20042005学年第二学期2004级一村一名大学生园艺班 《植物组织培养技术》期末考试试卷B 一、填空每空1分，共13分】 1.一个脱分化的植物细胞，之所以能够再生成完整的植株，是因为其具有 2植物组织培养按外植体不月可分 为 3植物组培时，培养环境湿度一般控制在 4组培常用的滑毒酒精浓度一般为 点不同外植体大小的一般鬓求是茎段长为()■，叶片大小为( ）cm,皆通茎 尖为()m。微茎尖为( 6植物组织培养污染从病原菌上分析可分为是( )污荣和()污染。 二、多项选择（每题2分，共20分） 1,一般组织培养室分为以下几个分室( A配置室B洗涤室C接种室 D.灭南室 E培养室E.观黎室G. 到化室或到化翻室 2接种室建造时，要求( 人墙壁光滑R.配缓冲间C.面积一般为6-7置D墙壁无缝 E安装横拉 门 &组培培养基州值一般为( A5.0且.5.8C7.0D7.5 4接种工具可用下列方法消毒灭菌() A灼烧灭菌民高压混热灭雷C.药刺除涂擦D.过滤除国 点用甲醛和高锰酸钾对空间和物体表面进行消毒灭商时，甲醛用量一般为每立方米 A5m1B.10mlC.15a120m1 6根据灭菌物体积大小、质地确定高压湿热灭菌时间，一般要求121℃，灭菌() A10-15alnB.20-40mlnC.50ain以上 7.升秉作为灭南剂，其浓度一般为() A1.0%且.0.5路C0.1%D.1.5%
2004-2005 学年第二学期 2004 级一村一名大学生园艺班 《植物组织培养技术》期末考试试卷 B 一、填空(每空 1 分，共 13 分) 1.一个脱分化的植物细胞，之所以能够再生成完整的植株，是因为其具有 。 2. 植物组织培养按外植体不同可分 为 、 、 、 、 。 3. 植物组培时，培养环境湿度一般控制在 。 4.组培常用的消毒酒精浓度一般为 。 5.不同外植体大小的一般要求是茎段长为( )cm，叶片大小为( ) cm，普通茎 尖为( ) mm， 微茎尖为( )mm。 6.植物组织培养污染从病原菌上分析可分为是（ ）污染和（ ）污染。 二、多项选择(每题 2 分，共 20 分) 1.一般组织培养室分为以下几个分室( ) A.配置室 B.洗涤室 C.接种室 D.灭菌室 E.培养室 F.观察室 G. 驯化室或驯化棚室 2.接种室建造时，要求( ) A. 墙壁光滑 B.配缓冲间 C.面积一般为 5-7 ㎡ D.墙壁无缝 E.安装横拉 门 3.组培培养基 PH 值一般为( ) A.5.0 B.5.8 C.7.0 D.7.5 4.接种工具可用下列方法消毒灭菌（ ） A.灼烧灭菌 B. 高压湿热灭菌 C. 药剂涂擦 D. 过滤除菌 5.用甲酫和高锰酸钾对空间和物体表面进行消毒灭菌时，甲酫用量一般为每立方米 （ ） A.5ml B. 10ml C.15ml D. 20ml 6.根据灭菌物体积大小、质地确定高压湿热灭菌时间，一般要求 121℃,灭菌( ) A. 10-15 min B. 20-40min C.50 min 以上 7.升汞作为灭菌剂，其浓度一般为( ) A.1.0% B.0.5% C.0.1% D.1.5%
&母液配制时要求选用《) 人蒸幅水R自米水C,无菌水D.矿泉水 身植物组织培养属于( 》范畴。 人微子螭殖B无性繁殖 C,有性繁殖 10植物组织培养若用蓝紫光理射，则蓝紫光属于光展条件中的《) A光质C,光强D光盟时间 三、名词解释（每题2分，共10分） . 外植体： 2 灭商： 3 愈伤组织： 根麦： 无病寿苗， 四、问容圈（共35分】 1.立式高压灭菌锅的具体使用方法。6分》 2简述组培培养基灭面后不凝固的可能原因有爆些？(？分】 3简述N44、从、24D、IB思、江、6-A、Z丁、GA8种激素的溶解方法。8分) 4简述试管苗的移栽方法。8分) 5简述热处理殿毒原理。(6分) 六，论述题（共22分） 1以制作配方为5，的培养基L为例，叙述组培培养基的配制步骤。（大量元煮母液为 10倍，微量元素母液、铁盐母液，有机物母液均为100倍》(10分) 2以茎段（外植体）接种为例，叙述无菌操作过程(12分)
