02-03学年第2学期生技14、15雍《组织培养》期中考试试卷 姓名 学号 题号 三 四 五 大 七 八 总成销 得分 一、名词解释(18分) 1植物组织培养（广文） 无菌操作分离植物体一部分接种到培养基，在人工条件下培养直至生成完整植株。 2工厂化育苗 核一定工艺流程和规范化程序进行组织培养快速繁苗，并在人工议随条件下，进行壮苗 授量高质生产的一种现代育苗方式。 3外植体用米组培接种用的植物材料 4脱毒苗 通过组培脱毒方法。脱去植物体内影响产量和品质的病毒而获得的粗培苗术。 5灭鞠 用物理或化学方法，杀死物体表面和孔佩内一切微生物成生物体，即所有生命的物质全 部杀死。系曾阿底 6细型全能性 植物的体细围在适直条件下，通过分爱和繁殖。佳够发育成完整植株的潜在能力。 二，简答圈 1.组织培养有何特点3分) 1.培养条件可人工控制 2生长周期短，繁雅系数高 3管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 2,简答无菌操作步骤8分) A接种前h甲醛熏燕接种室，打开紫外灯 B接种前20如in打开超净台风机及台上繁外灯 C接种员洗手，在缓冲间换鞋、穿好实验展 D关掉繁外灯，打开日光灯，擦拭双手及台面
02-03 学年第 2 学期生技 14、15 班《组织培养》期中考试试卷 姓名 学号 题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总成绩 得分 一、名词解释（18 分） 1.植物组织培养（广义） 无菌操作分离植物体一部分接种到培养基，在人工条件下培养直至生成完整植株。 2.工厂化育苗 按一定工艺流程和规范化程序进行组织培养快速繁苗，并在人工设施条件下，进行壮苗 批量高质生产的一种现代育苗方式。 3.外植体 用来组培接种用的植物材料 4.脱毒苗 通过组培脱毒方法，脱去植物体内影响产量和品质的病毒而获得的组培苗木。 5.灭菌 用物理或化学方法，杀死物体表面和孔隙内一切微生物或生物体，即所有生命的物质全 部杀死。杀菌彻底 6.细胞全能性 植物的体细胞在适宜条件下，通过分裂和繁殖，能够发育成完整植株的潜在能力。 二、简答题 1.组织培养有何特点(3 分) 1.培养条件可人工控制 2.生长周期短，繁殖系数高 3.管理方便，利于工厂化生产和自动化控制 2. .简答无菌操作步骤(8 分) A 接种前 4h 甲醛熏蒸接种室，打开紫外灯 B 接种前 20min 打开超净台风机及台上紫外灯 C 接种员洗手，在缓冲间换鞋、穿好实验服 D 关掉紫外灯，打开日光灯，擦拭双手及台面
E擦拭楼种工具并反复灼烧，烘烤培养Ⅲ F接种完，清理台面 3图示说明母液及培养基配制一般流程(6分) (》配制母液：称药→视并溶解→定容→贴标签→保存。 2)培养基配制： 配制母液→移取母液→定容，称垂糖→加热熬化→调出植→分装→扎口→8灭茵→摆 平面。 4.简答接种材料清毒的一般流程及注意事项(6分) 流水冲洗 修整材料 70%酒精30s Q1升表5-8分钟 无商水冲 洗3-5次. 注意：？用蒸潮水定容。灭菌液要浸没材料修整材料大小要适宜，注意消毒时间 5简答组织培养室的空间构成及设计要求和主要仪器设备(10分) 洗涤室 配备上、下水道，上下水道要畅通：水槽、干燥箱，水槽铺橡胶，。完成试管苗出瓶及 装璃墨皿等仪器的清洗，干量和贮存。 配置室 完成培养基的配制，室内要求明亮通风， 配有工作台、药品粗、天平、授拌器、酸度计、篇馏水器、水浴钢、冰箱等。 灭南室 完成培养基、接种工具等的高压灭菌过程 配有高压夹南器、工作台 接种室 完成外植体分离、接种以及轮管过程。要求墙摩严密，光滑，面积了一8平方米，安装 拉动门。配有缓冲同。配有超净台、紫外灯和解制镜等。 培养室 以充分利用空间和节着能源为原则，目简大多以采用自然光照为主要修源：整高比培养 架略高。墙壁有绝热防火性能 配有空调、定时器、干提渴度计、照度计等 ,6,简述培养物焉变的单因及预睛措能(10分) 褐变的原因
