原结合，阻止病毒吸附和穿 入易感细胞，保护细胞免受病毒感染． 1. IgM：出现早． 2. IgG：主要抗体。 3. IgA：ＳIgA 局部抗病毒． （二）补体结合抗体：抗体结合病毒抗原或细胞膜表面病毒抗原后，通过活化补体，类似溶 细胞作用破坏有胞膜病毒或溶解病毒寄生的宿主细胞． 二．细胞免疫： 由ＴC和ＴH1 细胞发挥作用。 三.干扰素的抗病毒作用： （一）干扰素(IFN) 是由病毒或其它干扰素诱生剂刺激单核吞噬细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等产生的糖蛋白， 具有高度活性及多种功能． （二）种类 1.白细胞——α-IFN 2.成纤维细胞——β-IFN 3.致敏 T 细胞——γ-IFN （三）产生机理 诱生剂 细胞 产生特异性因子 结合 抑制蛋白 干扰素基因解抑 IFN 基因活化转录出干扰素 mRNA 翻译蛋白质 （四）抗病毒机理 1.诱生剂与抑制蛋白结合。 2.干扰素基因活化,干扰素产生并释放。 4. 诱导细胞产生抗病毒蛋白。 IFN 的产生及其 抗病毒机制 （五）生物学活性： １．抗病毒作用：出现早，限制病毒扩散（α-IFN、β-IFN 活性较 γ-IFN 强） 2．免疫调节：γ-IFN 活化ＮＫ、ＴＣ 细胞增强杀伤能力． ３．抗肿瘤作用：γ-IFN 调节癌基因表达，抑制细胞分裂． 第三十章 病毒感染的检查方法与防治原则 第一节 检查方法 一．标本的采集与送检：
1.采集标本:早期(发病1-2天),根据感染部位采集 2.标本处理:严格无菌操作.本身带有杂菌的标本需用抗生素处理 3.冷藏送检:标本采后1-2小时送到,不能立即送检者,需放入含抗生素的50%甘油 缓冲盐水中、低温下保存送检 4.血清学检查:取双份血清(在发病初期和病后2-3周各取一份血清),后者抗体效 价较前者升高4倍以上,有诊断意义 二.分离培养与鉴定: (一).分离培养 (1).动物接种 (2).鸡胚培养 1鸡胚胎 6绒毛尿囊膜 2羊膜腔 7卵膜 3卵黄囊 8卵壳 4蛋清 气囊 5尿囊腔 (3).组织培养:从其来源,传代次数分为原代细胞、二配体细胞与传代细胞三种类型;从 其生长方式可分为单层细胞和悬浮细胞两种 (二).病毒的鉴定 1.病毒在细胞中增殖的指标 常有细胞圆缩、聚集、拉丝和脱落等,再有可行成多核巨细胞和包涵体 2.病毒感染性测定及病毒鉴定: 1).50%感染量(ID5)或50%组织细胞感染量(TCID50)测量法:ID5或TCID5使测 定病毒感染动物鸡胚或细胞后,引起50%发生死亡和病变的最小量 (2).蚀斑测定法: 是一种准确测定病毒感染性的方法 (3).新分离病毒的鉴定:鉴定较复杂,需按鉴定程序逐步做出确切诊断 三.病毒感染的快速诊断: (一)形态学检查 1.电镜和免疫电镜检査:有高浓度的病毒颗粒的样品 2.光学显微镜检查:大型病毒颗粒和包涵体 (二)检查病毒性抗原 采用免疫标记技术,检测标本中的抗原.此法敏感性高、特异性强、速度快 (三)1gM型抗病毒抗体的检测: 可用于病毒早期诊断,尤其是孕妇是否感染风疹病毒的诊断 (四)病毒核酸的检测: 1.核酸杂交技术: 利用DNA可易变性与复性的特性,制成用放射性核素和非放射性物质,标记的单链 DNA片段基因探针,与提纯的病毒核酸,及待测的变性DNA进行杂交,再用放射自显影 技术或其它显色法来确定与探针DNA是否有同源性