8.母液配制时要求选用（ ） A. 蒸馏水 B. 自来水 C.无菌水 D.矿泉水 9. 植物组织培养属于( )范畴。 A.孢子繁殖 B.无性繁殖 C. 有性繁殖 10.植物组织培养若用蓝紫光照射，则蓝紫光属于光照条件中的（ ） A.光质 C.光强 D. 光照时间 三、名词解释(每题 2 分，共 10 分) 1. 外植体： 2. 灭菌： 3. 愈伤组织： 4. 褐变： 5. 无病毒苗： 四、问答题(共 35 分) 1. 立式高压灭菌锅的具体使用方法。(6 分) 2. 简述组培培养基灭菌后不凝固的可能原因有哪些？(7 分) 3.简述 NAA、IAA、2,4-D、IBA、KT、6-BA、ZT、GA8 种激素的溶解方法。(8 分) 4. 简述试管苗的移栽方法。(8 分) 5. 简述热处理脱毒原理。(6 分) 六、论述题(共 22 分) 1.以制作配方为 MS0 的培养基 1L 为例，叙述组培培养基的配制步骤。(大量元素母液为 10 倍，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为 100 倍)(10 分) 2. 以茎段(外植体)接种为例，叙述无菌操作过程(12 分)
20042005学年第二学期2004级一村一名大学生园艺班 《植物组织培养技术》期末考试试静B答案 一，填空（每空1分，共13分） 【.一个税分化的植物细胞，之所以整够再生成完整的植株，是因为具有细胞全能 性一 2植物组织培养一般过程可分为慎株培养、器官蜂养、组组培养一、一 细胞培差、厘牛顺体培。 &植物组培时，培养环境湿度一般控制在0一-选_ 4组培常用的滑毒酒精浓度一般为迹一透一· 5不同外植体大小的一般要求是茎段长为(】)cm,叶片大小为(0.5)cm,普通 茎尖为（几至几十），微茎尖为(0.3-0.5)m。 6植物组织培养污染从病原南上分析可分为是（细菌）污染和（真两）污染。 二，多项选择（每题2分，共20分） I.一胶组织培养室分为以下几个分室(ABCDEFG) A配置室R洗涤室C接种室D灭苗室E培养室，观察室G, 到化室暖酬化翻室 2接种蜜建造时，要求(ABCE) 人墙霍光滑B,配缓冲间C,面积一般为5-7rD精壁无髓 E安装桃拉 门 3组培培养基H值一般为(B) A5.0B.5.8C.7.0D7.5 4接种工具可川下列方法消毒灭南《C) L灼烧灭菌B高压湿热灭首C.药剂涂擦D.过滤除酒 5用甲险和高锰酸钾对空间和物体表面进行消毒灭菌时，甲险用量一般为每立方米 (B) A.5ml B.10ml C.15ml D.20ml 6根据灭菌物体积大小、颜地确定高压混热灭黄时问，一般要求121℃，灭葡(B) A10-l5min且.20-40minC.50ain以上 7.升汞作为灭茵剂，其浓度一般为(C)
2004-2005 学年第二学期 2004 级一村一名大学生园艺班 《植物组织培养技术》期末考试试卷 B 答案 一、填空(每空 1 分，共 13 分) 1.一个脱分化的植物细胞，之所以能够再生成完整的植株，是因为其具有 细胞全能 性 。 2. 植物组织培养一般过程可分为 植株培养 、 器官培养 、 组织培养 、 细胞培养、原生质体培养 。 3. 植物组培时，培养环境湿度一般控制在 70～80% 。 4.组培常用的消毒酒精浓度一般为 70%～75% 。 5.不同外植体大小的一般要求是茎段长为( 1 )cm，叶片大小为( 0.5 ) cm，普通 茎尖为( 几至几十 ) mm， 微茎尖为( 0.3～0.5 )mm。 6.植物组织培养污染从病原菌上分析可分为是（ 细菌 ）污染和（ 真菌 ）污染。 二、多项选择(每题 2 分，共 20 分) 1.一般组织培养室分为以下几个分室( ABCDEFG ) A.