E 擦拭接种工具并反复灼烧， 烘烤培养皿 F 接种完，清理台面 3.图示说明母液及培养基配制一般流程(6 分) (1) 配制母液:称药→搅拌溶解→定容→贴标签→保存。 (2)培养基配制： 配制母液→移取母液→定容，称蔗糖→加热熬化→调 pH 值→分装→扎口→8 灭菌→ 摆 平面。 4.简答接种材料消毒的一般流程及注意事项(6 分) 流水冲洗 修整材料 70%酒精 30S 0.1%升汞 5-8 分钟 无菌水冲 洗 3-5 次。 注意：?用蒸溜水定容。灭菌液要浸没材料 修整材料大小要适宜，注意消毒时间 5 简答组织培养室的空间构成及设计要求和主要仪器设备(10 分) 洗涤室 配备上、下水道，上下水道要畅通；水槽、干燥箱，水槽铺橡胶，。完成试管苗出瓶及 玻璃器皿等仪器的清洗、干燥和贮存。 配置室 完成培养基的配制，室内要求明亮通风， 配有工作台、药品柜、天平、搅拌器、酸度计、蒸馏水器、水浴锅、冰箱等。 灭菌室 完成培养基、接种工具等的高压灭菌过程 配有高压灭菌器、工作台 接种室 完成外植体分离、接种以及转管过程。要求墙壁严密、光滑，面积 7－8 平方米，安装 拉动门，配有缓冲间。配有超净台、紫外灯和解剖镜等。 培养室 以充分利用空间和节省能源为原则，目前大多以采用自然光照为主要能源；室高比培养 架略高，墙壁有绝热防火性能 配有空调、定时器、干湿温度计、照度计等 . 6.简述培养物褐变的原因及预防措施(10 分) 褐变的原因
(1)植物品种（基因型）(2)生理状态：材料：幼龄期<成年型 组织：细嫩组<老熟组织(3)培养基成分浓度过高的无机盐、CT水平过高 外植体在最适宜的服分化条件下，细胞大量增殖，邦制褐变。 (4)培养条作光腐过强。温度过高，培养时间过长，知速糊变。(5)材料转移时间 褐变的防止排施 (1)选择还宜的外植体(2)选择合适的培养条件 (3)连续培养(4)加抗氧化剂（℃、PWP、牛血清牛蛋白）(5)加01一0.5跳活性 炭 7.商答2.4D,M的作用(6分) 2,D属生长藏素类。诱导愈伤组织能力形成上活力高，国强烈抑制芽的形成。影响 琴官的发育。 队诱导芽的分化，促进侧芽前发生长，促进饵胞分裂与扩大，钟制根的分化。多用于 诱导不定葬的分化和茎、增殖。 8、茎尖培养能脱毒的原理是什么(5分】 染病植株体内病毒的分布不均匀，越靠近茎顶的感染深度越低，生长点（钓Q.1一1.O) 几乎不含减含病毒很少。原因是无雄管束，病毒只能通过数间连丝传递，不及细融不断分裂 和生长的速度。因此可利用微茎尖培养脱毒。 身。试管苗乳化移载时应注意厚些同愿(8分) [,保持小苗水分供需平街小苗生长后可逐新降程，其棚两端通风。 半个月后：期膜，控水。 2防止商类港生基质高压灭商成3路烘烤灭南。 适当使用杀菌剂。移栽时少伤苗，喷水如Q.1%尿素或1/2s大量元素液追肥，如快苗 生长 3给予一定温光条件适宜生根温度：18一0℃一，湿度低可如地热线. 移我初明弱光，后逐渐如强亮照，过波到自然光照。 4.注意基质配比并保特适当的通气性 基质配比：珍，蛭：草（腐殖土）=1：1：0.5或珍，草（腐殖土）=1：1 保持基质通气性：选颗粒状基质，浇水勿多。 三简述题 1.如何做好组培快繁计划的安排(12分)】