１．采集标本：早期（发病１–２天），根据感染部位采集． ２．标本处理：严格无菌操作．本身带有杂菌的标本需用抗生素处理． ３．冷藏送检：标本采后１–２小时送到，不能立即送检者,需放入含抗生素的 50﹪甘油 缓冲盐水中、低温下保存送检． ４．血清学检查：取双份血清（在发病初期和病后２–３周各取一份血清），后者抗体效 价较前者升高４倍以上，有诊断意义． 二．分离培养与鉴定： （一）．分离培养： ⑴. 动物接种 ⑵. 鸡胚培养． ⑶. 组织培养：从其来源，传代次数分为原代细胞﹑二配体细胞与传代细胞三种类型；从 其生长方式可分为单层细胞和悬浮细胞两种． （二）．病毒的鉴定： １．病毒在细胞中增殖的指标： 常有细胞圆缩﹑聚集﹑拉丝和脱落等，再有可行成多核巨细胞和包涵体． ２．病毒感染性测定及病毒鉴定： ⑴. 50﹪感染量（ID５０）或 50﹪组织细胞感染量（TCID５０）测量法：ID５０或 TCID５０使测 定病毒感染动物鸡胚或细胞后，引起 50﹪发生死亡和病变的最小量 ． ⑵. 蚀斑测定法： 是一种准确测定病毒感染性的方法． ⑶．新分离病毒的鉴定：鉴定较复杂，需按鉴定程序逐步做出确切诊断． 三．病毒感染的快速诊断： （一）形态学检查： １．电镜和免疫电镜检查：有高浓度的病毒颗粒的样品． ２．光学显微镜检查：大型病毒颗粒和包涵体． （二）检查病毒性抗原： 采用免疫标记技术，检测标本中的抗原．此法敏感性高、特异性强、速度快． （三）IgM 型抗病毒抗体的检测： 可用于病毒早期诊断，尤其是孕妇是否感染风疹病毒的诊断． （四）病毒核酸的检测： １．核酸杂交技术： 利用 DNA 可易变性与复性的特性，制成用放射性核素和非放射性物质，标记的单链 DNA 片段基因探针，与提纯的病毒核酸，及待测的变性 DNA 进行杂交，再用放射自显影 技术或其它显色法来确定与探针 DNA 是否有同源性．
(1)斑点核酸杂交 (2)细胞内原位杂交 (3)DNA印迹杂交 ()RNA印迹杂交 2.核酸扩增技术: 标本中核酸极其微量,可用体外核酸扩增技术,使较低水平的核酸在短时间内达到 定水平而检出 (1).聚合酶链反应 (2).连接酶链反应 (3).核酸序列扩增系统 (4).转录依赖性扩增系统. 多聚酶链式反应 多聚酶 53° 引物与单股 完全的链 每次循环酶促DNA 引物与新的和旧 考贝数增加一倍 的DNA链杂交 第二节病毒感染的防治原则 免疫预防: (一)人工自动免疫: 1.灭活疫苗:如流行性乙型脑炎疫苗、流感疫苗等. 2.减毒活疫苗:如脊髓灰质炎疫苗,麻疹疫苗等. 3.新型疫苗:如基因重组疫苗、基因缺失活疫苗 亚单位疫苗 二)人工被动免疫:丙种球蛋白、胎盘丙种球蛋白、转移因子, 二.病毒感染的治疗: (一)抗病毒的化学制剂: 1.核苷类物:无环鸟苷、叠氮胸苷等 2.蛋白酶抑制物 3.其它抗病毒抑制物 (二)干扰素和干扰素诱生剂 1.干扰素:广谱抗病毒作用 2.干扰素诱生剂:用于机体可诱生干扰素 (三)中草药的抗病毒作用
⑴ 斑点核酸杂交． ⑵ 细胞内原位杂交． ⑶ DNA 印迹杂交． ⑷ RNA 印迹杂交． ２．核酸扩增技术： 标本中核酸极其微量，可用体外核酸扩增技术，使较低水平的核酸在短时间内达到一 定水平而检出． ⑴．聚合酶链反应． ⑵．连接酶链反应． ⑶．核酸序列扩增系统． ⑷．转录依赖性扩增系统． 第二节 病毒感染的防治原则 一．免疫预防： （一）人工自动免疫： １．灭活疫苗：如流行性乙型脑炎疫苗﹑流感疫苗等． ２．减毒活疫苗：如脊髓灰质炎疫苗，麻疹疫苗等． ３．新型疫苗：如基因重组疫苗﹑基因缺失活疫苗． ４．亚单位疫苗． （二）人工被动免疫：丙种球蛋白﹑胎盘丙种球蛋白﹑转移因子． 二．病毒感染的治疗： （一）抗病毒的化学制剂： １．核苷类物：无环鸟苷﹑叠氮胸苷等． ２．蛋白酶抑制物． 3．其它抗病毒抑制物． （二）干扰素和干扰素诱生剂： 1．干扰素：广谱抗病毒作用． 2．干扰素诱生剂：用于机体可诱生干扰素． （三）中草药的抗病毒作用．