配置室 B.洗涤室 C.接种室 D.灭菌室 E.培养室 F.观察室 G. 驯化室或驯化棚室 2.接种室建造时，要求( ABCDE ) A. 墙壁光滑 B.配缓冲间 C.面积一般为 5-7 ㎡ D.墙壁无缝 E.安装横拉 门 3.组培培养基 PH 值一般为( B ) A.5.0 B.5.8 C.7.0 D.7.5 4.接种工具可用下列方法消毒灭菌（ ABC ） A.灼烧灭菌 B. 高压湿热灭菌 C. 药剂涂擦 D. 过滤除菌 5.用甲酫和高锰酸钾对空间和物体表面进行消毒灭菌时，甲酫用量一般为每立方米 （ B ） A.5ml B. 10ml C.15ml D. 20ml 6.根据灭菌物体积大小、质地确定高压湿热灭菌时间，一般要求 121℃,灭菌( B ) A. 10-15 min B. 20-40min C.50 min 以上 7.升汞作为灭菌剂，其浓度一般为( C )
A1.0%B.0.5路C0.1%D.1.5% &母液配制时要求选用(A） A燕管水R自来水C.无菌水D.矿泉水 9.植物组织培养属于(B)戴畸。 A微子繁殖B无性繁殖 C,有性繁殖 10.植物组织培养若用蓝紫光组射，则蓝紫光属于光属条件中的《A) 人光凝C,光强D光州时间 三，名闪解释（每题2分，共10分） 1. 外植体：从活体植物体上分离下来的用于离体培养的那部分无菌细胞、组 织或器官， 2 灭商：是番采用物理成化学方法杀死物体表面成环境中的一切微生物（包 括细国的芽孢和真菌的孢子) 3.愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生修力的一团不蜣划薄壁细胞，多在植 物体切面上 产生。 3 据变：是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化板蛋活，使氧胞里的酚 类物质氧化成棕揭色的醒类物质，不但使培养变成据色，而且外植体最后也变揭而死亡的现 象. & 无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒的苗术。亦称“检定苗” 四、问答题（共35分） 1立式高压灭商锅的具体使用方法。（俗分）》 ①接通电源，设置灭菌温度和灭陶时间：121一123℃，20一30mi.(1分) ②往外锅加水至高水位，另外再多加1L。(1分) ③往内锅故入特灭商物品，拧紧锅盖。关闭上排气阀。(1分)》 ④灭俩开始时，把下排气网旋细旋至最大(3档与4档之间)，当温度上升到108℃ 左右，通过调节下排气网，使压力表上的温度与显示盟度相一致。(2分) 回灭商时间到。关闭电源，取出物品。(1分》 2简述组培培养基灭面后不凝固的可能原因有爆线？(7分】 (1)琼带质量不合格(1分)
A.1.0% B.0.5% C.0.1% D.1.5% 8.母液配制时要求选用（ A ） A. 蒸馏水 B. 自来水 C.无菌水 D.矿泉水 9. 植物组织培养属于( B )范畴。 A.孢子繁殖 B.无性繁殖 C. 有性繁殖 10.植物组织培养若用蓝紫光照射，则蓝紫光属于光照条件中的（ A ） A.光质 C.光强 D. 光照时间 三、名词解释(每题 2 分，共 10 分) 1. 外植体：从活体植物体上分离下来的用于离体培养的那部分无菌细胞、组 织或器官。 2. 灭菌：是指采用物理或化学方法杀死物体表面或环境中的一切微生物（包 括细菌的芽孢和真菌的孢子） 3．愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则薄壁细胞，多在植 物体切面上 产生。 3. 4. 褐变：是指外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚 类物质氧化成棕褐色的醌类物质，不但使培养变成褐色，而且外植体最后也变褐而死亡的现 象。 5. 