（1）植物品种（基因型）（2）生理状态：材料：幼龄期＜成年型 组织：细嫩组织＜老熟组织（3）培养基成分浓度过高的无机盐、CTK 水平过高 外植体在最适宜的脱分化条件下， 细胞大量增殖，抑制褐变。 （4）培养条件光照过强，温度过高，培养时间过长，加速褐变。（5）材料转移时间 褐变的防止措施 （1）选择适宜的外植体 （2）选择合适的培养条件 （3）连续培养 （4）加抗氧化剂（VC、PVP、牛血清牛蛋白）（5）加 0.1－0.5%活性 炭 7.简答 2，4-D、BA 的作用(6 分) 2，4-D 属生长激素类，诱导愈伤组织能力形成上活力高，但强烈抑制芽的形成，影响 器官的发育。 BA 诱导芽的分化，促进侧芽萌发生长，促进细胞分裂与扩大，抑制根的分化。多用于 诱导不定芽的分化和茎、增殖。 8、茎尖培养能脱毒的原理是什么(5 分) 染病植株体内病毒的分布不均匀，越靠近茎顶的感染深度越低，生长点（约 0.1－1.0） 几乎不含或含病毒很少。原因是无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，不及细胞不断分裂 和生长的速度。因此可利用微茎尖培养脱毒。 9. 试管苗驯化移栽时应注意哪些问题(8 分) 1.保持小苗水分供需平衡 小苗生长后可逐渐降湿，拱棚两端通风。 半个月后：揭膜，控水。 2.防止菌类滋生 基质高压灭菌或 3h 烘烤灭菌。 适当使用杀菌剂。移栽时少伤苗，喷水加 0.1%尿素或 1/2MS 大量元素液追肥，加快苗 生长。 3.给予一定温光条件 适宜生根温度：18－20℃一，温度低可加地热线。 移栽初期弱光，后 逐渐加强光照，过渡到自然光照。 4.注意基质配比并保持适当的通气性 基质配比：珍：蛭：草( 腐殖土)=1：1：0.5 或珍：草(腐殖土)=1：1 保持基质通气性：选颗粒状基质，浇水勿多。 三简述题 1.如何做好组培快繁计划的安排(12 分)
?耍确定（或限制）增殖瓶数 ?考虑每天增雅与生根的比例。试验后确定，一般3：7。 快速繁殖由提高增殖倍数、缩短增殖周期，周年生产三因煮决定。 ?实行有效的管理办法，达到人力物力的协调。从面提高生产效率 ?苗数及其它指标的计算 1.存架增殖总瓶数(T)一增殖周期内工作日数每工作日需用的母株瓶数S 2全年出瓶苗数(P)=全年总工作日*平均每个工作日出瓶苗数*《1一1%损耗率) 3实际年产苗数=全年产苗数*移载成活率 2如何鉴定草簪组培荷无毒？8分) 指示植物法：草木植物深用汁液涂沫法、小叶嫁接法：木木植物深用嫁接接种法。 抗血清鉴定法 ?电子显微镜检查法 ?棒联免疫鉴定法
?要确定（或限制）增殖瓶数 ?考虑每天增殖与生根的比例。试验后确定，一般 3：7。 ?快速繁殖由提高增殖倍数、缩短增殖周期，周年生产三因素决定。 ?实行有效的管理办法，达到人力物力的协调，从而提高生产效率 ?苗数及其它指标的计算 1.存架增殖总瓶数（T）＝增殖周期内工作日数 W*每工作日需用的母株瓶数 S 2.全年出瓶苗数（P）＝全年总工作日*平均每个工作日出瓶苗数*（1－10%损耗率） 3.实际年产苗数＝全年产苗数*移栽成活率 2.如何鉴定草莓组培苗无毒？(8 分) 指示植物法：草本植物采用汁液涂沫法、小叶嫁接法；木本植物采用嫁接接种法。 抗血清鉴定法 ?电子显微镜检查法 ?酶联免疫鉴定法