无病毒苗：指不含该种植物的主要危害病毒的苗木。亦称“检定苗” 四、问答题(共 35 分) 1. 立式高压灭菌锅的具体使用方法。(6 分) ① 接通电源，设置灭菌温度和灭菌时间：121－123℃,20－30min。 （1 分） ② 往外锅加水至高水位，另外再多加 1L。（1 分） ③ 往内锅放入待灭菌物品，拧紧锅盖，关闭上排气阀。（1 分） ④ 灭菌开始时，把下排气阀旋钮旋至最大（3 档与 4 档之间），当温度上升到 108℃ 左右，通过调节下排气阀，使压力表上的温度与显示温度相一致。（2 分） ⑤ 灭菌时间到，关闭电源，取出物品。（1 分） 2. 简述组培培养基灭菌后不凝固的可能原因有哪些？(7 分) （1）琼脂质量不合格(1 分)
(2)培界基相值过酸(2分) (3)培养基灭菌时间过长(1分) (4)单位体积培养基中踪脂重量不够(1分》 (5)高压灭药温度过高(1分》】 (6)培养基放置时间过长(1分) 3简述N44、[从，24-D,IB,T,-A,Z行、GA8种激素的溶解方法。8分) IA从、B、GA、ZI先溶95酒精再如水定容：3分) 从先溶于盐水或951酒精再知水：(1分) 2,4-D先溶于0.1MNa0图再加水：2分) T,M先溶于0.MC1再加水。(2分》 4.简述试管苗的移裁方法。《8分) ①基质的温配：按配方将基质进行混合。(1分) ②漫配基顺和容器的消毒：用01一0.2汽高锰酸钾对基质和容器进行喷酒清洗消毒(1 分) ③装体成穴盘：将基质装入容器中，压实，浇透水。(2分) ④试管苗的请洗：将试管首根部的培养基质清洗干净，以防污染并少伤根。(2分) 回试管菌的移裁，在容器内用竹签扎一小孔穴，将洗净的小苗栽入其中。周围压实 并轻浇薄水。(2分) 点简述热处理殿毒原理。(6分) 当植物组织处于高于正常渴度的环境(35-0℃)时(2分)，组织内部的精毒部分或 全部钝化，(3分)创寄主植物的组织很少或不会受到伤害(1分》· 六、论述题（共22分） 【,以制作配方为S的培养基1儿为例，叙述组培培养基的配制步骤。（大量元素母液 为10×，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为100×，激素母液浓度为1g/l)(ǖ0 分) (1》按配方移取各母液(1分)：大量元素母液为00如1，微量元素母液，铁盐母液，有机 物母液均为10ml。(1分】 2)定容：用蒸柳水定容至1L。(标题和内容各0.5分) (3》称量正糖和琼图：庭糖25一30k,琼霜7一8g,(标题和内容各Q5分)
（2）培养基 PH 值过酸(2 分) （3）培养基灭菌时间过长(1 分) （4）单位体积培养基中琼脂重量不够(1 分) （5）高压灭菌温度过高(1 分) （6）培养基放置时间过长(1 分) 3.简述 NAA、IAA、2,4-D、IBA、KT、6-BA、ZT、GA8 种激素的溶解方法。(8 分) IAA、IBA、GA、ZT 先溶 95%酒精再加水定容；(3 分) NAA 先溶于热水或 95%酒精再加水；(1 分) 2，4-D 先溶于 0.1M NaOH 再加水；(2 分) KT、BA 先溶于 0.1M HCl 再加水。 （2 分) 4. 简述试管苗的移栽方法。(8 分) ① 基质的混配：按配方将基质进行混合。（1 分） ② 混配基质和容器的消毒：用 0.1～0.2%高锰酸钾对基质和容器进行喷洒清洗消毒（1 分） ③ 装钵或穴盘：将基质装入容器中，压实，浇透水。（2 分） ④ 试管苗的清洗：将试管苗根部的培养基质清洗干净，以防污染并少伤根。（2 分） ⑤ 试管苗的移栽 ：在容器内用竹签扎一小孔穴，将洗净的小苗栽入其中，周围压实 并轻浇薄水。（2 分） 5. 简述热处理脱毒原理。(6 分) 当植物组织处于高于正常温度的环境（35-40℃）时（2 分），组织内部的病毒部分或 全部钝化，（3 分）但寄主植物的组织很少或不会受到伤害（1 分）。 六、论述题(共 22 分) 1. 以制作配方为 MS0 的培养基 1L 为例，叙述组培培养基的配制步骤。(大量元素母液 为 10×，微量元素母液、铁盐母液、有机物母液均为 100×，激素母液浓度为 1mg/ml)(10 分) (1)按配方移取各母液(1 分)：大量元素母液为 100ml，微量元素母液、铁盐母液、有机 物母液均为 10ml。(1 分) (2)定容：用蒸馏水定容至 1L。(标题和内容各 0.5 分) (3)称量蔗糖和琼脂：蔗糖 25－30g，琼脂 7－8g。(标题和内容各 0.5 分)
(4)培养基熬制：加入度糖和琼脂后进行培养液熬制，直至琅脂全部脸化。（标题和内容 各0.5分) 5)调州值：先用图计成图试纸测量后再用0,1用或C调州值为5.8一6.0。 (标题和内容各0.5分) 6)二次定容：当培养基熬制后总体积少干1L时要定容至1L。(标愿和内容各0.5分) (T)分装并扎瓶口：趁热分装，100加的三角瓶的装入30一40阳l,35瓶/八：（标题和内 容各0.5分 8)高压灭菌：及时灭商，121-123℃条件下保持20一30分钟。（标题和内容各0.5分） 9)冷却：特接种。（标题和内容各05分》 2以茎段（外植体）接种为例，叙述无黄操作过程(12分)。 《1)在接种仙前用甲醛高锰酸钾熏蒸楼种室，并打开室内紫外灯进行灭菌(0.5分) (2)接种前201n打开短净工作台的风机及台上的紫外灯(0.5分) (3)洗净双手，在援冲间换好专用实验服、相子、口罩，并换拖鞋。(Q5分) ()上工作台后，用清精棉球擦试双手和台面、接种工具和培养皿，接种工具和培养 皿再过火灭商。(1分) (5)将用白来水冲洗干净的材料一→用70-7酒精10-30心→0.1第HC1:浸泡1-10加m →无西水冲洗3-10次→放在无菌滤纸上西干水分(4分》 《6)切制材料：外植体原切口臂掉，茎切成含有一个节的小段，约1cm,节上图1/3 竹下图2/3，切除部分小叶。(3分) (7)打开待接凰口，并瓶口过火，将外植体轻轻插入培养基中，注意形态学上下璃。 瓶口再过火，扎口。(2分) (8)清理台面(0.5分)
(4)培养基熬制：加入蔗糖和琼脂后进行培养液熬制，直至琼脂全部融化。(标题和内容 各 0.5 分) (5) 调 PH 值：先用 PH 计或 PH 试纸测量后再用 0.1MNaOH 或 HCl 调 PH 值为 5.8－6.0。 (标题和内容各 0.5 分) (6)二次定容：当培养基熬制后总体积少于 1L 时要定容至 1L。(标题和内容各 0.5 分) (7)分装并扎瓶口：趁热分装，100ml 的三角瓶约装入 30－40ml, 35 瓶/L。(标题和内 容各 0.5 分 (8)高压灭菌：及时灭菌，121-123℃条件下保持 20－30 分钟。(标题和内容各 0.5 分) (9)冷却：待接种。(标题和内容各 0.5 分) 2. 以茎段(外植体)接种为例，叙述无菌操作过程(12 分)。 （1）在接种 4h 前用甲醛高锰酸钾熏蒸接种室，并打开室内紫外灯进行灭菌（0.5 分） （2）接种前 20min 打开超净工作台的风机及台上的紫外灯（0.5 分） （3）洗净双手，在缓冲间换好专用实验服、帽子、口罩，并换拖鞋。（0.5 分） （4）上工作台后，用酒精棉球擦试双手和台面、接种工具和培养皿，接种工具和培养 皿再过火灭菌。（1 分） （5）将用自来水冲洗干净的材料→用 70-75%酒精 10-30S →0.1% HgCl2 浸泡 1-10min →无菌水冲洗 3-10 次→放在无菌滤纸上沥干水分（4 分） （6）切割材料：外植体原切口剪掉，茎切成含有一个节的小段，约 1cm，节上留 1/3 节下留 2/3，切除部分小叶。（3 分） （7）打开待接瓶口，并瓶口过火，将外植体轻轻插入培养基中，注意形态学上下端。 瓶口再过火，扎口。（2 分） （8）清理台面（0.5 分）